“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。......閱讀全文
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
DNA探針的技術優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
DNA探針的來源介紹
DNA探針根據其來源有3種:一種來自基因組中有關的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe);另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe)。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內含子序列。此外,還可在體外人工合成堿基數不
“DNA探針”的制備過程
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DNA切成小片段后(如用限制性內切酶做不完全水解)分別
DNA探針的制備方法
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DNA切成小片段后(如用限制性內切酶做不完全水解)分別
“DNA探針”的技術依據
DNA探針根據其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經轉錄獲得mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基
DNA探針的功能特性
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合,經放射自顯影或其他檢測手段就可以
電子探針的產品優勢
1、能進行微區分析。可分析數個μm3內元素的成分。2、能進行現場分析。無需把分析對象從樣品中取出,可直接對大塊試樣中的微小區域進行分析。把電子顯微鏡和電子探針結合,可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯系起來。3、分析范圍廣。Z>4其中,波譜:Be~U,能譜:Na~U。
什么是“DNA探針”?
DNA探針(DNA probe)是最常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團)進行標記;在適當的pH值、溫度和離子強度下,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合
DNA探針的標記實驗
探針標記法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測,必須將雜交鏈中的一
關于DNA探針的應用介紹
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,現場調查及蟲種鑒定,可用于病毒性肝炎的診斷,遺傳性疾病的診斷,可用于檢測飲用水病毒含量。具體方法:用一個特定的DNA片段制成探針,與被測的病毒DNA雜交,從而把病毒檢測出來。與傳統方法相比具有快速、靈敏的特點。傳統的檢測一次,需幾天或幾個星期的時間,精確度不高,而
DNA探針的標記實驗
核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻
DNA探針的標記實驗
實驗方法原理?分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測,必須將雜交鏈中的一條用某種可以檢測的進行標記,這條鏈就稱為核酸探針。因此,核酸探針的制備是分子雜交技術的關鍵。放射性同位素標記是最早采用的也是目前最常用的核酸探針標記方法。
“DNA探針”的分類及介紹
DNA探針分為兩類:同位素標記的探針和非同位素標記的探針。同位素標記的探針通常有很高的放射比活性,雜交的靈敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物處置困難,需要特殊的儀器和設備,不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展,如酶促標記法(如生物素、地高辛標記法)和化學標記法(如熒光生物素
DNA片段探針的應用實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 雜交液洗膜液儀器、耗材 注射器超聲儀水浴鍋實驗步驟 1. ?用5~20 ml 雜交液Ⅰ依次浸泡10~20張硝酸纖維素濾膜。濾膜裝入雜交袋中,加入足夠的雜交液,密封后42℃預雜交1 h。?2. ?往帶螺蓋的試管中,加入放射性探針和2 mg 超聲波處理的鯡魚精DNA,煮沸1
DNA探針的種類及其特點
核酸探針按性質劃分可分為基因組 DNA 探針、cDNA 探針、RNA 探針和人工合成的寡核苷酸探針等幾類。作為診斷試劑,較常使用的是基因組 DNA 探針和 cDNA 探針。其中,前者的應用最為廣泛,它的制備可通過酶切或聚合酶鏈反應(PCR)從基因組中獲得特異的 DNA 后將其克隆到質粒或噬菌體載體中
DNA探針檢測法的原理
原理:堿基互補配對。。探針:DNA單鏈-化學連接的標記基團探針和目標DNA(經過加熱,分成單鏈)混合,探針結合的目標DNA就會被標記
DNA片段探針的應用實驗
甲酰胺法 水溶液中雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
掃描探針顯微鏡的優勢
SPM作為新型的顯微工具與以往的各種顯微鏡和分析儀器相比有著其明顯的優勢: 首先,SPM具有極高的分辨率。它可以輕易的“看到”原子,這是一般顯微鏡甚至電子顯微鏡所難以達到的。 其次,SPM得到的是實時的、真實的樣品表面的高分辨率圖像。而不同于某些分析儀器是通過間接的或計算的方法來推算樣品的表
電子探針的技術優勢
1、能進行微區分析。可分析數個μm3內元素的成分。2、能進行現場分析。無需把分析對象從樣品中取出,可直接對大塊試樣中的微小區域進行分析。把電子顯微鏡和電子探針結合,可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯系起來。3、分析范圍廣。Z>4其中,波譜:Be~U,能譜:Na~U。
DNA探針原位雜交
1、4—6微米切片,用防脫片膠(多聚賴氨酸)處理過的玻片貼附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鮮二甲苯脫蠟,10minX2(趁熱脫蠟) 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空氣干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸餾水稀釋,濃度為25μg/ml),37℃消化1
DNA疫苗的功能優勢
①DNA接種載體(如質粒)的結構簡單,提純質粒DNA的工藝簡便,因而生產成本較低,且適于大批量生產;②DNA分子克隆比較容易,使得DNA疫苗能根據需要隨時進行更新;③DNA分子很穩定,可制成DNA疫苗凍干苗,使用時在鹽溶液中可恢復原有活性,因而便于運輸和保存;④比傳統疫苗安全,雖然DNA疫苗具有與弱
化學發光探針技術的應用優勢
化學發光探針技術可在30分鐘內快速確定 病原體,并可直接于固體或液體培養基上鑒定目標微生物。該方法可直接應用于國外生產的LEADER 50i檢測儀上,儀器自動注入檢測試劑,立刻測量標記物所產生化學反應的化學發光強度,并自動計算結果及打印報告,該檢測方法敏感性高,特異性強,檢測成本低,操作簡便、快
脫水篩的性能優勢
1、脫水篩的振動電機,更換方便,底座橡膠彈簧用來減震,使振幅不大,緩慢的振動,可以脫得干凈。 2、可以根據產量和含水量來定制,機身的側板有加強板,底部裝有支撐,底部打有橫條,出料口加有三角形鋼板支撐,板材厚, 3、振動電機固定采用高強度螺栓,底部彈簧為橡膠彈簧,彈簧的質量會影響振動電機的壽命
DNA基因探針的克隆方法介紹
對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質,然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列,然后根據這一序列合成一套寡核苷酸探針。用此探針在DNA文庫中篩選,陽性克隆即是目標蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細胞和原核細胞DNA組織有所
DNA探針標記常用試劑的配制
(1)10 ×缺口平移緩沖液:200mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2;100mmol/Lβ-巰基乙醇、1mg/ml BSA。 (2)缺口平移反應終止液:200mmol/L NaCl;10mmol/l Tris-HCl,pH7.4; 11mmol/L
關于DNA探針的主要優點介紹
對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質,然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列,然后根據這一序列合成一套寡核苷酸探針。用此探針在DNA文庫中篩選,陽性克隆即是目標蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細胞和原核細胞DNA組織
DNA探針的基本信息介紹
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合,經放射自顯影或其他檢測手段就可以
DNA探針的概念和應用特點
DNA探針(DNA probe)是最常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團)進行標記;在適當的pH值、溫度和離子強度下,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合