新技術：一種新型DNA結構的熒光張力探針
基于新型DNA結構的分子力學探針原理及細胞力學可視化研究 武漢大學供圖 近日，《自然—細胞生物學》在線發表了武漢大學高等研究院教授劉鄭課題組在生物物理交叉領域的最新研究成果。課題組設計出一種新型DNA結構的熒光張力探針，并應用于活細胞運動過程的機械力可視化研究。該技術有望成為研究腫瘤細胞遷移、免疫細胞識別和激活等機械力深度參與生命過程的重要工具。 論文題目為《用于觀察活細胞中強機械力傳遞的可逆性剪切DNA探針》，高等研究院2018級博士研究生李洪云為第一作者，劉鄭為唯一通訊作者。合作者包括武漢大學生命科學學院研究員張興華及其團隊的博士生張晨、中山大學教授馬杰。第一作者單位為武漢大學。 電學、化學和力學是細胞內最常見的三大信號系統，它們相互協調，共同維持著細胞的生命活動。前兩者已被廣泛研究,而細胞的機械力信號傳遞過程因缺少有效的研究方法，人類對其認識有限。實際上，細胞的生命過程不斷地受到擠壓、拉伸、彎曲和拉扯細胞外基......閱讀全文
新型DNA結構的熒光張力探針于活細胞機械力可視化研究
電學、化學和力學是細胞內最常見的三大信號系統，它們相互協調，共同維持著細胞的生命活動。前兩者已被人們廣泛研究,而細胞的機械力信號傳遞過程因缺少有效的研究方法，人們一直對其認識有限。研究表明，細胞在體內擁擠的環境中不僅通過擠來擠去以獲得足夠的生存空間，同時，細胞的生命過程也不斷的受到擠壓、拉伸、彎
開爾文探針力顯微鏡的開爾文探針力顯微鏡
原子力顯微鏡（atomic force microscope，簡稱AFM），也稱掃描力顯微鏡（scanning force microscope，SFM）是一種納米級高分辨的掃描探針顯微鏡，優于光學衍射極限1000倍。原子力顯微鏡的前身是掃描隧道顯微鏡，是由IBM蘇黎士研究實驗室的海因里希·羅雷
機械力轉導的作用
中文名稱機械力轉導英文名稱mechanotransduction定 義細胞在接受包括摩擦力、壓力、牽引力、重力和剪切力等機械力刺激時，將這些刺激信號的機械能轉化為電信號或生物化學信號并最終引起細胞生理反應的過程。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），信號轉導（二級學科）
機械力轉導的定義
中文名稱機械力轉導英文名稱mechanotransduction定 義細胞在接受包括摩擦力、壓力、牽引力、重力和剪切力等機械力刺激時，將這些刺激信號的機械能轉化為電信號或生物化學信號并最終引起細胞生理反應的過程。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），信號轉導（二級學科）
什么是“DNA探針”？
DNA探針(DNA probe)是最常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團)進行標記;在適當的pH值、溫度和離子強度下,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合
原子力顯微鏡探針、原子力顯微鏡及探針的制備方法
原子力顯微鏡探針、原子力顯微鏡及探針的制備方法。原子力顯微鏡探針包括探針本體和設置在探針本體的針尖一側的接觸體，接觸體具有連接段和接觸段，接觸段具有接觸端面；接觸段為二維材料，且接觸端面為原子級光滑且平整的單晶界面。本發明ZL技術的原子力顯微鏡探針可精確地檢測受測樣品的各種性質。介紹隨著微米納米科學
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
“DNA探針”的技術依據
DNA探針根據其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經轉錄獲得mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20～50個堿基的與基
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
DNA探針原位雜交
1、4—6微米切片,用防脫片膠（多聚賴氨酸）處理過的玻片貼附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鮮二甲苯脫蠟,10minX2（趁熱脫蠟） 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空氣干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液（蛋白酶K用蒸餾水稀釋,濃度為25μg/ml）,37℃消化1
DNA探針的來源介紹
DNA探針根據其來源有3種：一種來自基因組中有關的基因本身,稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針（cDNA probe）。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內含子序列。此外,還可在體外人工合成堿基數不
DNA探針的功能特性
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合,經放射自顯影或其他檢測手段就可以
“DNA探針”的制備過程
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DNA切成小片段后(如用限制性內切酶做不完全水解)分別
DNA探針的制備方法
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針，常常是比較煩瑣的。以細菌為例，細菌的基因組大小約為5×106堿基，約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針，通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法，即將細菌DNA切成小片段后（如用限制性內切酶做不完全水解）分別
機械力實現人造細胞分裂
地球上生命的成功是基于活細胞分裂成兩個子細胞的驚人能力。在這樣的分裂過程中，細胞外膜必須經歷一系列的形態轉變，最終膜分裂。近日，德國馬普學會膠體與界面研究所和聚合物研究所的研究人員，通過在人工細胞膜上固定低密度的蛋白質，現在已經實現了對這些形狀轉變和由此產生的分裂過程前所未有的控制。
機械力實現人造細胞分裂
地球上生命的成功是基于活細胞分裂成兩個子細胞的驚人能力。在這樣的分裂過程中，細胞外膜必須經歷一系列的形態轉變，最終膜分裂。近日，德國馬普學會膠體與界面研究所和聚合物研究所的研究人員，通過在人工細胞膜上固定低密度的蛋白質，現在已經實現了對這些形狀轉變和由此產生的分裂過程前所未有的控制。 為了控制
機械力敏感通道的結構功能
中文名稱機械力敏感通道英文名稱mechanosensitive channel定 義介導細胞對機械力刺激(如對細胞膜受到的壓力)做出反應的離子通道。能夠將機械力轉化為電及化學信號。此類離子通道可以分為多個家族，廣泛見于各種生物。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），信號轉導（二級學科）
機械力如何影響干細胞分化？
采用一種獨特的工具箱，研究人員就能用珠子按摩細胞，以了解機械力如何影響干細胞分化。 間充質干細胞――是不斷更新我們的骨骼、軟骨和肌肉的成體干細胞，因為它們可大量生產各種各樣不同的愈合因子，因此被認為具有治療疾病的巨大潛力。大量的臨床試驗正在研究這些細胞，用于許多疾病（從糖尿病到脊髓損傷）的治
機械力如何影響干細胞分化？
采用一種獨特的工具箱，研究人員就能用珠子按摩細胞，以了解機械力如何影響干細胞分化。 間充質干細胞——是不斷更新我們的骨骼、軟骨和肌肉的成體干細胞，因為它們可大量生產各種各樣不同的愈合因子，因此被認為具有治療疾病的巨大潛力。大量的臨床試驗正在研究這些細胞，用于許多疾病（從糖尿病到脊髓損傷）的治療
納米機械力引發細胞自噬
機械力刺激在細胞生長、分化與通訊等重要生命活動中發揮關鍵作用。近年來，機械門控離子通道蛋白Piezo的發現為在分子水平理解機械力對于生物體的作用奠定了基礎。然而，如何在單細胞水平定量分析機械力對于細胞效應的作用仍然是一個難題。近日，上海交通大學樊春海院士、邵志峰教授與中國科學院上海高等研究院胡鈞
原子力顯微鏡探針簡介
原子力顯微鏡（AFM),是一種具有原子分辨率的表面形貌、電磁性能分析的重要儀器。首臺原子力顯微鏡在1985年研發成功，其模式可分為接觸模式和輕敲模式等多種模式。AFM探針由于應用范圍僅限于原子力顯微鏡，屬于高科技儀器的耗材，應用領域不廣，全世界的使用量也不多。主要的生產廠家分布在德國，瑞士，保加
植物DNA提取實驗——機械法
植物DNA提取實驗用于：（1）獲得較純的真核細胞基因組DNA；（2）后續PCR分析，RFLP分析，基因文庫的構建，基因探測等的研究。實驗方法原理這是一種快速簡便提取植物總DNA的方法。先將新鮮的葉片在液氮中研磨，以機械力破碎細胞壁，然后加入十六烷三甲基溴化銨分離緩沖液，使細胞膜破裂。同時將核酸與植物
DNA片段探針的應用實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 雜交液洗膜液儀器、耗材 注射器超聲儀水浴鍋實驗步驟 1. ?用5~20 ml 雜交液Ⅰ依次浸泡10~20張硝酸纖維素濾膜。濾膜裝入雜交袋中，加入足夠的雜交液，密封后42℃預雜交1 h。?2. ?往帶螺蓋的試管中，加入放射性探針和2 mg 超聲波處理的鯡魚精DNA，煮沸1
DNA探針根據其來源分類
DNA探針根據其來源有3種：一種來自基因組中有關的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA，再通過逆轉錄得到的探針，稱為cDNA探針（cDNA probe）。與基因組探針不同的是，cDNA探針不含有內含子序列。此外，還可在體外人工合成堿基數不多的
DNA探針的標記實驗
核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下可按堿基互補原則形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針；根據標記物不同，可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類；根據是否存在互補鏈，可分為單鏈和雙鏈探針；根據放射性標記物摻入情況，可分為均勻
DNA探針的標記實驗
實驗方法原理?分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測，必須將雜交鏈中的一條用某種可以檢測的進行標記，這條鏈就稱為核酸探針。因此，核酸探針的制備是分子雜交技術的關鍵。放射性同位素標記是最早采用的也是目前最常用的核酸探針標記方法。
DNA探針的標記實驗
探針標記法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測，必須將雜交鏈中的一
地高辛配基隨機標記DNA探針
1．標記DNA探針 每次標準的反應可標記10ng至3μg線性的DNA，也可標記更大量的DNA，但所有的成分和體積要相應增加。 （1）DNA探針熱變性，煮沸10min，迅速冷卻于冰/乙醇中5min以上，待用。 （2）取Eppendorf管（1.5ml）置于冰上，加下列及試劑：
DNA片段探針的應用實驗
甲酰胺法 水溶液中雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
“DNA探針”的分類及介紹
DNA探針分為兩類:同位素標記的探針和非同位素標記的探針。同位素標記的探針通常有很高的放射比活性,雜交的靈敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物處置困難,需要特殊的儀器和設備,不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展,如酶促標記法(如生物素、地高辛標記法)和化學標記法(如熒光生物素