免疫印跡與免疫檢測實驗——親和素生物素偶聯
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TTBS緩沖液TBS緩沖液過氧化物酶堿性磷酸酶儀器、耗材搖床硝酸纖維素膜尼龍膜實驗步驟1. 在旋轉搖床或擺動平臺中持續搖動使膜與合適的封閉液平衡。對于硝酸纖維素膜或PVDF膜，需在室溫封閉30~60 min。尼龍膜則需在37℃封閉2 h。2. 用TTBS溶液（用于硝酸纖維素膜或PVDF膜）或TBS溶液（用于尼龍膜）稀釋第一抗體。3. 從封閉液中取出膜，放入第一抗體溶液中。于37℃緩慢搖動30 min。4. 在TTBS或TBS中洗膜3次，毎次超過15 min。5. 稀釋2滴生物素酰化第二抗體于50~100 ml TTBS或TBS溶液以制備第二抗體工作液。6. 將膜移入第二抗體工作液。室溫中緩慢搖動30 min，然后按步驟4洗膜。7. 當膜還與第二抗體共育吋，制備親和素-生物素酰化HRPO或AP的復合物。將2滴Vectast......閱讀全文
免疫印跡與免疫檢測實驗——親和素生物素偶聯
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TTBS緩沖液TBS緩沖液過氧化物酶堿性磷酸酶儀器、耗材搖床硝酸纖維素膜尼龍膜實驗步驟1. ?在旋轉搖床或擺動平臺中持續搖動使膜與合適的封閉液平衡。對于硝酸纖維素膜或PVDF膜，需在室溫封閉30~60 min。尼龍膜則需在37℃封閉2 h。2. ?用TTBS溶液（用于硝酸纖
免疫印跡與免疫檢測
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 轉移緩沖液儀器、耗材 搖床海綿纖維素膜尼龍膜電轉儀實驗步驟 1. ?制備抗原樣品，并用小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠分離蛋白，在一個或多個泳道中分離預染色或生物素酰化的蛋白質分子量標準。2. ?電泳完成后，拆卸凝膠夾層，去除積層膠。以適量的轉移緩沖液室溫平衡凝膠30 m
免疫印跡與免疫檢測實驗——發光底物顯跡
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒Tris緩沖液發光底物顯跡液PBS磷酸鹽儀器、耗材保鮮膜搖床實驗步驟1. ?用50 ml 底物緩沖液洗膜兩次以平衡膜，每次15 min。?2. ?對于使用硝酸纖維素膜或PVDF膜進行的堿性磷酸酶反應：膜置于Nitro-Block溶液中5 min，然后以50 ml 底物緩沖液
親和層析－－生物素/親和素純化
低耐壓：生物素瓊脂糖微球生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品，生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的，最大限度避免配基脫落。?這種結合非常緊密，可以應用于不可逆結合（如：從某個樣本中去除親和素組分）高耐壓：鏈霉親和素 HC 瓊脂糖微球?ABT Streptavi
免疫印跡與免疫檢測實驗——第二抗體歐聯物進行免疫檢測
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒封閉緩沖液TTBS緩沖液第一抗體TBS緩沖液儀器、耗材手套搖床實驗步驟1. ?將膜放入可熱密封的塑料袋，加5 ml 封閉液，密封塑料袋，在旋轉搖床或擺動平臺中搖動30~60 min。?2. ?用封閉液稀釋第一抗體（取決于抗體和檢測系統，以1：10~1：100 000稀釋）。
免疫印跡與免疫檢測實驗——發色底物顯跡
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒Tris緩沖液發色底物顯跡液PBS磷酸鹽儀器、耗材搖床實驗步驟1. ?在室溫以PBS洗膜15 min 以去除過量的磷酸鹽和Tween 20。2. ?將膜放入發色底物顯跡液，條帶應在10~30 min 內出現。3. ?用蒸餾水洗膜，終止反應。晾干后拍照留永久的記錄。
鏈親和素生物素結合物免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光
鏈親和素生物素結合物免疫熒光標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 生物素熒光染料鏈親和素儀器、耗材 離心機搖床實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。?3.
生物素親合素系統的生物素與親和層析介紹
親和層析是將具有特殊結構的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時，與吸附劑具有親和能力的蛋白質就會被吸附而滯留在層析柱中。那些沒有親和力的蛋白質由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質分開，然后選用適當的洗脫液， 改變結合條件將被結合的蛋白質洗脫下來。 生
生物素親和素系統介紹
生物素－親和素系統（Biotin-Avidin—System，BAS）是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應，使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。BAS目前已廣泛用于抗原、抗體的定性、定量檢測及定位觀察研究。生物素（biotin，B）
生物素親和素標記缺點
靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合，形成的生物素衍生物，不僅保持了大分子物質的原有生物活性，而且比恬度高，具多價性。此外，每個親和素分子有四個生物素結合部位，可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此，BAS具有多級放大作用，使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異
標記親和素生物素法（BAELISA）實驗
檢測未知抗原 檢測未知抗體 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，對生物素有非常高的親和力（結合常數高達1015M-1）。
標記親和素生物素法（BAELISA）實驗
實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，對生物素有非常高的親和力（結合常數高達1015M-1）。生物素很易與蛋白質（如抗體等）以共價鍵結合。這樣，結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應，既起到了多級放大作用，又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色，達到檢測未知抗原
生物素親和素酶聯免疫吸附試驗(BASELISA)
生物素親和素(又稱抗生物素)系統(biotinavidin system,BAS)標記抗體的技術是20世紀70年代后期發展起來的一種新的免疫檢測方法。由于親和素與生物素間的親和力極強，結合迅速，且極其穩定，生物素標記抗體和酶的標記率高，又不影響蛋白的活性，使BAS標記技術比常規酶聯免疫、放
免疫印跡與免疫檢測實驗——轉移槽轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材搖床海綿纖維素膜尼龍膜電轉儀實驗步驟1. ?制備抗原樣品，并用小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠分離蛋白，在一個或多個泳道中分離預染色或生物素酰化的蛋白質分子量標準。2. ?電泳完成后，拆卸凝膠夾層，去除積層膠。以適量的轉移緩沖液室溫平衡凝膠30 min。3
SABC法親和素與生物素系統的操作流程
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法，它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質，相對分子質量60000，不含
SABC法親和素與生物素系統的操作流程
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法，它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質，相對分子質量60000，不含
親和素和生物素為什么親和力最高
生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合，形成的生物素衍生物，不僅保持了大分子物質的原有生物活性，而且比恬度高，具多價性。此外，每個親和素分子有四個生物素結合部位，可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此，BAS具有多級放大作用，使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異性親和
親和素生物素系統：如何減少干擾更好地應用于免疫...
親和素-生物素系統：如何減少干擾更好地應用于免疫檢測-1-什么是親和素-生物素系統（鏈霉）親和素-生物素是免疫檢測中常用的信號放大系統。親和素是蛋清中常見的糖類蛋白，由四個相同的亞基組成。每一個亞基都包含一個生物素結合位點，因此一個理論上正常的親和素能夠結合4個生物素。親和素與生物素具有非常強烈的親
免疫印跡與免疫檢測實驗——半干轉移系統轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材半干燥轉移裝置濾紙實驗步驟1. ?制備樣品，并在小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠上分離蛋白質。?2. ?準備轉印膜3. ?拆卸凝膠夾層，除去積層膠。4. ?組裝轉印夾層：Mylar聚酯薄膜屏蔽物3張以轉移緩沖液飽和的濾紙已平衡的轉印膜凝膠3張以轉移緩沖液飽
標記親和素生物素法（BAELISA）實驗——檢測未知抗原
實驗方法原理親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，對生物素有非常高的親和力（結合常數高達1015M-1）。生物素很易與蛋白質（如抗體等）以共價鍵結合。這樣，結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應，既起到了多級放大作用，又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色，達到檢測未知抗原（
標記親和素生物素法（BAELISA）實驗——檢測未知抗體
實驗方法原理包被抗原：用0.05 mol/L pH9.6碳酸鹽緩沖液將已知的抗原作適當稀釋，于聚苯乙烯酶標板的孔中加0.1 ml，于4 ℃放置18～24 h。用洗滌緩沖液洗3次，每次3 min。?加樣：加適當稀釋的待檢樣品（未知抗體）于反應孔中，同時作空白、陰性和陽性對照孔。37 ℃孵育1 h，洗滌
生物素姊妹篇鏈霉親和素及其衍生物的應用（一）
? ? ? ?上一期我們給大家介紹了目前在生化實驗中被廣泛使用的生物素-鏈霉親和素結合系統，以及其中的第一個成員——生物素及其衍生物以及他們的一些常規的應用，今天給大家帶來了該系統中另外一個重要的成員——鏈霉親和素及其衍生物，與生物素類似，鏈霉親和素分子本身也較小，同時也可以與生物活性大分子（例
親和素－生物素系統在ELISA中的應用
親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結合。維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，生物素－羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子
生物素親和素系統要注意什么問題
靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合，形成的生物素衍生物，不僅保持了大分子物質的原有生物活性，而且比恬度高，具多價性。此外，每個親和素分子有四個生物素結合部位，可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此，BAS具有多級放大作用，使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異
親和偶聯－－氨基
?固相技術是一種將配基（酶、抗體、親和蛋白等）偶聯到支持結構（如瓊脂糖）上的技術，該技術提供了高穩定性和易于重復使用的固定化分子。親和配體的偶聯及其在層析中的應用已經擴展到了許多領域，包括純化程序，去除污染組分和生物催化。?ABT 提供種類繁多的預活化凝膠，旨在通過穩定的偶聯配體和不帶電荷的共價鍵，
親和偶聯－－羧基
固相技術是一種將配基（酶、抗體、親和蛋白等）偶聯到支持結構（如瓊脂糖）上的技術，該技術提供了高穩定性和易于重復使用的固定化分子。親和配體的偶聯及其在層析中的應用已經擴展到了許多領域，包括純化程序，去除污染組分和生物催化。ABT 提供種類繁多的預活化凝膠，旨在通過穩定的偶聯配體和不帶電荷的共價鍵，最大
生物素親和素法化學染色有哪些技術呢
生物素即維生素H，是一種堿性蛋白。親和素具有4個與生物素親和力極高的結合位點。能夠彼此牢固結合而不影響彼此的生物學活性。常用的技術類型有： （一）親和素-生物素-過氧化物酶復合物技術（ABC） 原理：親和素與酶標生物素結合，形成可溶性親和素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）。其與生物素化抗
簡述親和素－生物素系統在ELISA中的應用
親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結合。維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，生物素－羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小
生物素親和素系統的基本類型及原理
基本類型有兩種，一類以游離親和素為中間物，分別連接包含生物素大分子的待檢反應體系和標記生物素，稱為BAB法；后來又在此基礎上發展了親和素-生物素化酶復合物技術（ABC）。另一類是直接用標記親和素連接生物素化大分子反應體系進行檢測的BA法，或稱標記親和素-生物素法（LAB）。此外，依據待檢反應體系中所