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    親和層析生物素/親和素純化

    低耐壓:生物素瓊脂糖微球生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品,生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的,最大限度避免配基脫落。 這種結合非常緊密,可以應用于不可逆結合(如:從某個樣本中去除親和素組分)高耐壓:鏈霉親和素 HC 瓊脂糖微球 ABT Streptavidin 6HC 是用于固定生物素化的生物分子,重組鏈霉親和素通過高度交聯固定在 6% 的瓊脂糖微球上。如果貴公司對定制化瓊脂糖凝膠感興趣,并希望獲取更多的信息,請關注Agarose Bead Technologies (ABT)微信公眾號如需咨詢或訂購請撥打全國服務電話:400-9910-165 / 028-85568133......閱讀全文

    親和層析--生物素/親和素純化

    低耐壓:生物素瓊脂糖微球生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品,生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的,最大限度避免配基脫落。?這種結合非常緊密,可以應用于不可逆結合(如:從某個樣本中去除親和素組分)高耐壓:鏈霉親和素 HC 瓊脂糖微球?ABT Streptavi

    生物素親合素系統的生物素與親和層析介紹

      親和層析是將具有特殊結構的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中,當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時,與吸附劑具有親和能力的蛋白質就會被吸附而滯留在層析柱中。那些沒有親和力的蛋白質由于不被吸附,直接流出,從而與被分離的蛋白質分開,然后選用適當的洗脫液, 改變結合條件將被結合的蛋白質洗脫下來。  生

    親和層析--抗體純化

    蛋白 A(Protein A)瓊脂糖微球蛋白 A(Protein A)是金黃色葡萄球菌的細胞壁成分。它由一條多肽鏈組成,其中包含五個抗體結合結構域。這些高親和力結合域和免疫球蛋白 G(IgG)的 Fc 區域特異性結合。其他類型如 IgA 和 IgM 可能可以通過和 抗體 Fab 片段相互作用與蛋白

    親和層析純化胰酶

    一、實驗目的與原理生物大分子化合物的重要特征之一是具有與某些相對應的分子通過次級鍵或共價鍵專一結合的能力即親和力。例如酶與抑制劑之間,抗原與抗體之間,結合的雙方不僅是專一的,而且結合以后可以在不喪失生物活性的基礎上用物理或化學的方法進行解離。根據這一特性,如果把具有親和力的一對分子的某一方連接于水不

    生物素親和素系統介紹

    生物素-親和素系統(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應,使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。BAS目前已廣泛用于抗原、抗體的定性、定量檢測及定位觀察研究。生物素(biotin,B)

    生物素親和素標記缺點

    靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異

    凝集素親和層析法純化蛋白質實驗

    刀豆素 A 親和柱純化蛋白質 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如,刀豆素 A(Con A)與糖蛋白含有的葡萄糖

    凝集素親和層析法純化蛋白質實驗

    實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如,刀豆素 A(Con A)與糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖結合,而麥芽凝集素只與具 N-乙酰葡糖胺的蛋白質結合。胞膜糖蛋白常與麥芽凝集素結合,而可溶性糖蛋白卻通常用 Con A 或扁豆凝集素親和柱純化。由于在許多情

    凝集素親和層析法純化蛋白質實驗

    凝集素是能可逆性結合碳水化合物的蛋白質。因為絕大多數凝集素至少每個分子有兩個碳水化合物結合部位,所以它們可以沉淀糖蛋白和凝集細胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的親和配基,具有單糖的糖蛋白可用溫和的蛋白質冼脫條件分離。雖然凝集素親和層折沒有很高的選擇性,但是無疑它已成為蛋白質純化的一種常用方法。它通常作為

    蛋白質純化親和層析法

    若表達蛋白質上含有一段六個His 的片段,而親和吸附膠上接有鎳離子,此蛋白質會特異性地結合到吸著膠體;洗去雜質后可imidazole 洗脫目標蛋白質。(Pharmacia 操作手冊, Affinity Chromatography)。儀器設備:親和層析管柱 (Bio-Rad 731-1550 Pol

    抗體的親和層析法純化技術

    實驗概要本實驗介紹了抗體親和層析法純化的操作流程。實驗原理親和層析的高度選擇性使得從某一初始材料中純化,富集某一含量較低的目的蛋白成為可能,因此親和層析是蛋白質分離純化過程中最有效的方法之一。另外,如果配基與蛋白質的親和能力很強,也可同時進行樣品的濃縮。雖然多數情況下不需要將抗體與其他血清蛋白分開,

    抗體的親和層析法純化技術

    實驗概要本實驗介紹了抗體親和層析法純化的操作流程。實驗原理親和層析的高度選擇性使得從某一初始材料中純化,富集某一含量較低的目的蛋白成為可能,因此親和層析是蛋白質分離純化過程中最有效的方法之一。另外,如果配基與蛋白質的親和能力很強,也可同時進行樣品的濃縮。雖然多數情況下不需要將抗體與其他血清蛋白分開,

    親和素和生物素為什么親和力最高

    生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異性親和

    序列特異性DNA結合蛋白親和層析純化實驗_DNA親和層析法

    實驗材料制備性的DNA親和層析樹脂試劑、試劑盒緩沖液Z或其他柱緩沖液(如緩沖液Ze或TM)配制時含不同的KCl濃度(從緩沖液 Z 0.1 mol L KCl 至緩沖液 Z 1 mol L KCl對緩沖液Z 0. 1 mol L KCl透析的部分純化的蛋白質組分非特異性的競爭DNA柱再生緩沖液柱儲存緩

    胰島素親和層析實驗

    試劑、試劑盒部分純化的胰島素受體NaCl胰島素瓊脂糖溶液 F溶液 G溶液 H儀器、耗材一次性小型塑料柱CentriconTM 濃縮器銀染試劑盒實驗步驟材料與設備部分純化的胰島素受體,得自 WGA-瓊脂糖柱層析(見本單元實驗 3)NaCl(5mol/L)胰島素瓊脂糖(~2 ml 預裝膠)(SigmaC

    胰島素親和層析實驗

    胰島素親和層析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 部分純化的胰島素受體 NaCl 胰島素瓊脂糖

    生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA

    用磁性微球代轉纖維索作為介質,這種方法比較常用且已商品化。試劑、試劑盒GTC 抽提緩沖液稀釋緩沖液 β-巰基乙醇無 RNase 水20XSSC0.5XSSC1XPBS。儀器、耗材親和素-磁珠 (SA-PMP)生物素標記的 oligo(dT) 探針磁架75℃ 水浴50 ml 無菌 Corex 離心管1

    生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA

    試劑、試劑盒 GTC 抽提緩沖液 稀釋緩沖液 β-巰基乙醇 無 RNase 水 20XSSC 0.5XSSC 1XPBS。儀器、耗材 親和素-磁珠 (SA-PMP)生物素標記的 oligo(dT) 探針 磁架 75℃ 水浴50 ml 無菌 Corex 離心管 15 ml 螺旋蓋錐形離心管 Tissu

    生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA

    生物素化寡聚脫氧胸苷-鏈親和素磁珠純化帶 Poly(A)+RNA ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 GTC 抽提緩沖液 ? 稀釋

    核酸親和層析法純化蛋白質實驗

    步驟一 偶聯寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步驟二 核酸親和層析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4

    核酸親和層析法純化蛋白質實驗

    實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通過它們本身的堿基實現的。從理論上講,該方法也許干擾最佳結合序列的接近路徑,但是這樣一個簡單的方法一直被廣泛地成功應用。偶聯效率的定量檢測可經 A260 值測定評估,或者更精確地從偶聯介質上水解核酸和進行磷酸鹽測定。實

    親和層析法(aflinity-chromatography)純化蛋白質

    若表現蛋白質上含有一段六個His 的片段,而親和吸著劑膠體上接有鎳離子,此蛋白質會專一性地結合到吸著膠體;洗去雜質后可用imidazole 溶離純質蛋白質(Pharmacia 操作手冊, Affinity Chromatography)。一、儀器設備:1.親和層析管柱 (Bio-Rad 731-15

    親和層析法(affinity-chromatography)純化多克隆抗體

    【實驗原理】如圖所示,親和層析的高度選擇性使得從某一初始材料中純化,富集某一含量較低的目的蛋白成為可能,因此親和層析是蛋白質分離純化過程中最有效的方法之一。另外,如果配基與蛋白質的親和能力很強,也可同時進行樣品的濃縮。 雖然多數情況下不需要將抗體與其他血清蛋白分開,但如果一旦需要,蛋白A親和層析

    凝集素親和層析的應用

    免疫親和層析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫親和色譜,是利用生物體內存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法。 親和層析的應用主要是生物大分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用于純化各種生物大分子的情況。

    凝集素親和層析的原理

    簡單來說,親和層析利用流動相和固定相內不同生物分子之間相互作用強度的差異來分離物質。通常,在開始親和層析前需要預先進行全細胞提取物的粗制,例如細胞裂解液,生長培養基或血清。首先將固定相裝入帶有流動相的色譜柱中,其中含有某類特定的生物大分子(從DNA到蛋白質,取決于實驗需求)。等待一段時間使兩相充分混

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗

    檢測未知抗原 檢測未知抗體 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。

    生物素親和素系統要注意什么問題

    靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異

    親和素-生物素系統在ELISA中的應用

    親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗

    實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原

    谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗

    實驗材料 表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇谷胱甘肽洗脫緩沖液磷酸緩沖鈉鹽溶液TritonX-100DNase溶菌酶RNase凝血酶、腸激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材 SorvallSS-34 轉頭或相當的轉頭谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂皮下注射針頭實驗步驟

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