實驗材料 組織樣品
試劑、試劑盒 生物素熒光染料鏈親和素
儀器、耗材 離心機搖床
實驗步驟
1. 將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。
2. 待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。
3. 稀釋的第一杭體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每一載玻片上加40~50 μl 抗體，應能蓋住切片）。
4. 用與泵相連的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并從另一端加上抗體，蓋上加濕盒，室溫溫育1 h。
5. 以PBS冼玻片3次（5 min/次），從切片一端加入新的PBS緩沖液，由另一端吸去舊的緩沖液。
6. 稀釋的生物素酰化第二抗體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每一載玻片用40~50 μl抗體）。
7. 加第二抗體于切片上，置加濕盒中，室溫溫育1 h。
8. 以PBS洗玻片3次（毎次洗15 min）加熒光染料-鏈親和素于切片上（每一載玻片用40~50 μl 抗體）。置加濕盒中、室溫溫育1 h，以PBS洗玻片3次。
9. 將蓋玻片放于紙巾上，滴加1滴Gelvatol 于蓋玻片中央。翻過載玻片放于蓋玻片上（勿施壓），將玻片置工作臺上，用鋁箔覆蓋避光放置30 min，使Gelvatol 凝結。
10. 顯微鏡下觀察結果，或置玻片盒中貯于4℃。