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    鏈親和素生物素結合物免疫熒光標記實驗

    免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法,在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術(immunofluorescence technique)是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位,檢測出抗原或抗體。此實驗方案介紹了一種經三步反應的技術,它通過使用鏈親和素-第二抗體結合物,然后再與生物素-熒光染料結合物反應,提高了免疫組化反應的敏感度。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒生物素熒光染料鏈親和素儀器、耗材離心機搖床實驗步驟1. 將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒,由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片,放入玻片盒中(每邊放6片),或故濕盒中(載玻片勿相互接觸)。 2. 待載玻片達室濕且未干時,鋪加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 ......閱讀全文

    鏈親和素生物素結合物免疫熒光標記實驗

    免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法,在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術(immunofluorescence technique)是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光

    鏈親和素生物素結合物免疫熒光標記實驗

    實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 生物素熒光染料鏈親和素儀器、耗材 離心機搖床實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒,由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片,放入玻片盒中(每邊放6片),或故濕盒中(載玻片勿相互接觸)。?2. ?待載玻片達室濕且未干時,鋪加PBS于切片上(勿溢出玻片)。?3.

    生物素親和素標記缺點

    靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗

    檢測未知抗原 檢測未知抗體 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗

    實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗——檢測未知抗原

    實驗方法原理親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原(

    標記親和素生物素法(BAELISA)實驗——檢測未知抗體

    實驗方法原理包被抗原:用0.05 mol/L pH9.6碳酸鹽緩沖液將已知的抗原作適當稀釋,于聚苯乙烯酶標板的孔中加0.1 ml,于4 ℃放置18~24 h。用洗滌緩沖液洗3次,每次3 min。?加樣:加適當稀釋的待檢樣品(未知抗體)于反應孔中,同時作空白、陰性和陽性對照孔。37 ℃孵育1 h,洗滌

    生物素鏈霉親和素結合系統及衍生品的實際應用(二)

    ? ? ?? 注意:?? ? ? ?Ext. Coeff. = 在其最大吸收波長處的摩爾消光系數(單位= cm -1 M -1)。? ? ? ?FQY = 在水性緩沖液(pH 7.2)中的熒光量子產率。?? ? ? ?2.生物素化二抗? ? ? ?我們提供生物素化的二抗,可與基于鏈霉親和素的擴增技術

    生物素鏈霉親和素結合系統及衍生品的實際應用(一)

    ? ? ? ?生物素-鏈霉親和素結合系統的廣泛采用主要是由于兩個因素。第一個是生物素和鏈霉親和素分子本身相對較小,它可以與生物活性大分子(例如抗體)廣泛結合,而不會對其功能(即抗體的結合位點)產生抗性。第二個是生物素和鏈霉親和素彼此結合的特異性,以及后續鍵的強度,可實現強大的流線型生物測定應用。

    標記的鏈霉卵白素生物素法(LSAB)

    標記的鏈霉卵白素-生物素法(LSAB法)是標記的卵白素技術,20世紀80年代開始采用。基本試劑:①?第一抗體;②?生物素化第二抗體;③?辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素。實驗方法:1.?將固定后的標本用PBS漂洗;2.?于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用來密封內源性過

    親和層析--生物素/親和素純化

    低耐壓:生物素瓊脂糖微球生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品,生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的,最大限度避免配基脫落。?這種結合非常緊密,可以應用于不可逆結合(如:從某個樣本中去除親和素組分)高耐壓:鏈霉親和素 HC 瓊脂糖微球?ABT Streptavi

    生物素親和素系統介紹

    生物素-親和素系統(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應,使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。BAS目前已廣泛用于抗原、抗體的定性、定量檢測及定位觀察研究。生物素(biotin,B)

    親和素和生物素為什么親和力最高

    生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異性親和

    生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA

    試劑、試劑盒 GTC 抽提緩沖液 稀釋緩沖液 β-巰基乙醇 無 RNase 水 20XSSC 0.5XSSC 1XPBS。儀器、耗材 親和素-磁珠 (SA-PMP)生物素標記的 oligo(dT) 探針 磁架 75℃ 水浴50 ml 無菌 Corex 離心管 15 ml 螺旋蓋錐形離心管 Tissu

    生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA

    生物素化寡聚脫氧胸苷-鏈親和素磁珠純化帶 Poly(A)+RNA ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 GTC 抽提緩沖液 ? 稀釋

    生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA

    用磁性微球代轉纖維索作為介質,這種方法比較常用且已商品化。試劑、試劑盒GTC 抽提緩沖液稀釋緩沖液 β-巰基乙醇無 RNase 水20XSSC0.5XSSC1XPBS。儀器、耗材親和素-磁珠 (SA-PMP)生物素標記的 oligo(dT) 探針磁架75℃ 水浴50 ml 無菌 Corex 離心管1

    生物素姊妹篇鏈霉親和素及其衍生物的應用(一)

    ? ? ? ?上一期我們給大家介紹了目前在生化實驗中被廣泛使用的生物素-鏈霉親和素結合系統,以及其中的第一個成員——生物素及其衍生物以及他們的一些常規的應用,今天給大家帶來了該系統中另外一個重要的成員——鏈霉親和素及其衍生物,與生物素類似,鏈霉親和素分子本身也較小,同時也可以與生物活性大分子(例

    生物素姊妹篇鏈霉親和素及其衍生物的應用(二)

    ? ? ? ??HeLa細胞中α-微管蛋白的免疫熒光染色:將固定和透化的HeLa細胞中的α-tubulin與兔抗tubulin一抗一起孵育,然后與生物素化的山羊抗兔IgG(H&L)(Cat# 16794)進行孵育,然后加入iFluor?647-鏈霉親和素偶聯物(Cat# 16966),使用D

    病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體

    實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法:較為常用,具體步驟是:1) 抗體溶液的制備:用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素:根據待標記抗體的總量,按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白

    鏈親和素的性狀

    鏈親和素的性狀描述級別:Biotechnology grade活力:≥17 units/mg proteinDnase,Rnase&protease activity:None detectedElectrophoresis (One Band):Pass產品描述:Streptomyces av

    蛋白質糖基化檢測實驗_生物素親和素復合物觀察糖蛋白

    用生物素-親和素復合物觀察選擇性標記糖蛋白實驗材料蛋白樣品試劑、試劑盒醋酸鈉丙酮實驗步驟一、過碘酸鈉氧化糖蛋白樣品1. 在 0.1 mol/L 醋酸鈉 pH 4.5 緩沖液(50 mmol/L 磷酸鈉,pH 7.4 ) 中制備蛋白溶液,在冰上預冷。2. 用水制備新鮮的 0.5 mol/L 過碘酸鈉原

    免疫組織化學常用的檢測方法

    ??免疫組織化學(immunohistochemistry)技術的基本原理是抗原-抗體的反應。利用帶有標記物(如熒光素或辣根過氧化物酶等)的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起

    生物素親合素系統的生物素與親和層析介紹

      親和層析是將具有特殊結構的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中,當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時,與吸附劑具有親和能力的蛋白質就會被吸附而滯留在層析柱中。那些沒有親和力的蛋白質由于不被吸附,直接流出,從而與被分離的蛋白質分開,然后選用適當的洗脫液, 改變結合條件將被結合的蛋白質洗脫下來。  生

    免疫印跡與免疫檢測實驗——親和素生物素偶聯

    實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TTBS緩沖液TBS緩沖液過氧化物酶堿性磷酸酶儀器、耗材搖床硝酸纖維素膜尼龍膜實驗步驟1. ?在旋轉搖床或擺動平臺中持續搖動使膜與合適的封閉液平衡。對于硝酸纖維素膜或PVDF膜,需在室溫封閉30~60 min。尼龍膜則需在37℃封閉2 h。2. ?用TTBS溶液(用于硝酸纖

    抗體的生物素化標記

    本法可使抗體或其它蛋白質的ε-氨基通過手臂與酰化的生物素共價結合。其后,生物素化的分子可應用酶標-親和素或熒光染料-鏈霉親和素復合物來檢測。小分子的水溶性生物素對細菌蛋白鏈霉親和素具有高度親和力是本法的設計基礎。NHSB:N-羥基琥珀酰亞胺生物素(有商品供應)0.1 mol/L 碳酸氫鈉緩沖液,pH

    抗體的生物素化標記

    本法可使抗體或其它蛋白質的ε-氨基通過手臂與酰化的生物素共價結合。其后,生物素化的分子可應用酶標-親和素或熒光染料-鏈霉親和素復合物來檢測。小分子的水溶性生物素對細菌蛋白鏈霉親和素具有高度親和力是本法的設計基礎。 NHSB:N-羥基琥珀酰亞胺生物素(有商品供應) 0.1 mol/L 碳酸氫鈉緩沖液

    生物素鏈霉抗生物素蛋白系統的方法介紹

    中文名稱生物素-鏈霉抗生物素蛋白系統英文名稱biotin streptavidin system定  義利用生物素與鏈霉抗生物素蛋白有很高親和結合能力設計的檢測分析系統。與生物素-抗生物素蛋白系統相似,但鏈霉抗生物素蛋白表面所帶正電荷少,且不含糖基,在實驗中非特異性結合遠低于抗生物素蛋白。應用學科生

    生物素親和素系統要注意什么問題

    靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異

    親和素-生物素系統在ELISA中的應用

    親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子

    生物素標記蛋白操作方法

    下面的操作方法可以使約3~5分子的生物素與1分子的蛋白結合,對某些蛋白來說,生物素與蛋白的分子比可根據不同的生物素化要求進行調整。1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸鹽緩沖液中,并計算溶解的毫摩爾數。如果蛋白含有不恰當的緩沖液(如Tris或者甘氨酸),可以通過在PBS中透析或

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