病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法：較為常用，具體步驟是：1) 抗體溶液的制備：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素：根據待標記抗體的總量，按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白，將熒光素溶解于 0.5mol/L pH 9.5 碳酸鹽溶液中，體積為抗體溶液的 1/10;3) 標記：于4℃條件下，抗體溶液放置在磁力攪拌機上，將熒光素逐滴緩慢加入，同時保持反應液pH 值在8.5左右，如此連續攪拌反應 4～6h。應盡量避免產生泡沫，避免將熒光素粘在容器壁及攪拌棒上；4) 透析：標記后的抗體溶液 2500r/min 離心 20min, 取上清在 10～50 倍體積的 pH 8.0 PBS中透析2～4h;5) 標記抗體的純化： Sephadex G-50 凝膠過濾去除游離熒光素。本法標記均勻，重復性好，極少產生非特異性......閱讀全文
病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法：較為常用，具體步驟是：1) 抗體溶液的制備：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素：根據待標記抗體的總量，按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白
病毒免疫熒光實驗_?熒光抗體染色
實驗材料細胞小玻片標本試劑、試劑盒熒光抗體實驗步驟熒光抗體染色按不同反應機制，可有以下幾種：1.直接法 用已知特異性病毒抗體與熒光素結合，制成熒光特異性抗體，直接與細胞或組織中相應病毒抗原結合，在熒光顯微鏡下即可見病毒或病毒抗原存在部位呈現特異性熒光。此法特異簡便，但一種熒光抗體只能檢查一種抗原，特
病毒免疫熒光實驗_熒光抗體的制備
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光色素的選擇 可以產生明亮熒光的染料物質，稱熒光色素 (fluorochrome) 。目前常用的熒光色素有以下幾種：(1) 異硫氰酸熒光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在堿性條件下， FITC 的異硫氰酸基在水溶液
熒光素標記抗體技術
(一) 原理 目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在鹼性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合，標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力
病毒免疫熒光實驗
實驗方法原理?實驗材料?待檢測病毒試劑、試劑盒?丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材?玻片實驗步驟?1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類，選擇敏感細胞進行培養，如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞）培養，森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞）培養
鏈親和素生物素結合物免疫熒光標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 生物素熒光染料鏈親和素儀器、耗材 離心機搖床實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。?3.
鏈親和素生物素結合物免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光
熒光素標記抗體的操作步驟
? ? ? ? ? ?FITC熒光素標記抗體的操作步驟??????www.runwelltac.com當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴
熒光素FITC標記抗體的方法
當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基，一般zui多能結合15～20個，一個IgG分子可結合2～8個分子的FITC，其反應式如下FI
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗...1
制備熒光抗體是免疫熒光組織化學的重要技術之一，制備特異性強和高效價的熒光抗體必須選用高質量的熒光素和高效價的抗體。?一、熒光素?熒光是指一個分子或原子吸收了給予的能量后即刻引起發光，停止能量供給，發光也瞬時停止。可以產生明亮熒光的染料物質，稱熒光素。目前主要常用于標記抗體的熒光素如下：?1、異硫氰酸
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗...2
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗體的方法 2P3（2）Chadwick氏法?試劑和材料：抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸鹽緩沖鹽水、1%硫柳汞、離心機及離心管、三角燒瓶(25 ml)、冰槽、無菌吸管及毛細滴管、燒杯(500 ml
FITC熒光素標記抗體的操作步驟
當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基，一般zui多能結合15～20個，一個IgG分子可結合2～8個分子的FITC，其反應式如下：F
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 第一抗體IgG實驗步驟 1. ?當進行雙標記實驗時，最重要的準則是：第一抗體應為不同類型，從而使第二抗體能分別識別之。第一抗體最好是來源于不同免疫動物。但如使用單克隆抗體，這一要求就有可能達不到，當使用單抗時，不同型的抗體如IgG和IgM，可被第二抗體確切區分
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 PBS抗體儀器、耗材 玻片加濕盒實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。?3. ?稀釋的第
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗材料 懸浮細胞試劑、試劑盒 多聚-L-賴氨酸儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 1. ?細胞在冰浴中冷卻，然后用臺式離心機于4℃以800 g 離心5 min，吸去培養液并以4℃PBS重懸細胞。?2. ?離心吸去PBS，以1~2 ml 2%PFA固定液，或2%PFA固定液/0.1% Triton X
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒多聚
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PB
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
間接免疫熒光顯微鏡檢術可使兩種或更多種抗原可以在同一切片，同一時間內被顯示出來，可用于（1）細胞標記；（2）免疫熒光篩選干細胞。實驗方法原理通過使用激發波長及發射波長均不相間的熒光染料而進行的。通常限用兩種熒光染料，最常見的是羅丹明（綠光激發，發射紅光）和熒光素（藍光激發、發綠光）聯合使用。實驗材料
病毒免疫熒光實驗_病毒染色標本的制備
實驗材料待檢測病毒試劑、試劑盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材玻片實驗步驟1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類，選擇敏感細胞進行培養，如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞）培養，森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞）培養，登革熱病毒用白紋伊蚊
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和...2
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和生物素標記)（3）移入透析袋中，在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸鹽緩沖液中，4℃透析過夜，更換三次緩沖液，注意避光。?（4）吸取上述醛化好的HRP溶液3ml，加入5mg IgG的碳酸鹽緩沖液1ml，室溫輕攪2-3小時，避光；加入5m
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和...1
目前動物用單抗，在動物疫病診斷和檢疫、妊娠檢測、性別鑒定等方面有廣泛的應用，大多以診斷試劑（盒）的形式提供，其中核心試劑為標記的單抗。下面將介紹最常用的幾種標記技術。?一、酶標記?1、辣根過氧化物酶（HRP）標記?辣根過氧化物酶（HRP）標記單抗和多克隆抗體的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖
免疫球蛋白標記技術_熒光素標記抗體技術
實驗方法原理目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素（Fluorescein isothiocynate，FITC）或羅達明（Lissamine rhodamine B200，RB200）。在堿性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合，標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力。在熒
免疫熒光標記的應用
半個多世紀以來，經過許多學者不斷改進和發展，使此項技術成為微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用，使許多疑難腫瘤得到了明確診斷。
免疫熒光標記技術
．原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法：將標記
單層生長細胞的免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光
單層生長細胞的免疫熒光標記實驗
實驗材料 單層細胞試劑、試劑盒 PBS多聚甲醛甲醇抗體儀器、耗材 離心機水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?置生長成片的單層細胞于冰上冷卻，吸去培養液并以4℃PBS洗滌。吸去PBS。2. ?如欲研究細胞表面抗原，則以2%PFA于冰上面定30 min。如為細胞質抗原，則可用含0.1% Triton X-10
細胞表面抗原檢測實驗_免疫熒光抗體法
細胞表面有糖蛋白，這種蛋白質上有多糖，起到識別作用，當無法識別的糖蛋白進入血液就會引起身體的免疫反應引來嚴重后果，直接輸血才會引起，如果喝就不會，因為胃都將其降解成氨基酸了，進入身體合成自身蛋白質就不會有事故。實驗方法原理用人結腸癌細胞為免疫原，免疫小鼠，制得鼠抗人結腸癌細胞表面抗原（Ag）的單克隆
免疫熒光共標記怎么計算共標記的細胞個數
共定位的定義：共定位是對樣品內兩種熒光標記的信號共同分布的位置進行分析。 共定位就如字面意思上所說的，只能夠表明蛋白A和B都在此細胞有表達，并且在同樣的細胞內位置/細胞器。相關短語：共定位通道 PDM Channel 細胞共定位 Cellular co localization 細胞內共定位信息 c
光鏡下雙/多重免疫標記實驗——免疫熒光雙重標記TRITCFITC
雙重或多重標記是利用免疫學和細胞化學原理，在同一張切片上同時采用或先后采用不同顏色的熒光色素或酶促產物，或采用不同直徑大小顆粒膠體金來原位標記兩種或兩種以上抗原-抗體復合物，達到在同一細胞或亞細胞水平顯示不同抗原成分（定性、定位、定撤），分析不同抗原成分相互間功能的增消關系，操作遵循的原則與要求同單
免疫熒光抗體試驗是什么
用熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術，或稱為免疫熒光技術。