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    多重PCR的定義和特點

    1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合 ,它是在同一 反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的 反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般 相同。2.特點:①高效性,在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是用一滴血就可檢測多種病原體。②系統性,多重很適宜于成組病原體的檢測,如肝炎病毒,腸道致病性細菌,性病,無芽胞厭氧菌,戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢。③經濟簡便性,多種病原體在同一反應管內同時檢出,將大大的節省時間,節省試劑,節約經費開支,為臨床提供更多更準確的診斷信息。......閱讀全文

    多重PCR的定義和特點

    1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合 ,它是在同一 反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的 反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般 相同。2.特點:①高效性,在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是

    多重PCR技術的定義特點及用途介紹

    1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同。? ? ? ?2.特點:? ? ①高效性,在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或

    多重pcr和多重熒光定量pcr的區別

    正常啊,定量PCR很靈敏的,體系稍微變化就會誤差很大,更何況你這樣反應體系都不一樣。所以一般定量結果只是作為佐證,最好別太相信。你想做好,就盡量保證每個體系是一致的,最后結果趨勢是一致的就行了。

    反向PCR(Inverse-PCR)技術的定義和特點

    1.概述:反向PCR(reverse PCR)是用反向的互補引物來擴增兩引物以外的未知序列的片段,而常規PCR擴增的是已知序列的兩引物之間DNA片段.實驗時選擇已知序列內部沒有切點的限制性內切酶對該段DNA進行酶切,然后用連接酶使帶有粘性末端的靶序列環化連接,再用一對反向的引物進行PCR,其擴增產物

    巢氏PCR(Nested-PCR)技術的定義和特點

    1.定義:也稱套式PCR是指利用兩套PCR引物(巢式引物)進行兩輪PCR擴增反應。在第一輪擴增中,外引物用以產生擴增產物,此產物在在內引物的存在下進行第二輪擴增。在這種技術中,首先用一對外引物進行第1輪PCR,然后再使用第1對引物擴增的DNA 序列內部的一對引物再次擴增。2.優點:由于巢式PCR反應

    標記PCR和彩色PCR技術的定義及特點介紹

    標記PCR(Labelled Primers,LP-PCR) 是利同位素或熒光素對PCR引物的5‘端進行標記,用來檢測靶基因是否存在。彩色PCR(Color Complementation assay PCR,CCAPCR),是LP-PCR的一種,它用不同顏色的熒光染料;標記引物的5'端,因

    多重PCR(Multiplex-PCR)

    一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多

    多重PCR(Multiplex-PCR)

    一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多

    PCR的定義和歷史

    聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液,只要能分離出一丁點的DNA,就能用PCR加以放大,

    多重PCR反應的方法

    一)選擇目標基因由于多重PCR在同一個反應體系中需要加入多對引物,而模板直接影響擴增的結果分析,這就導致了擴增模板的選擇至關重要。同時,擴增區域的選擇必須符合分析的目的,如通常對于致病微生物,需要選擇其保守序列,如16sRNA,或者毒力基因、毒力相關基因,以防止檢測到非致病突變體而無法解釋結果;對于

    多重耐藥菌的定義

    問題一:什么叫多重耐藥菌,怎樣定義? 多重耐藥菌是指有多重耐藥性的病原菌。可以翻譯成多藥耐藥性、多重耐藥性、其定義為一種微生物對三類(比如氨基糖苷類、紅霉素、B-內酰胺類)或三類以上抗生素同時耐藥,而不是同一類三種。P-resisitence成為泛耐菌株,對幾乎所有類抗菌素耐藥。比如泛耐不動桿菌,對

    多重耐藥菌的定義

    問題一:什么叫多重耐藥菌,怎樣定義? 多重耐藥菌是指有多重耐藥性的病原菌。可以翻譯成多藥耐藥性、多重耐藥性、其定義為一種微生物對三類(比如氨基糖苷類、紅霉素、B-內酰胺類)或三類以上抗生素同時耐藥,而不是同一類三種。P-resisitence成為泛耐菌株,對幾乎所有類抗菌素耐藥。比如泛耐不動桿菌,對

    多重-PCR-擴增實驗

    多重PCR擴增實驗可以用于:(1)在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是用一滴血就可檢測多種病原體;(2)多重PCR很適宜于成組病原體的檢測,如肝炎病毒,腸道致病性細菌,性病,無芽胞厭氧菌,戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢;(3)多種病原體在同一反應管內

    核酸擴增—多重PCR

      多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術,是在同一PCR體系中加入多對特異性引物,一次擴增多個DNA片斷,實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本,減少了工作量,提高了檢測效率,并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯,檢出率低等問題。淋病患者往往

    多重PCR技術原理

    多重PCR技術具備單個反應體系檢測多種靶標的能力,但是如果需要鑒別反應體系中的不同靶標基因,則需要針對不同的靶標,設計特異性的探針并標記熒光基團,不同的靶標標記不同的熒光基團。為了避免熒光基團之間的相互干擾,應合理選擇不同光譜范圍的熒光基團。熒光基團應與使用的熒光定量PCR儀器具有適配性,每個熒光通

    多重-PCR-擴增實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 多重PCR(multiplex PCR),其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同。一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定。重PCR的特點有:①高效性在同一PCR反應管內同時

    多重-PCR-擴增實驗

    試劑、試劑盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 酶和酶緩沖液Taq 聚合酶許多 Taq 聚合酶都可以用;作者發現 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以滿足大多數需要. 如果需要提高PCR 產物的特異性,應該使用熱啟動聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附帶的

    多重PCR核酸檢測

    2020年3月11日,世衛組織總干事譚德賽在日內瓦召開的新聞發布會上宣布,新冠肺炎(COVID-19)疫情已經構成全球性大流行(pandemic)。截止到目前,中國的疫情在國內聯防聯控機制下已基本得到控制,而國外的情況卻不容樂觀。新冠肺炎疫情爆發于呼吸道疾病高發的季節,有各類呼吸道病原體單一感染或合

    免疫PCR(immunoPCR)技術的定義及特點介紹

    1.定義:免疫-PCR(immuno-PCR) 它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原,尤其適用于極微量抗原的檢測。是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統。主要步驟有三個:①抗原-抗體反應,②與嵌合連接分子結合,③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA)。?

    攻克多重PCR之難(下篇)

      多重PCR能夠在提高通量的同時節省樣品降低成本,它需要耗費更多的時間和精力,同時也會給用戶回報更豐富的數據。本文介紹了一些實驗技巧和商業化工具,希望能幫您輕松獲得好結果。   原則三、四、五:優化dNTP、MgCl2、聚合酶和鹽的濃度   現在剩下的就是調整反應條件了。要一次進行這么多種反應

    多重PCR法檢測STEC

    產志賀毒素大腸桿菌(STEC)具有很強的致病性,全球范圍內由其引發的食物中毒和其他公共衛生事件呈逐年升高之勢,嚴重威脅人類的健康。開發快速可靠的檢測手段對其引發的食源性疾病的監測、控制和預防意義重大。本文結合對STEC分子生物學特征的研究,著重介紹了多重PCR檢測技術在檢測食品中STEC方面的

    攻克多重PCR之難(上篇)

      多重PCR能夠在提高通量的同時節省樣品降低成本,它需要耗費更多的時間和精力,同時也會給用戶回報更豐富的數據。本文介紹了一些實驗技巧和商業化工具,希望能幫您輕松獲得好結果。   PCR 的重要性毋庸贅述,這一諾貝爾獲獎技術的普及帶動了現代基因組學、鑒定技術、醫療診斷等領域的發展。如今,PCR

    巢式PCR(Nested-PCR)定義、原理和步驟

    巢式PCR的定義巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(PCR),使用兩對(而非一對)PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通 PCR相似。第二對引物稱為巢式引物(因為他們在第一次PCR擴增片段的內部)結合在第一次PCR產物內部,使得第二次PCR擴增片斷短于第一次擴增。巢 式PCR的好處

    多重PCR反應中關鍵因素和實驗步驟

    多重?PCR反應的基本原理DNA?引物(步驟?1?和?2?)?.?引物的選擇遵從簡單的規則:引物長度為 18-24bp 或更長, GC 含量為 35%-60% ,退火溫度 55 ℃ -58 ℃或更高。長些的引物(如 DMD 基因的引物, 28-30bp )使反應在更高的退火溫度下進行并產生較少的非特

    蒸騰的定義和特點

    蒸騰,是指植物體表(主要指葉子)的水分通過水蒸氣的形式散發到空氣中的過程。蒸騰與物理學上所說的蒸發有著一定的差別,蒸騰作用不僅會受到外界環境的影響,還會受到植物的調節和控制,所以蒸騰作用要比蒸發作用復雜得多,蒸騰作用的發生與植物的大小無關,即使是幼苗依然能夠進行蒸騰。

    供體的定義和特點

    (一)指在化學反應過程中,能提供某一化學基團的物質(化合物)。例如:L-氨基酸與α-酮酸之間的氨基轉移反應,L-氨基酸是氨基的供體。(二)提供基因DNA片段、器官、組織或其他細胞輸送給另一個個體的生物。(三)在半導體中,若雜質或缺陷能級上有電子占據時,雜質原子或缺陷是電中性的,這種雜質或缺陷叫做施主

    多重同晶置換的原理和方法特點

    中文名稱多重同晶置換英文名稱multiple isomorphous replacement;MIR定  義在蛋白質的X射線衍射研究中,為解決衍射相問題,將多個具有同晶性質而不改變蛋白質構象的重原子引入蛋白質,比較引入重原子前后的衍射圖,即能從多個相角所測的數據解釋衍射圖。應用學科生物化學與分子生物

    多重PCR的主要用途

    ⑴多種病原微生物的同時檢測或鑒定①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者體內,有時存在多種肝炎病毒重疊感染。②腸道致病性細菌的檢測,如傷寒,痢疾和霍亂,同存一病人并同時發病。③性病的檢測,如梅毒,淋病及艾滋病的診斷。④戰傷細菌及生物戰劑細菌的檢測,如破傷風桿菌,產氣莢膜桿菌,炭疽桿菌,鼠疫桿菌等偵檢

    重組PCR技術的定義和原理介紹

    1.定義:使兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年報道了由PCR擴增的兩個DNA片段通過重組合后再經延伸而制備出新的DNA分子。2. 其基本原理:將突變堿基,插入或缺失片段,或一種物質的幾個基因片段均設計在引物中,先分段對

    原位PCR技術的定義和方法介紹

    1.概述:原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的,實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等.2.其基本方法為? ?

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