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    免疫PCR(immunoPCR)技術的定義及特點介紹

    1.定義:免疫-PCR(immuno-PCR) 它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原,尤其適用于極微量抗原的檢測。是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統。主要步驟有三個:①抗原-抗體反應,②與嵌合連接分子結合,③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA)。 2.嵌合連接分子的制備原理:其基本原理與ELISA和免疫酶染色相似,在免疫-PCR中,嵌合連接分子起著橋梁作用,它有兩個結合位點,一個與抗原抗體復合物中的抗體結合,一個與質粒DNA結合,在操作反應中形成抗原抗體-連接分子-DNA復合物,通過PCR擴增DNA 來判斷是否存在特異性抗原.是免疫-PCR。與ELISA不同之處在于其中的標記物不是酶而是質粒DNA。 3. 優點為:①特異性較強,因為它建立在抗原抗體特異性反應的基礎上。②敏感度高,PCR具有驚人的擴增......閱讀全文

    免疫PCR(immunoPCR)技術的定義及特點介紹

    1.定義:免疫-PCR(immuno-PCR) 它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原,尤其適用于極微量抗原的檢測。是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統。主要步驟有三個:①抗原-抗體反應,②與嵌合連接分子結合,③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA)。?

    免疫PCR技術(ImmunoPCR)

    免疫PCR技術(Immuno-PCR)?免疫PCR方法(Immuno-PCR)是Takeshi等1992年將免疫學反應和PCR技術相結合而創建的一種新的檢測技術,具有抗原、抗體反應的特異性和PCR技術的高效性。它運用PCR的高度敏感性來放大抗原抗體反應的特異性,使實驗中只需數百個抗原分子即可檢測,甚

    什么是免疫PCR(immunoPCR)?

    1.定義:免疫-PCR(immuno-PCR)它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原,尤其適用于極微量抗原的檢測。是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統。主要步驟有三個:①抗原-抗體反應,②與嵌合連接分子結合,③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA)。?2

    什么是免疫PCR(immunoPCR)?

    1.定義:免疫-PCR(immuno-PCR)它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原,尤其適用于極微量抗原的檢測。是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統。主要步驟有三個:①抗原-抗體反應,②與嵌合連接分子結合,③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA)。?2

    免疫PCR(ImmunoPCR)概念和基礎

    (一) 免疫PCR技術的概念免疫PCR是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。免疫PCR集PCR的高靈敏度與抗體和抗原反應的特異性于一體。其突出的特點是指數級的擴增效率帶來了極高的敏感度,能檢出濃度低至2ng

    標記PCR和彩色PCR技術的定義及特點介紹

    標記PCR(Labelled Primers,LP-PCR) 是利同位素或熒光素對PCR引物的5‘端進行標記,用來檢測靶基因是否存在。彩色PCR(Color Complementation assay PCR,CCAPCR),是LP-PCR的一種,它用不同顏色的熒光染料;標記引物的5'端,因

    多重PCR技術的定義特點及用途介紹

    1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同。? ? ? ?2.特點:? ? ①高效性,在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或

    免疫PCR(ImmunoPCR)概念、組成和免疫PCR產物的檢測

    (一) 免疫PCR技術的概念免疫PCR是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。免疫PCR集PCR的高靈敏度與抗體和抗原反應的特異性于一體。其突出的特點是指數級的擴增效率帶來了極高的敏感度,能檢出濃度低至2ng

    甲基化特異PCR技術的定義及特點介紹

    甲基化特異PCR是用對苯二酚和亞硫酸氫鈉處理氫氧化鈉變性的基因組DNA,使得未甲基化的C轉化為T。按照C轉換T后的基因序列設計出來的引物擴出目的基因。由于甲基化CpG島中的C不能被轉化為T,用以上的引物將不會擴出目的基因。通過上述手段就能達到識別基因組DNA甲基化與否的目的。

    反向PCR(Inverse-PCR)技術的定義和特點

    1.概述:反向PCR(reverse PCR)是用反向的互補引物來擴增兩引物以外的未知序列的片段,而常規PCR擴增的是已知序列的兩引物之間DNA片段.實驗時選擇已知序列內部沒有切點的限制性內切酶對該段DNA進行酶切,然后用連接酶使帶有粘性末端的靶序列環化連接,再用一對反向的引物進行PCR,其擴增產物

    巢氏PCR(Nested-PCR)技術的定義和特點

    1.定義:也稱套式PCR是指利用兩套PCR引物(巢式引物)進行兩輪PCR擴增反應。在第一輪擴增中,外引物用以產生擴增產物,此產物在在內引物的存在下進行第二輪擴增。在這種技術中,首先用一對外引物進行第1輪PCR,然后再使用第1對引物擴增的DNA 序列內部的一對引物再次擴增。2.優點:由于巢式PCR反應

    PCR技術的特點介紹

    1、有一定程度單核苷酸錯誤摻入? ? TaqDNA聚合酶缺少3’-5’核酸外切酶活性,因而不能糾正反應中發生的核苷酸錯誤摻人;與大腸桿菌聚合酶IKlenow片段相比較,用TaqDNA聚合酶的反應錯誤摻人相對多些。但在PCR擴增過程中,其錯配率一般只有約1/萬,足可以供特異性分析。2、操作簡便、快速?

    原位PCR技術的定義和方法介紹

    1.概述:原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的,實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等.2.其基本方法為? ?

    重組PCR技術的定義和原理介紹

    1.定義:使兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年報道了由PCR擴增的兩個DNA片段通過重組合后再經延伸而制備出新的DNA分子。2. 其基本原理:將突變堿基,插入或缺失片段,或一種物質的幾個基因片段均設計在引物中,先分段對

    PCR技術的反應特點介紹

      特異性強  PCR反應的特異性決定因素為:  ①引物與模板DNA特異正確的結合;  ②堿基配對原則;  ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;  ④靶基因的特異性與保守性。  其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及TaqDN

    多重PCR的定義和特點

    1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合 ,它是在同一 反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的 反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般 相同。2.特點:①高效性,在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是

    免疫PCR技術

    (一)材料與方法1.?生物素標記特異性抗體的制備? 免疫球蛋白(如IgG、IgM)的Fc片段上有糖基存在,因而可用能與糖基結合的Biotin-hydrazide作生物素標記。(1) 將純化的抗體(IgM或IgG, 0.1~1.0ml)在標記緩沖液(0.1Mol/L NaAc,pH值5.5, 0.1M

    免疫PCR技術

    (一)材料與方法1. 生物素標記特異性抗體的制備免疫球蛋白(如IgG、IgM)的Fc片段上有糖基存在,因而可用能與糖基結合的Biotin-hydrazide作生物素標記。(1) 將純化的抗體(IgM或IgG, 0.1~1.0ml)在標記緩沖液(0.1Mol/L NaAc,pH值5.5, 0.1Mol

    兼并引物PCR技術的定義

    1.概述:兼并引物是指代表編碼單個氨基酸所有不同堿基可能性的不同序列的混合物。兼并度越低,產物特異性越強。2.設計引物原則:盡量選擇兼并性小的氨基酸,并避免引物3’末端兼并,因為3'端最后3個堿基的退火足以在錯誤位點起始PCR;次黃嘌呤可以同所有的堿基配對,降低引物的退火溫度。

    RTPCR技術的定義

    RT-PCR,反轉錄·聚合酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是將RNA的反轉錄(reverse transcription )和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。

    不對稱PCR技術的定義和方法介紹

    不對稱PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一對引物,PCR擴增后產生大量的單鏈DNA(SSDNA)。這對引物分別稱為非限制引物與限制性引物,其比例一般為50——100:1。在PCR反應的最初10——15個循環中,其 擴增產物主要是雙鏈DNA,但當限制性引物(低濃度引物)消耗完后,非限制

    X射線定義及特點介紹

      X射線是一種具有較短波長的高能電子波,由于內層軌道電子躍遷或高能電子減速產生,X射線的波長范圍為0.01-10nm。介于紫外線和γ射線之間,并具有部分重疊峰。  X射線與可見光相比,除了具有波粒二象性的共同性質之外,還因其波長短、能量大而顯示其特性:  1、穿透能力強;  2、折射率幾乎等于1;

    免疫PCR技術進展

      摘要免疫-PCR技術結合了抗原抗體反應的特異性和PCR的高敏感性,是一種極為敏感的抗原檢測技術,并適合于各種微量抗原的檢測。  熒光標記、酶標記和放射性同位素標記這三大抗體標記技術是目前免疫化學、免疫學以及分子生物學中應用最廣的常規抗原檢測手段,具有很高的靈敏度。但在早期癌抗原及某些神經肽等極微

    PCR反應技術的特點

    1、特異性強決定 PCR 反應特異性的因素有:①引物與模板 DNA 特異分子的正確結合;②堿基配對原則;③ Taq DNA 聚合酶合成反應的忠實性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結合是關鍵,它取決于所設計引物的特異性及退火溫度。在引物確定的條件下,PCR 退火溫度越高,擴增的特異性越

    免疫放射測定的技術定義

    中文名稱免疫放射測定英文名稱immunoradiometric assay;IRMA定  義一種放射免疫分析技術。即將待測抗原與過量的標記抗體直接反應,然后加入固相的抗原免疫吸附劑與游離的標記抗體結合,經過離心去除沉淀物,測定上清液的反射性強度,從而推算出檢品中待測抗原的含量。應用學科免疫學(一級學

    免疫PCR法檢測有哪些特點

    免疫PCR法檢測有哪些特點?:免疫PCR綜合了固相免疫反應和PCR兩者的特點。因而在保證免疫測定特異性的同時,又具有極高的檢測靈敏度。免疫PCR的基本原理與執業護士網常規標記免疫技術相似,只不過在免疫PCR中所用的抗原或抗體標記物為DNA,在固相免疫結合反應完成后,再采用PCR技術對標記DNA進行擴

    自身免疫性肝病實驗室診斷的定義及特點

      定義  自身免疫性肝病是一組由于機體自身抗體存在而引起肝組織持續損傷為特征的慢性肝病。臨床以高γ球蛋白敗血癥,波動性黃疸,特征性循環自身抗體及內分泌失常為特點。  特點  自身免疫性肝病作為一種發病機理不明的疾病與許多疾病有關聯(表1),且由于最初的臨床癥狀與病毒性肝炎癥狀相似,臨床上診斷比較困

    RTPCR技術的定義和檢測方法

    ? ?1.定義:是以RNA為模板,聯合逆轉錄反應(reverse transcription,RT)與PCR,可用于檢測單個細胞或少數細胞中少于10個拷貝的RNA 模板。 RNA擴增包括兩個步驟:在單引物的介導下和逆轉錄酶的催化下,合成RNA的互補cDNA;加熱后cDNA與RNA鏈解離,然后與另一引

    磷脂的定義及結構特點

    磷脂(Phospholipid),也稱磷脂類、磷脂質,是指含有磷酸的脂類,屬于復合脂。磷脂是組成生物膜的主要成分,分為甘油磷脂與鞘磷脂兩大類,分別由甘油和鞘氨醇構成。磷脂為兩性分子,一端為親水的含氮或磷的頭,另一端為疏水(親油)的長烴基鏈。由于此原因,磷脂分子親水端相互靠近,疏水端相互靠近,常與蛋白

    藥物片劑的定義及特點

    片劑,系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑。片劑作為最常用的口服劑型,其種類較多,發展較快,各國藥典收載的制劑中以片劑為最多。具有劑量準確,應用方便;生產機械化,能適應治療、醫療預防用藥的多種要求;質量穩定,攜帶、運輸和貯存方便;片面可以壓上主藥名稱和藥量的標記,也可用不同顏

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