蛋白質免疫印跡制備分離膠、積層膠
1）所需器材：制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸鈉）、10%AP（過硫酸銨）、TEMED（四甲基乙二胺）、移液槍、吸頭。 2）操作步驟 a.制冰機制冰； b.將制膠槽雙層玻片裝進制膠槽小夾子（雙層玻片左右方及下方要注意對齊），濾紙吸干雙層玻片中殘留液體，再將小夾子裝進制膠槽大夾子，平放（制膠槽所放平面一定要水平）； c.將大冰盒裝上冰，戴好手套，取出保存于4℃冰箱的30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-Hcl(PH值8.8)、1.0mol/L的Tris-cl(PH值6.8)、TEMED、保存于-20℃冰箱的10%AP，備好存放于常溫的去離子水、10%SDS，根據所需配制的分離膠濃度及量，依次往小燒杯中加不同體積的去離子水、30%......閱讀全文
蛋白質免疫印跡制備分離膠、積層膠
1）所需器材：制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸鈉）、10%AP（過硫酸銨）、TEMED（四甲基乙二胺）、移液槍、吸
蛋白質免疫印跡實驗制備分離膠、積層膠
制備分離膠、積層膠 1）所需器材：制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸鈉）、10%AP（過硫酸銨）、TEMED（四甲
什么是成層膠
中文名稱成層膠英文名稱spacer gel定 義凝膠電泳時，在分離膠上方鋪設的一薄層大孔凝膠。能使樣品在電泳初始階段快速濃集在分離膠界面，樣品在分離膠就能達到更好的分離效果。樣品通過成層膠濃集是采用等速電泳的原理。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
PAGE膠制備方法
實驗概要SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣品介質和凝膠中
PAGE膠制備方法
實驗試劑1. 5x樣品緩沖液（10ml）:0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50％甘油，2ml 10％的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml 1％溴酚藍，0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周，或在－20℃保存數月。2. 凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g，甲叉雙丙烯
瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法
一、瓊脂糖凝膠的特點????天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫
瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與
蛋白質SDSPAGE電泳分離膠和濃縮膠的濃度如何確定
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12膠紅線左右可以用12或10跑幾百的很大的用6的膠小蛋白12的10的一般都能跑如果不考慮效率的話...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2，看樣品濃度多少，以及你想用幾次通常我們是定到4微每微，總量100微，用10次如果濃度小的話定到2用5次
分離膠的應用特點
分離膠指不連續緩沖體系聚丙烯酰胺凝膠電泳中的一部分，其組成、緩沖液pH和凝膠孔徑與濃縮膠均不 同，具有分子篩效應的小孔徑凝膠。
如何選擇分離膠濃度
western blot中分離膠濃度的選擇取決于目的蛋白分子量不同的分離膠濃度對不同的目的蛋白分子量的分辨率不一樣，比如15%的分離膠更適合45kDa的分目的蛋白，而10%的分離膠更適合70kDa的目的蛋白而因為western blot的膜應該是完全覆蓋SDS PAGE的凝膠，所以不用太擔心條帶在凝
如何選擇分離膠濃度
western blot中分離膠濃度的選擇取決于目的蛋白分子量不同的分離膠濃度對不同的目的蛋白分子量的分辨率不一樣，比如15%的分離膠更適合45kDa的分目的蛋白，而10%的分離膠更適合70kDa的目的蛋白而因為western blot的膜應該是完全覆蓋SDS PAGE的凝膠，所以不用太擔心條帶在凝
SDSPAGE膠制備
一. 實驗原理： SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。 SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣
PAGE膠制備方法實驗
實驗試劑1. 5x樣品緩沖液（10ml）:0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50％甘油，2ml 10％的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml 1％溴酚藍，0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周，或在－20℃保存數月。2. 凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g，甲叉雙丙烯
分離膠的分離原理和特點
蛋白質 或核酸在電泳過程中由濃縮膠進入分離膠， 由于分子篩作用，小分子的物質容易通過， 阻力小，遷移速度快；大分子的則受到較大 的阻力而被滯后。因此即使凈電荷相似、泳 動率相等的物質分子也會由于分子篩效應， 根據其各自分子量的大小而在分離膠中被分 開。常用于檢測蛋白質純度、測定蛋白質分 子量以及DN
成層膠的定義和用途
中文名稱成層膠英文名稱spacer gel定 義凝膠電泳時，在分離膠上方鋪設的一薄層大孔凝膠。能使樣品在電泳初始階段快速濃集在分離膠界面，樣品在分離膠就能達到更好的分離效果。樣品通過成層膠濃集是采用等速電泳的原理。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
跑膠蛋白質彌散
estern Blot（WB）可以說是生物學方向的同學最...最基本的實驗技能了，然而好看的 WB 總是別人的，自己的 WB 總是雜帶叢生，尤其是新課題、新抗體，總在目的條帶附近出現非特異性條帶。產生這種狀況的原因是什么呢、用下面的幾個例子，咱們一起研究一下。 案例一：啥也
跑膠蛋白質彌散
estern Blot（WB）可以說是生物學方向的同學最...最基本的實驗技能了，然而好看的 WB 總是別人的，自己的 WB 總是雜帶叢生，尤其是新課題、新抗體，總在目的條帶附近出現非特異性條帶。產生這種狀況的原因是什么呢、用下面的幾個例子，咱們一起研究一下。 案例一：啥也沒有 原因：比較多
跑膠蛋白質彌散
estern Blot（WB）可以說是生物學方向的同學最...最基本的實驗技能了，然而好看的 WB 總是別人的，自己的 WB 總是雜帶叢生，尤其是新課題、新抗體，總在目的條帶附近出現非特異性條帶。產生這種狀況的原因是什么呢、用下面的幾個例子，咱們一起研究一下。 案例一：啥也沒有 原因：比較多
電泳分離技術－濃縮膠與分離膠斷裂、板間有氣泡的影響
一般對電泳不會有太大的影響。濃縮膠與分離膠斷裂，主要原因是拔梳子用力不均勻或過猛所致;板間有氣泡，是由于在解除制膠的夾子后,板未壓緊而致空氣進入引起的。?
免疫印跡與免疫檢測實驗——半干轉移系統轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材半干燥轉移裝置濾紙實驗步驟1. ?制備樣品，并在小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠上分離蛋白質。?2. ?準備轉印膜3. ?拆卸凝膠夾層，除去積層膠。4. ?組裝轉印夾層：Mylar聚酯薄膜屏蔽物3張以轉移緩沖液飽和的濾紙已平衡的轉印膜凝膠3張以轉移緩沖液飽
免疫電泳實驗_倒膠
試劑、試劑盒Tris-巴比妥緩沖液貯液電極緩沖液瓊脂糖溶液實驗步驟為使瓊脂糖溶液均勻鋪層和得到重復的結果，玻璃板必須水平放置。為便于在免疫電泳中從第一向到第二向的轉移，最好使用瓊脂糖凝膠支持膜。12 ml 瓊脂糖溶液在 84 cm X 94 cm 上的凝膠厚度為 1.5 mm。倒膠后約 3 分鐘凝固
簡介冷膠噴膠機的供膠裝置
組成部份說明：膠桶、泵 膠桶的容量為30L，桶蓋用于安裝活塞泵活塞泵 4:1活塞泵用于泵起和供應膠水，配有不銹鋼膠管和過濾器過濾器 不銹鋼過濾器具有過濾膠水和消除泵的震動雙重功能調壓器 4:1不銹鋼調壓器能自動控制膠量 I/P自動壓力追蹤閥 根據糊盒機的速度自動調節膠水的壓力與流量技術參數泵的
自動滴膠勻膠機
自動滴膠勻膠機/真空旋轉涂層機 ?型號：MHY-29071MHY-29071產品簡介：主要用于液體，膠體在材料表面薄膜的形成，適用于硅片，晶片，玻璃，陶瓷等制版表面涂覆工藝。可在科研，教育，生產中應用。?MHY-29071主要特點：1可設定存儲26個不同樣片的旋轉涂敷工藝過程。2每個涂敷工藝過程可以
蛋白膠如何干膠保存
最好有個干膠儀的，直接按照儀器要求做就可以了。如果你要讓膠自然干，需要很長時間，而且膠容易變形破裂。
濃縮膠與分離膠斷裂、板間有氣泡對電泳有影響嗎？
這主要出現在初學者中，一般對電泳不會有太大的影響。前者主要原因是拔梳子用力不均勻或過猛所致；后者是由于在解除制膠的夾子后，板未壓緊而致空氣進入引起的。
western－blot－2％－的分離膠怎么配
哪里有2%這么低的分離膠哦？濃縮膠4%都是很低的啦，我見過人家跑400kd的蛋白，用的都是8%的分離膠。
western－blotting－分離膠濃度是如何計算
WESTERN技術中，分離膠的濃度是按聚丙烯酰胺的濃度來計算的。一般先配置30%的丙叉-亞甲叉母液，以配置10%濃度的分離膠10毫升為例，則需要30%的母液為（10%/30%）*10毫升。反過來，只要你知道用多少毫升30%的母液時，就能推算出膠的濃度了。
蛋白質膠凝作用的原理
蛋白質的膠凝作用是溶膠或溶液在適當條件下轉變為凝膠(凍膠)的過程。 可看作溶膠聚沉過程中的一個階段。膠凝時膠體失去聚結穩定性，但仍有動力學穩定性，是特殊的半固體狀態，膠體質點相互聯結，形成網狀結構，結構空隙中填滿液體，不生成沉淀。膠體質點形狀不對稱和親水性強時，在強電解質作用下可以發生膠凝。憎
SDSGAGE分離膠的凝固時間和濃縮膠的凝固時間
這要取決于你加入催化劑的用量，可以稍多加一些TEMED，這樣凝固的時間就會短了。
蛋白分子量大約為780左右，壓縮膠與分離膠濃度多少合適
壓縮膠一般都為5%；分離膠（單位kD）150以上：6%；100~150：8%；50~100：10%；20~50：12%；20以下：16%。一般為這個范圍，也可有些許的差異。