蛋白質免疫印跡實驗制備分離膠、積層膠
制備分離膠、積層膠 1）所需器材：制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸鈉）、10%AP（過硫酸銨）、TEMED（四甲基乙二胺）、移液槍、吸頭。 2）操作步驟 a.制冰機制冰； b.將制膠槽雙層玻片裝進制膠槽小夾子（雙層玻片左右方及下方要注意對齊），濾紙吸干雙層玻片中殘留液體，再將小夾子裝進制膠槽大夾子，平放（制膠槽所放平面一定要水平）； c.將大冰盒裝上冰，戴好手套，取出保存于4℃冰箱的30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-Hcl(PH值8.8)、1.0mol/L的Tris-cl(PH值6.8)、TEMED、保存于-20℃冰箱的10%AP，備好存放于常溫的去離子水、10%SDS，根據所需配制的分離膠濃度及量，依次往小燒杯中加不同......閱讀全文
蛋白質免疫印跡實驗制備分離膠、積層膠
制備分離膠、積層膠 1）所需器材：制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸鈉）、10%AP（過硫酸銨）、TEMED（四甲
蛋白質免疫印跡制備分離膠、積層膠
1）所需器材：制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸鈉）、10%AP（過硫酸銨）、TEMED（四甲基乙二胺）、移液槍、吸
PAGE膠制備方法實驗
實驗試劑1. 5x樣品緩沖液（10ml）:0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50％甘油，2ml 10％的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml 1％溴酚藍，0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周，或在－20℃保存數月。2. 凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g，甲叉雙丙烯
什么是成層膠
中文名稱成層膠英文名稱spacer gel定 義凝膠電泳時，在分離膠上方鋪設的一薄層大孔凝膠。能使樣品在電泳初始階段快速濃集在分離膠界面，樣品在分離膠就能達到更好的分離效果。樣品通過成層膠濃集是采用等速電泳的原理。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
免疫電泳實驗_倒膠
試劑、試劑盒Tris-巴比妥緩沖液貯液電極緩沖液瓊脂糖溶液實驗步驟為使瓊脂糖溶液均勻鋪層和得到重復的結果，玻璃板必須水平放置。為便于在免疫電泳中從第一向到第二向的轉移，最好使用瓊脂糖凝膠支持膜。12 ml 瓊脂糖溶液在 84 cm X 94 cm 上的凝膠厚度為 1.5 mm。倒膠后約 3 分鐘凝固
PAGE膠制備方法
實驗概要SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣品介質和凝膠中
PAGE膠制備方法
實驗試劑1. 5x樣品緩沖液（10ml）:0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50％甘油，2ml 10％的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml 1％溴酚藍，0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周，或在－20℃保存數月。2. 凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g，甲叉雙丙烯
瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法
一、瓊脂糖凝膠的特點????天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫
瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與
蛋白質SDSPAGE電泳分離膠和濃縮膠的濃度如何確定
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12膠紅線左右可以用12或10跑幾百的很大的用6的膠小蛋白12的10的一般都能跑如果不考慮效率的話...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2，看樣品濃度多少，以及你想用幾次通常我們是定到4微每微，總量100微，用10次如果濃度小的話定到2用5次
分離膠的應用特點
分離膠指不連續緩沖體系聚丙烯酰胺凝膠電泳中的一部分，其組成、緩沖液pH和凝膠孔徑與濃縮膠均不 同，具有分子篩效應的小孔徑凝膠。
如何選擇分離膠濃度
western blot中分離膠濃度的選擇取決于目的蛋白分子量不同的分離膠濃度對不同的目的蛋白分子量的分辨率不一樣，比如15%的分離膠更適合45kDa的分目的蛋白，而10%的分離膠更適合70kDa的目的蛋白而因為western blot的膜應該是完全覆蓋SDS PAGE的凝膠，所以不用太擔心條帶在凝
如何選擇分離膠濃度
western blot中分離膠濃度的選擇取決于目的蛋白分子量不同的分離膠濃度對不同的目的蛋白分子量的分辨率不一樣，比如15%的分離膠更適合45kDa的分目的蛋白，而10%的分離膠更適合70kDa的目的蛋白而因為western blot的膜應該是完全覆蓋SDS PAGE的凝膠，所以不用太擔心條帶在凝
成層膠的定義和用途
中文名稱成層膠英文名稱spacer gel定 義凝膠電泳時，在分離膠上方鋪設的一薄層大孔凝膠。能使樣品在電泳初始階段快速濃集在分離膠界面，樣品在分離膠就能達到更好的分離效果。樣品通過成層膠濃集是采用等速電泳的原理。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
SDSPAGE膠制備
一. 實驗原理： SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。 SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣
免疫印跡與免疫檢測實驗——半干轉移系統轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材半干燥轉移裝置濾紙實驗步驟1. ?制備樣品，并在小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠上分離蛋白質。?2. ?準備轉印膜3. ?拆卸凝膠夾層，除去積層膠。4. ?組裝轉印夾層：Mylar聚酯薄膜屏蔽物3張以轉移緩沖液飽和的濾紙已平衡的轉印膜凝膠3張以轉移緩沖液飽
分離膠的分離原理和特點
蛋白質 或核酸在電泳過程中由濃縮膠進入分離膠， 由于分子篩作用，小分子的物質容易通過， 阻力小，遷移速度快；大分子的則受到較大 的阻力而被滯后。因此即使凈電荷相似、泳 動率相等的物質分子也會由于分子篩效應， 根據其各自分子量的大小而在分離膠中被分 開。常用于檢測蛋白質純度、測定蛋白質分 子量以及DN
蛋白質免疫印跡實驗
實驗步驟 操作流程(1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張，吸水濾紙 2 張 (Whatman 3 MM)。(2) 將凝膠在轉印緩沖液中浸泡 30m in，將轉移膜、濾紙和海綿墊也在同樣的緩沖液浸濕。(3) 安裝轉印「夾心三明治」。將凝膠放置在玻璃平板上，然后將一張浸濕的濾紙放在凝膠上，如
蛋白質免疫印跡實驗
這是一個建立在 B urnette 實驗方案基礎上的實驗流程，小于 80k D a 的蛋白質的轉移效果很好并且結果穩定, 重復性好。應用這種膜轉移方法，我們利用多克隆抗體在下面的樣本中檢測目的蛋白：哺乳動物細胞和細菌溶解產物、細胞培養上清、組織提取物以及組織液。雖然下列實驗條件是根據我們自己的實驗需
蛋白質免疫印跡實驗
蛋白質免疫印跡實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 操作流程 (1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張，吸水濾紙 2 張
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗——制備多塊梯度膠
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TEMED丙烯酰胺儀器、耗材離心管電泳儀實驗步驟1. ?如灌制均一濃度凝膠一樣在多板凝膠灌制裝置中組裝好微型膠夾層。?2. ?如圖一、安裝好30 ml 梯度發生器、磁力攪拌器、蠕動泵（可選用）和聚乙烯Tygon管，梯度發生器的輸出端連接于制膠室下方的輸入口。圖一3. ?配制
跑膠蛋白質彌散
estern Blot（WB）可以說是生物學方向的同學最...最基本的實驗技能了，然而好看的 WB 總是別人的，自己的 WB 總是雜帶叢生，尤其是新課題、新抗體，總在目的條帶附近出現非特異性條帶。產生這種狀況的原因是什么呢、用下面的幾個例子，咱們一起研究一下。 案例一：啥也
跑膠蛋白質彌散
estern Blot（WB）可以說是生物學方向的同學最...最基本的實驗技能了，然而好看的 WB 總是別人的，自己的 WB 總是雜帶叢生，尤其是新課題、新抗體，總在目的條帶附近出現非特異性條帶。產生這種狀況的原因是什么呢、用下面的幾個例子，咱們一起研究一下。 案例一：啥也沒有 原因：比較多
跑膠蛋白質彌散
estern Blot（WB）可以說是生物學方向的同學最...最基本的實驗技能了，然而好看的 WB 總是別人的，自己的 WB 總是雜帶叢生，尤其是新課題、新抗體，總在目的條帶附近出現非特異性條帶。產生這種狀況的原因是什么呢、用下面的幾個例子，咱們一起研究一下。 案例一：啥也沒有 原因：比較多
電泳分離技術－濃縮膠與分離膠斷裂、板間有氣泡的影響
一般對電泳不會有太大的影響。濃縮膠與分離膠斷裂，主要原因是拔梳子用力不均勻或過猛所致;板間有氣泡，是由于在解除制膠的夾子后,板未壓緊而致空氣進入引起的。?
wb實驗分離膠立馬就凝固了行么
透明膠郵票粘在一起，要分而不損傷郵票的確是件很麻煩的事。用電吹風或水泡等也不失為好辦法。但剛開始不要盲目用電吹風或水泡等辦法用在郵票上，以免損傷郵票。你可以用透明膠粘在和郵票差不多的廢紙上(最好是撕下廢棄無用的郵票邊紙上)做個試驗，先用電吹風吹，如果沒有效，再用水泡等方法。試驗成功取得經驗后，再用到
簡介冷膠噴膠機的供膠裝置
組成部份說明：膠桶、泵 膠桶的容量為30L，桶蓋用于安裝活塞泵活塞泵 4:1活塞泵用于泵起和供應膠水，配有不銹鋼膠管和過濾器過濾器 不銹鋼過濾器具有過濾膠水和消除泵的震動雙重功能調壓器 4:1不銹鋼調壓器能自動控制膠量 I/P自動壓力追蹤閥 根據糊盒機的速度自動調節膠水的壓力與流量技術參數泵的
濾膠過濾層析法蛋白質的純化實驗
實驗方法原理 凝膠過濾層析是根據蛋白質分子大小不同而達到分離效果的，凝膠過濾填料中含有大量微孔，只允許緩沖液及小分子量蛋白質通過，而大分子蛋白質及一些蛋白復合物則被阻擋在外。因此，高分子量的蛋白質在填料顆粒間隙中流動，比低分于量蛋白更早地被洗脫下來。最大的蛋白質分子最早流出柱子，因為它們在到達柱底前
濾膠過濾層析法蛋白質的純化實驗
凝膠過濾層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 凝膠過濾層析是根據蛋白質分子大小不同而達到分離效果的，凝膠過濾填料中含有大量微孔，只允許緩沖液及小分子量蛋白質通過，而大分子蛋白
SDSPAGE－蛋白質樣品的制備
SDS-PAGE 蛋白質樣品的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 SDS-PAGE Loading Buffer ddH2O