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    CRISPR分子診斷技術(七)

    39 加上Cas9,它們為分子診斷和基因編輯提供了多樣靈活的工具。圖片來源:參考資料240 CRISPR分子診斷技術并不是只有Doudna和張鋒兩家在開發。2019年3月,在Keck Graduate Institute任職的Kiana Aran博士與合作者在Nature Biomedical Engineering的一篇論文中展示了一個全新技術CRISPR-Chip。這一技術將CRISPR和石墨烯膜場效應晶體管(gFET)技術結合起來。以石墨烯膜為基礎的晶體管上載有dCas9(只有識別功能,沒有剪切功能)和sgRNA的復合體。當樣品滴加到膜上,一旦dCas9-sgRNA識別并結合相應的靶DNA分子,晶體管就發出一個電信號。在SHERLOCK和DETECTR中,“剪切”產生信號;而在CRISPR-Chip中,“結合”產生信號。與SHERLOCK、DETECTR相比,CR......閱讀全文

    CRISPR分子診斷技術(七)

    39 ??加上Cas9,它們為分子診斷和基因編輯提供了多樣靈活的工具。圖片來源:參考資料240??? CRISPR分子診斷技術并不是只有Doudna和張鋒兩家在開發。2019年3月,在Keck Graduate Institute任職的Kiana Aran博士與合作者在Nature Biomedic

    CRISPR分子診斷技術(六)

    34 ???不是所有的塞卡病毒都一樣。2017年9月, 中科院遺傳所的許執恒團隊和軍事醫學科學院的秦成峰團隊在Science上報導,prM蛋白的一個突變(S139N)增加了塞卡病毒的傳染性,并引起更嚴重的小頭癥和更高的致死率。在該論文發表后一周內,Sabeti團隊和張鋒團隊就設計、開發出幾個能區分出

    CRISPR分子診斷技術(二)

    6 ?? Sherlock和Mammoth兩家公司的技術并非橫空出世,而是源于張鋒和Doudna兩家實驗室于2015-2018年期間在知名期刊上發表的一系列科研成果。這場學術上的比拼猶如兩個武林高手過招,精彩紛呈,讓人目不暇接。兩個團隊互相競爭,也互相學習,開拓了CRISPR分子診斷這一全新

    CRISPR分子診斷技術(三)

    13 ???或許是因為LbuC2c2的特異性和非特異性剪切活性遠遠高于LshC2c2的相應活性, Doudna團隊意識到LbuC2c2可以被用來構建高特異性、高靈敏度的RNA檢測方法。若想檢測出某一特定序列的RNA分子,先將與其互補的crRNA和LbuC2c2蛋白組裝,再加上一些報告RNA分

    CRISPR分子診斷技術(四)

    19 ???由于其高靈敏度和特異性,CRISPR診斷技術或CRISPR-Dx可以有很多用途:病毒檢測和病毒亞型區分,病菌識別和耐藥性基因確認,即時檢測(POCT), 患者基因分型,以及癌癥突變分析和液體活檢。這篇論文也初步展示了CRISPR-Dx在這些方面的應用前景。圖片來源:參考資料320???比

    CRISPR分子診斷技術(一)

    本篇為“連環畫”系列中的第二篇。“連環畫”中的每一篇都會介紹一個最新生物醫藥技術或趨勢。以圖畫為主,文字為輔。雖然無法做到系統全面,但希望能給讀者帶來一些啟發。每篇文章只代表作者個人的觀點或解讀,與禮來亞洲基金的投資決定無關。1 ???脊椎動物的免疫系統分為先天免疫(或非特異性免疫),和獲得性免疫(

    CRISPR分子診斷技術(五)

    25 ? DETECTR達到了aM水平的靈敏度和≤7個堿基的特異性。例如,它能準確地檢測出受試者攜帶的是哪種亞型的HPV。圖片來源:參考資料2和1026 ??在同期Science論文中,張鋒團隊從三個方面著手完善SHERLOCK:多重化、定量化和去熒光。先說多重化:他們挑選了來自兩個不同菌株的Cas

    CRISPR可以做分子診斷

    CRISPR-Cas系統背景回放面對噬菌體的威脅,細菌進化出了一套專門針對噬菌體或外源性遺傳物質的CRISPR-Cas免疫系統。CRISPR全稱為“簇狀、規律間隔的、短回文重復序列”(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repe

    “分子診斷萬花筒”小白篇:CRISPR/Cas技術簡介

    今年的諾貝爾化學獎授予兩位女科學家,以表彰她們在CRISPR/Cas技術上的卓越貢獻。隆地熊對于CRISPR/Cas系統能這么早就被諾貝爾獎垂青,深感欣慰。這項技術的出現已經引發了新一代分子診斷的發展。它進一步提升了分子診斷的特異性和靈敏度。回歸后的隆地熊有意對CRISPR/Cas技術進行簡單概述,

    分子診斷常用技術(二)

    ( 五) 生物芯片1991 年Affymetrix 公司的Fordor利用其所研發的光蝕刻技術制備了首個以玻片為載體的微陣列,標志著生物芯片正式成為可實際應用的分子生物學技術。時至今日,芯片技術已經得到了長足的發展,如果按結構對其進行分類,基本可分為基于微陣列( microarray) 的雜交芯片與

    分子診斷常用技術(一)

    分子診斷技術即是利用分子生物學方法對人類及病原體的各類遺傳物質進行檢測,以幫助對疾病進行診斷。以技術原理出發對分子診斷技術進行歸類與評價,以對目前臨床常用技術的沿革進行回顧。1961 年Hall 建立的液相分子雜交法標志著人類掌握分子生物學技術對特定核酸序列進行檢測,開啟了對疾病分子診斷的大門。19

    分子診斷常用技術(三)

    二、核酸序列測定測序反應是直接獲得核酸序列信息的唯一技術手段,是分子診斷技術的一項重要分支。雖然分子雜交、分子構象變異或定量PCR 技術在近幾年已得到了長足的發展,但其對于核酸的鑒定都僅僅停留在間接推斷的假設上,因此對基于特定基因序列檢測的分子診斷,核酸測序仍是技術上的金標準。( 一) 第1 代測序

    分子診斷技術大盤點

    分子診斷技術盤點分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。分子診斷技術為疾病的預測、診斷、預防、治療和轉歸提供了信息和決策依據,已廣泛應用于傳染病的診斷、流行病的調查、食品衛生檢查、腫瘤和遺傳病的早期診斷及法醫

    基于CRISPR的新冠病毒快速診斷技術

    英國《自然·生物技術》雜志16日公開的一項生物醫學研究,美國科學家報告了一種基于CRISPR的診斷工具可以快速檢測出新冠病毒。這一診斷工具大概需要45分鐘就能給出結果,準確性與傳統的RT-PCR檢測相當。 之前的疾病大流行告訴人們,快速且易獲取的檢測方法對于實現有效的公共衛生響應很重要。然而,目

    盤點:分子診斷常用技術(一)

    分子診斷技術即是利用分子生物學方法對人類及病原體的各類遺傳物質進行檢測,以幫助對疾病進行診斷。以技術原理出發對分子診斷技術進行歸類與評價,以對目前臨床常用技術的沿革進行回顧。1961年Hall 建立的液相分子雜交法標志著人類掌握分子生物學技術對特定核酸序列進行檢測,開啟了對疾病分子診斷的大門。1

    盤點:分子診斷常用技術(二)

    (?五 )?生物芯片1991年Affymetrix公司的Fordor利用其所研發的光蝕刻技術制備了首個以玻片為載體的微陣列,標志著生物芯片正式成為可實際應用的分子生物學技術。時至今日,芯片技術已經得到了長足的發展,如果按結構對其進行分類,基本可分為基于微陣列( microarray)?的雜交芯片

    漫談分子診斷常用技術沿革

    一、基于分子雜交的分子診斷技術  上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年,由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增,人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現,為基于分子雜交的體外診斷方法進行了最初

    現有分子診斷技術大盤點

    感染性疾病如今出現了很多新的變化,舊的疾病有了新的特點,也出現了諸如埃博拉病毒之類新的疾病。傳統的病原學檢測以分離、培養、染色、生物化學鑒定為主,但是有操作復雜、檢測周期長、干擾因素多、敏感性與特異性有限等缺點。雖然自動化技術縮短了檢測時間,但并沒有解決根本性問題,臨床應用中急需一種新的,更有效的診

    分子生物學常用實驗技術(七)

    (四) 電泳分析  通常合成的cDNA 第一鏈和第二鏈長度為350-6000 堿基,需進行1.4%堿性瓊脂糖電泳。將第一鏈和第二鏈摻入測定管中的反應液先用酚抽提,乙醇沉淀,方法見本章(二)第二鏈合成中的9-12 步,一般第一鏈和第二鏈上樣量相同。1. 標準分子量DNA 參照物的同位素標記(1) 通常

    漫談分子診斷技術50年(二)

      二、核酸序列測定  測序反應是直接獲得核酸序列信息的唯一技術手段,是分子診斷技術的一項重要分支。雖然分子雜交、分子構象變異或定量PCR技術在近幾年已得到了長足的發展,但其對于核酸的鑒定都僅僅停留在間接推斷的假設上,因此對基于特定基因序列檢測的分子診斷,核酸測序仍是技術上的金標準。  (一)第1代

    聚焦精準醫療之分子診斷技術

    文章導讀  分子診斷是精準醫療的技術基礎,也是體外診斷增速最快的分支行業。近幾年分子診斷產業以較快速度穩步增長。市場占有率還不高,處于行業成長初期,相對免疫診斷、生化診斷來講,發展并不成熟,中國分子診斷行業年均增速達到25%。分子診斷簡介  分子診斷技術是應用分子生物學如DNA、RNA和蛋白質等方法

    漫談分子診斷技術50年(一)

    一、基于分子雜交的分子診斷技術  上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年,由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增,人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現,為基于分子雜交的體外診斷方法進行了最初

    NatureMethods發布CRISPR新技術:CRISPRX

    斯坦福大學遺傳學系,藥理學系的幾位學者合作,開發出了一種為原位蛋白質工程重利用體細胞超突變的新技術――? CRISPR-X ,這將能幫助科學家們創建復雜的原始遺傳突變文庫,分析完善蛋白質工程。這一研究成果在線公布在10月31日的Nature Methods雜志上,文章的通訊作者是斯坦福大學Micha

    5大分子診斷技術解析

    據相關行業調研數據,截至日前,新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒研發企業已超過120家,底層技術應用原理大都是以基因擴增技術打底。而這背后所折射出來的,其實就是分子診斷技術大家族。未來3-5年IVD行業最具發展潛力的產品線是什么?答案無疑是分子診斷。新型冠狀病毒核酸檢測試劑研發—分子診斷技術應用總的來講,分

    下一代分子診斷技術

    自動化的高通量測序系統已經對生命科學研究產生了不可磨滅的影響。它們現在正準備革新分子診斷技術。CRISPR和下一代測序技術正在革新從傳染病到早期癌癥檢測的分子診斷,這門科學可能引領什么?CRISPR基因編輯和下一代測序(next-generation sequencing, NGS)技術已經

    一文讀懂分子診斷常用技術

      基于分子構象的分子診斷技術  (一)變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)與單鏈構象多態性(single strand conformation polymorphism,SSCP)  1970~1980年間,Fischer等

    分子診斷技術,先掌握這5種

    據相關行業調研數據,截至日前,新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒研發企業已超過120家,底層技術應用原理大都是以基因擴增技術打底。而這背后所折射出來的,其實就是分子診斷技術大家族。未來3-5年IVD行業最具發展潛力的產品線是什么?答案無疑是分子診斷。新型冠狀病毒核酸檢測試劑研發—分子診斷技術應用總的來講,分

    -BD攜手Seegene開發多重分子診斷技術

      “我們非常高興能與Seegene成為合作伙伴,把他們的創新ZL技術整合到我們的全自動化BD MAX?平臺中,”BD全球副總裁兼診斷系統婦女健康業務總經理Doug White說道。“有了Seegene的多重試劑,一次試驗能同時監測和識別各種類型的病原體,我們將繼續擴展BD MAX?的技術組合。” 

    分子診斷技術步入快速發展新時代

      21世紀的第一個10年是生命科學及其相關技術飛速發展的10年,以生物芯片為代表的一大批分子診斷技術日漸成熟,并正在以其巨大的優勢和潛力成為保障人類健康最重要的生物技術之一。中國工程院醫藥衛生學部、中國醫師協會檢驗醫師分會、中華醫學會檢驗分會等6月22日~24日在北京聯合主辦第一屆

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