miRNA的qPCR檢測
測序技術的引入促使miRNA研究領域進入快速發展階段,然而qPCR仍是驗證測序數據的重要標準。本文將為您介紹使用qPCR進行miRNA分析的基本要點,希望能幫助新人快速入門。什么是miRNA?miRNA是一類小的非編碼RNA,能夠與RNA誘導沉默復合物(RISC)結合,通過作用于mRNA,進而介導轉錄后基因表達。通常情況下,miRNA-RICS復合物能夠通過阻斷靶標miRNA的翻譯或促使其降解,從而起到抑制mRNA表達的作用。多數miRNA長度約為18?22個核苷酸,在樣本中的總RNA量中僅占很小的一部分。通常認為總RNA中miRNA的量大約為0.01%(1)。經過多年研究,一些mRNA與其相應miRNA之間的調控作用已經取得了較多的數據積累。miRNA參與的生物過程包括分化、發育、信號轉導和宿主感染應答。此外,多項研究結果表明,miRNA表達失調是癌癥等疾病的病因,或是某些疾病的指標。循環miRNA表達與疾病有關,并且血清和血......閱讀全文
miRNA的qPCR檢測
測序技術的引入促使miRNA研究領域進入快速發展階段,然而qPCR仍是驗證測序數據的重要標準。本文將為您介紹使用qPCR進行miRNA分析的基本要點,希望能幫助新人快速入門。什么是miRNA?miRNA是一類小的非編碼RNA,能夠與RNA誘導沉默復合物(RISC)結合,通過作用于mRNA,進而介導轉
miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA檢測試劑盒)實驗說明
一、概述 1、介紹 microRNA(miRNA)是一類有大約22 個核苷酸組成的非編碼小分子RNA,其廣泛存在于真核生物中。miRNA 在個體發育的不同時期及不同組織中有不同的表達模式,都表明了其在發育和分化中起有重大的調控作用。迄今為此,對miRNA 的檢測方法主要有Northe
miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA檢測試劑盒)實驗說明
一、概述1、介紹microRNA(miRNA)是一類有大約22 個核苷酸組成的非編碼小分子RNA,其廣泛存在于真核生物中。miRNA 在個體發育的不同時期及不同組織中有不同的表達模式,都表明了其在發育和分化中起有重大的調控作用。迄今為此,對miRNA 的檢測方法主要有Northern B
GEN:miRNA檢測行業熱度不減
MicroRNAs (miRNAs)是一種存在于真核生物的內源性非編碼小RNA,具有抑制靶向mRNA轉錄、翻譯或者剪切靶向mRNA并促使其降解的功能。它會組裝進入沉默復合體(RISC),識別并與靶向mRNA互補配對,從而降解或者阻止mRNA翻譯。 miRNAs負責調控多種生理過程,包括細胞周期
疾病檢測新指標miRNA(二)
楊醫師等人在另一個研究中,分析小鼠在遭受革蘭氏陽性菌感染后,血液中miRNA表達譜的變化(Hsieh CH et al., 2013)。枯草桿菌(Bacillus_subtilis)、糞鏈球菌(Streptococcus faecalis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus au
疾病檢測新指標miRNA(一)
microRNA(miRNA)是真核生物中廣泛存在的一種由 non-coding 區域轉錄的小片段 RNA,長度僅有 19~25 個核苷酸。根據 miRBase 數據庫,在所有物種發現的 miRNAs,至今已超過 2 萬個。miRNA 透過與標的 mRNA 的特異性結合,經由 post-tr
qpcr原理及流程
一、QPCR原理“qpcr原理是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應(PCR)循環后產物總量的方法;應用于對PCR進程進行實時檢測。檢測方法:加尾法和頸環法miRNA很短,用mRNA的反轉錄方法無法得到足以定量的cDNA。所以,miRNA的反轉要求將miRNA序列進行延長,目前
qpcr和ddpcr基因檢測的區別
QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。基因擴增熱循環儀+熒光儀+終點定量試劑,構成PCR-DNA終點法定量檢測(End-point quantitat
miRNA-mimics-miRNA-inhibitor
miRNA mimics 是模擬生物體 內源的miRNAs,運用化學合成的方法合成,能增強內源性miRNA的功能。miRNA inhibitor 是化學修飾的專門針對細胞中特異的靶miRNA的抑制劑。近年來人工合成的miRNA(artificial miRNA,amiRNA)已經成功應用于沉默預期靶
miRNA加尾逆轉錄后QPCR的溶解曲線的雜峰多怎么辦
溶解曲線有多個峰值就說明有非特異性擴增。可以升高退火溫度,或者更換引物
Nature新成果:ddPCR技術助力定量miRNA
來自Bio-Rad公司,Fred Hutchinson癌癥研究中心等處的研究人員發表了題為“Absolute quantification by droplet digital PCR versus analog real-time PCR”的文章,證明了液滴數字PCR( Droplet D
檢測血液中miRNA的簡便技術
癌變腫瘤會脫落一些微小的指示遺傳分子,稱為microRNAs。最近,密歇根大學的研究人員開發出一種有效的方法,能在血液中檢測到它們。相關研究結果發表在六月二十二日的《Nature Biotechnology》。 研究人員稱,他們這種方法可通過一種廉價的血液測試,同時對多種類型的癌癥進行篩選——
miRNA海綿—長效抑制miRNA
隨著研究的深入,已知miRNA的數量與日俱增,目前Sanger miRBase數據庫中收錄的人miRNA已達721條。不過,大部分miRNA的功能仍是未知數。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同樣如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困難得多。為什么
miRNA海綿—長效抑制miRNA
miRNA海綿隨著研究的深入,已知miRNA的數量與日俱增,目前Sanger miRBase數據庫中收錄的人miRNA已達721條。不過,大部分miRNA的功能仍是未知數。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同樣如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困
植物miRNA及piRNA的逆轉錄
miRNA在植物的發育、抗病、和應激反應中發揮著重要作用。一般認為,這些小的非編碼RNA通過靶向mRNA剪切,在后轉錄水平調節植物的基因表達。這些基因表達中的靶向變化由數百個成熟miRNA的差異表達所調控,每個成熟miRNA結合在靶mRNA的特定序列上。因此,對植物的成熟miRNA調控和表達進行分析
miRNA檢測的三種方法
MicroRNA (miRNA)是一種機體內源性表達的單鏈小分子RNA,位于基因組非編碼區,本身不具有開放閱讀框(open reading frame,ORF),具有高度保守性,時序性和組織特異性。miRNA廣泛存在于各種真核細胞中,不編碼任何蛋白質,長度僅為20~24nt。成熟的miRNA 5′端
miRNA檢測的三種方法
MicroRNA ?(miRNA)是一種機體內源性表達的單鏈小分子RNA,位于基因組非編碼區,本身不具有開放閱讀框(open reading frame,ORF),具有高度保守性,時序性和組織特異性。miRNA廣泛存在于各種真核細胞中,不編碼任何蛋白質,長度僅為20~24nt。成熟的miRN
小分子RNA(miRNA)簡介
一、什么是小分子RNA( MicroRNA)?? ? MicroRNA (miRNA) 是一類長度約為20-24個核苷酸長度的具有調控功能的非編碼RNA。 miRNA 主要參與基因轉錄后水平的調控。這些miRNA基因首先在細胞核內轉錄成原始miRNA轉錄本(primary transcrip
RealTime-ready自由定制您的qPCR-檢測方法
RealTime ready qPCR 分析方法是羅氏診斷公司應用科學部于2010年最新推出的即用型qPCR定制檢測方法,可快速靈敏地一次性定量6-384個基因的表達情況。您可于免費的RealTime ready 在線配置工具上,自由選擇人類相關靶基因并進行定制型多孔檢測板的配置。除了通
Cell-Reports:外泌體miRNA如何影響細胞通訊?
2013年,美國、德國3位科學家憑借他們所發現的細胞囊泡運輸的調節機制,榮獲2013年諾貝爾生理學或醫學獎。外泌體(exosomes)作為人體內一類重要囊泡,也開始受到越來越多的關注。科學家們已發現,外泌體會參與到免疫應答、凋亡、血管生成、炎癥反應、凝結等重要的生物過程中,細胞會通過分泌外泌體,
miRNA與癌癥:了解它們之間的關聯
在腫瘤發生的經典模型中,癌癥通過慢慢積累突變、放任細胞增長而發生。許多這樣的突變影響關鍵的調控蛋白,如原癌基因和抑癌基因。不過,非編碼RNA基因的突變也同樣有害,尤其是microRNA。 microRNA(miRNA)是一類22個核苷酸的調控轉錄本。它們與mRNA靶點相結合,或抑制其翻譯,或誘
miRNA研究
一、miRNA研究的基本問題和研究方法二、miRNA研究的綜合解決方案1. miRNA微陣列芯片服務Agilent miRNA 芯片(21.0)?Affymetrix miRNA 4.0 芯片2. miRNA測序服務??miRNA-seq文庫構建流程??miRNA測序數據分析流程3. miRNA R
中國農大:雞MDV誘導型淋巴瘤的miRNA分析
馬立克氏病(Marek’s Disease, MD)是雞的一種淋巴組織增生性腫瘤病,其特征為外周神經淋巴樣細胞浸潤和增大,引起肢(翅)麻痹,以及性腺、虹膜、各種臟器、肌肉和皮膚腫瘤病灶。MD 是一種世界性疾病,目前是危害養雞業健康發展的三大主要疫病之一,引起雞群較高的發病率和死亡率。同時
檢測循環腫瘤細胞中miRNA的新技術
越來越多的證據表明,循環腫瘤細胞(CTC)中的micrornA具有診斷和預后的潛力。然而,檢測卻并非易事。近日,西班牙的研究人員在《Science Reports》上介紹了一種方法,能利用原位雜交檢測這種小的非編碼RNA。 CTC是從原發性腫瘤脫落,然后進入循環系統的一種細胞。它們到達其他的
Nacia數字PCR在基因表達分析中的應用
華盛頓大學醫學院兒科和加利福尼亞大學圣地亞哥分校醫學院兒科的研究人員建立了一個穩定可靠的基于RNA磁珠提取和數字PCR的方法,可從糞便樣本中檢測與EE(熱帶腸病)關聯的人mRNA,靈敏度可達20拷貝GAPDH mRNA/200mg糞便樣本。已有報道表明病人糞便中存在人mRNA,可作為反應病人消化道病
重大發現!miRNA可鑒別心梗引起的心肌損傷!
相信大家在新冠肺炎疫情全球流行期間,一定聽過一種很致命的并發癥——暴發性心肌炎。 心肌炎是心臟的炎癥性疾病,其病因包括病原體感染、毒素、藥物及自身免疫功能障礙,最終可能引起心臟性猝死或進展為擴張型心肌病。 然而,當前心肌炎的診斷仍較為困難,常常需要建立在排除冠心病的基礎上,且難以與冠狀動脈非
Tecan與Roche聯合打造即用型qPCR檢測平臺
美國北卡羅來納大學迪特默實驗室正在使用已整合了Roche LightCycler? 480實時熒光定量PCR儀的Tecan Freedom EVO? 150全自動液體處理平臺對病毒性癌癥進行生物學研究,如研究由卡波氏肉瘤相關病毒((Kaposi sarcoma-associated herp
什么叫QPCR
QPCR 問:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。問:QPCR、DNA檢測、PCR之間的關系?答:聚合酶鏈式反應(Polymer
什么叫QPCR
QPCR 問:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。問:QPCR、DNA檢測、PCR之間的關系?答:聚合酶鏈式反應(Polymer
qpcr實驗流程
Q-PCR 實驗流程一、實驗前準備,每天早上到實驗室后,先把超凈工作臺的紫外燈打開 15-20 分鐘。2超凈臺前做實驗,需佩戴干凈的橡膠手套/一次性薄膜手套,RNA 抽提需 帶口罩。3取 EP 管/槍頭時需用鑷子,不可以用使用過的手套直接取用。取完 EP 管/槍頭后,袋子及時封好。@橡膠手套須放入超