檢測循環腫瘤細胞中miRNA的新技術
越來越多的證據表明，循環腫瘤細胞(CTC)中的micrornA具有診斷和預后的潛力。然而，檢測卻并非易事。近日，西班牙的研究人員在《Science Reports》上介紹了一種方法，能利用原位雜交檢測這種小的非編碼RNA。 CTC是從原發性腫瘤脫落，然后進入循環系統的一種細胞。它們到達其他的組織或器官，導致腫瘤轉移。鑒于近年來CTC檢測技術的進步，研究人員能夠利用這些上皮細胞來監測癌癥進展，并跟蹤患者對治療的反應。 盡管如此，大多數CTC分析的靈敏度較低。據GENYO研究團隊介紹，這主要是因為只有少量的上皮標志物可用來鑒定和分離全血中的循環腫瘤細胞，通常是上皮細胞粘附分子(EpCAM)和細胞角蛋白(CK)。然而，這些上皮細胞也可能來自其他上皮組織，而并非腫瘤。 讓事情更加復雜的是，最新數據表明存在一部分CTC，不表達EpCAM或CK。相反，這些細胞表現出上皮-間質轉化(EMT)的特征。這個過程與腫瘤轉移相關，其中上皮......閱讀全文
Science：新型單細胞基因表達檢測技術
發表在最新一期《科學》(Science)雜志上的一篇研究論文，證實了一種新型的大規模平行測序技術可借助于新一代測序(NGS)在單細胞水平上檢測基因表達。 論文作者、來自Cellular Research, Inc公司的Christina Fan博士、Glenn Fu博士以及Stephen Fo
CHO細胞表達系統與酵母細胞表達系統比較
?CHO細胞表達系統與畢赤酵母表達系統是當前發展前景看好的兩個表達系統，為了能夠更加直觀地對兩個表達系統有一定的認識，特意在此篇中對兩個表達系統作一定的比較，從而能夠更進一步的對兩個表達系統有更深的了解1．CHO細胞表達系統? ?? ??（1）優點? ?? ? CHO細胞屬于成纖維細胞，既可以貼壁生
檢測肝癌細胞基因表達的實驗方法
材料與方法⒈材料人肝癌細胞系HepG2由中國醫科大學科學實驗中心保存。DMEM培養基和胎牛血清購自BioInd公司。細胞轉染試劑Lipofectamine 3000和Trizol購自Invitrogen公司。BDNF AS質粒、BDNF AS與BDNF基因完全互補序列缺失突變質粒以及空載體質
外周血淋巴細胞HLAB27表達檢測
試驗原理??????? HLA-B27屬于1型MHC基因。基本上表達在機體所有有核細胞上，特別是淋巴細胞表面有豐富的含量。使用熒光定量標準微球，校正HLA-B27實驗條件后，測定樣本中T淋巴細胞HLA-B27表達水平。若HLA-B27表達水平大于標準微球設定MARK，則為陽性結果；若HLA-
檢測肝癌細胞基因表達的實驗方法！
檢測肝癌細胞基因表達的實驗方法！ 材料與方法 ⒈材料 人肝癌細胞系HepG2由中國醫科大學科學實驗中心保存。DMEM培養基和胎牛血清購自BioInd公司。細胞轉染試劑Lipofectamine 3000和Trizol購自Invitrogen公司。BDNF AS質粒、BDN
真核細胞表達系統的類型與常用真核細胞表達載體
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統，由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷，人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今
表達蛋白檢測實驗
實驗方法原理 當重組病毒通過噬斑純化和擴增后，免疫印跡可用于鑒定重組蛋白，并檢測其是否有預期的大小以及是否從感染細胞中分泌。下面的步驟是介紹檢測非分泌性（細胞內）蛋白的，如果重組蛋白是分泌到培養基中的，可按注解中的步驟操作。實驗材料 生長至匯片的單層 BS-C-1 細胞重組痘苗病毒儲液試劑、試劑盒
表達蛋白檢測實驗
免疫印跡法 免疫沉淀法 點印跡法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當重組病毒通過噬斑純化和擴增后，免疫印跡可用于鑒定重組蛋白，并檢測其是否有預期的大小以及是
無細胞表達系統——難度蛋白表達的福音
1964年有兩個人開創了體外蛋白表達的先河，這兩個人的名字大家必定不會陌生—馬太和尼倫伯格。因為他們的創新思維讓人類破譯了編碼氨基酸的64種翻譯密碼子。從此，體外蛋白表達開始為科學界所關注，不過彼時這個系統蛋白表達量低、持續時間短、穩定性差，使其未能得到進一步發展。 到80年代中期Sp
無細胞表達系統——難度蛋白表達的福音
1964年有兩個人開創了體外蛋白表達的先河，這兩個人的名字大家必定不會陌生—馬太和尼倫伯格。因為他們的創新思維讓人類破譯了編碼氨基酸的64種翻譯密碼子。從此，體外蛋白表達開始為科學界所關注，不過彼時這個系統蛋白表達量低、持續時間短、穩定性差，使其未能得到進一步發展。到80年代中期Spirin等對其進
使用酶標儀的細胞成像系統檢測標簽蛋白的表達
優勢：?? 帶細胞成像系統的功能模塊擴展了微孔讀板機的檢測應用2.?? 方便檢測每個細胞或每孔的標簽蛋白的表達水平3.?? 按照一般微孔讀板機的簡單流程4.?? 細胞可視化數據輸出，增加了數據可信性某些細胞蛋白存在或不存在，可代表著細胞對某些刺激的反應、某種分化的狀態或特定細胞類型的獨特特征或者基因
嗅鞘細胞的細胞表達介紹
OECs表達膠質纖維酸性蛋白（GFAP），在血管壁形成終足，以及參與形成膠質界膜，此界膜大致勾勒出了嗅神經軸突與嗅球顆粒層嗅小球的交界線，OECs在免疫細胞化學超微結構特征以及與軸突的功能聯系方面與星形膠質細胞存在明顯不同。OECs對神經生長因子受體（P75NGR）Laminin細胞粘附分子L1
真核細胞表達系統1
自上世紀70年代基因工程技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今日已取得令人矚目的成就 。隨著人類基因組計劃的完成，越來越多的基因被發現，其中多數基因功能不明。利用表達系統在哺乳動物細胞內表達目的基因是研究基
真核細胞表達系統2
在病毒感染晚期，由于大量外源蛋白的表達引起昆蟲細胞的裂解，胞質內的物質釋放出來，與 目的蛋白混在一起，從而使蛋白的純化工作變得很困難，另外水解酶的釋放會降解重組蛋白。為了克服以上這些困難，科學工作者先后嘗試用絲蛾肌動蛋白基因啟動子或桿狀病毒ie-1基因啟動子表達外源蛋白，但效果都不明顯。Farr
真核細胞表達系統3
由于腺病毒易于培養、純化，宿主范圍廣，故采用該類病毒構建的載體被廣泛應用腺病毒載體的構建依賴于腺病毒穿梭質粒和包裝載體之間的同源重組。但是哺乳動物細胞內的這種同源重組效率很低，利用細菌內同源重組法構建重組體效率會大大提高，即將外源基因插入到腺病毒穿梭質粒中，形成轉移質粒，將其線性化后與腺病毒包裝質粒
有哪些方法可以檢測細胞周期蛋白的表達水平？
常用于檢測細胞周期蛋白表達水平的方法：免疫印跡法（Western Blot）：通過特異性抗體識別細胞周期蛋白，然后利用顯色或發光技術檢測蛋白條帶的強度，從而反映蛋白的表達水平。免疫組織化學（Immunohistochemistry，IHC）：適用于檢測組織切片中細胞周期蛋白的表達和定位。酶聯免疫吸附
流式中檢測細胞表面和細胞內蛋白表達水平的抗體有何...
流式中檢測細胞表面和細胞內蛋白表達水平的抗體有何區別？抗體只是針對相應抗原的，至于是針對胞內還是胞膜對你檢測來說并無明顯影響，你只需要查清楚到底是針對哪一個部位的抗原的，應該是可以用同一種抗體進行檢測的，在流式操作時只需注意：如果是針對胞內，則需要加破膜劑，讓抗體能和相應抗原接觸，否則就不需要了。
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變，會影響其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如鐮狀細胞貧血，就是由于血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的谷氨酸變異成了纈氨酸，從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸，降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度，使
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變，會影響其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如鐮狀細胞貧血，就是由于血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的谷氨酸變異成了纈氨酸，從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸，降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度，使
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變，會影響其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如鐮狀細胞貧血，就是由于血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的谷氨酸變異成了纈氨酸，從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸，降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度，使
哪些實驗方法可檢測細胞中某種蛋白表達量
蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變，會影響其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如鐮狀細胞貧血，就是由于血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的谷氨酸變異成了纈氨酸，從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸，降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度，使它在紅細胞中隨血流至氧分壓低的外
利用“無創”技術檢測活細胞中熒光蛋白表達（二）
結果波長優化用GeminiEM對DsRed進行波長掃描，以此舉例如何進行波長優化。為了檢測最大激發波長，我們首先固定發射波長為600nm，然后對發射波長進行掃描。掃描結果顯示最大激發波長為556nm(圖1)。同樣為了檢測最大發射波長，我們固定激發波長為535nm，然后掃描發射波長，從而得到584nm
利用“無創”技術檢測活細胞中熒光蛋白表達（一）
簡介在過去的五年中，熒光蛋白在監測體內生物學研究中，起到越來越重要的作用。源于維多利亞多管發光水母中的綠色熒光蛋白(GFP)是最早被我們應用的熒光蛋白，但是隨著時間的推移，現在我們可以使用的熒光蛋白種類也越加豐富，包括加強型的變異GFP蛋白、從其他種類水母中發現的熒光蛋白和珊瑚礁蛋白。它們都可以在眾
利用“無創”技術檢測活細胞中熒光蛋白表達（三）
細胞混合結果在本次實驗中，我們在一個96孔板里混合了多種細胞，保證每個孔大約50,000個細胞。因此，如果是1:1混合，那么每種細胞會有25,000個。如果是1:1:1混合，那么每種細胞將有16,700個。實驗板分別用480/510nm(AsGFP和ZsGreen的優化結果)和550/588nm(D
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量
如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變，會影響其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如鐮狀細胞貧血，就是由于血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的谷氨酸變異成了纈氨酸，從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸，降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度，使
高水平炎性細胞因子表達檢測解決方案
警惕新冠肺炎下的“細胞因子風暴”，這些整理或許可以幫到你近期在頂級的醫學雜志《柳葉刀》上，我國的研究人員發表了關于新型冠狀病毒（以下簡稱新冠病毒）患者感染的臨床表現、實驗室數據等方面分析的文章“Clinical features of patients infected with 2019 no
哪些方法可以用于檢測細胞周期蛋白的表達水平？
常見的用于檢測細胞周期蛋白表達水平的方法：免疫印跡法（Western Blot）：通過特異性抗體檢測細胞裂解液中細胞周期蛋白的含量。實時定量聚合酶鏈式反應（qPCR）：測定細胞周期蛋白的 mRNA 水平，間接反映其表達。免疫組織化學（IHC）/免疫細胞化學（ICC）：用于檢測組織切片或細胞中的細胞周
體內無細胞DNA的表達
對于一些由缺乏三種特定蛋白質的基因突變引起的疾病（如Leber先天性黑蒙和血友病），直接的想法是將能夠表達相關蛋白質的基因“播種”到體內，而不是“種”到基因組中，但在細胞質中自由表達。最典型的例子是幾種批準的病毒轉染基因療法（如FDA批準的用于治療遺傳性眼病的基因藥物“Luxturna”）。這種方法
造血干細胞的表達
熒光標記單參數檢測造血干細胞（CD34-FITC）實驗步驟展開熒光標記雙參數檢測造血干細胞實驗步驟展開熒光標記三參數檢測造血干細胞（ProCOUNT法）實驗步驟展開
造血干細胞的表達
熒光標記單參數檢測造血干細胞（CD34-FITC） 熒光標記雙參數檢測造血干細胞 熒光標記三參數檢測造血干細胞（ProCOUNT法） ? ? ? ? ? ? 實驗步驟