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    蛋白質PEG化修飾與純化

    聚乙二醇具有較廣的分子量分布,隨著平均分子量的不同,性質也產生差異,當分子量小于1000Da時,聚乙二醇是無色無臭粘稠的液體,高分子量的聚乙二醇則是蠟狀白色固體,固體聚乙二醇的熔點正比于分子量,逐漸接近67℃的極限。毒性隨分子量的增加而減少,小于400Da的 PEG在體內會經乙醇脫氫酶降解成有毒的代謝物,而分子量大于1000 Da的PEG經過多年應用于食品業、化妝品業和制藥業證明沒有毒性。聚乙二醇分子中含有大量乙氧基,能夠與水形成氫鍵,因而具有良好的水溶性,同時又可溶于除乙醚、己烷、乙二醇以外的大部分有機溶劑。大多數蛋白質經聚乙二醇修飾后,除保留或增加其水溶性外,還可以獲得在一些有機溶劑中的溶解性。在蛋白質溶液中,聚乙二醇無論是處于游離還是結合形式,即使濃度很高,對蛋白質分子都沒有副作用。聚乙二醇修飾的蛋白質一般構象不會改變,其結合物的生物學活性主要由結合物的蛋白質部分產生。聚乙二醇具有免疫學惰性,即使分子量高達5.9×106D......閱讀全文

    蛋白質PEG化修飾與純化

    聚乙二醇具有較廣的分子量分布,隨著平均分子量的不同,性質也產生差異,當分子量小于1000Da時,聚乙二醇是無色無臭粘稠的液體,高分子量的聚乙二醇則是蠟狀白色固體,固體聚乙二醇的熔點正比于分子量,逐漸接近67℃的極限。毒性隨分子量的增加而減少,小于400Da的 PEG在體內會經乙醇脫氫酶降解成有毒的代

    蛋白質PEG化介紹

    蛋白質PEG化鍵凱科技提供高質量的聚乙二醇化服務。鍵凱科技可以根據客戶的需要設計聚乙二醇化,提供包含聚乙二醇化鍵合、分離提純等全面服務。鍵凱科技成熟的鍵合和分離技術,可有效控制鍵合比率和取代率,已經逐步得到客戶認同。Y 型聚乙二醇NHS酯和蛋白質的連接示意圖:Y 型聚乙二醇馬來酰亞胺和蛋白質的連接示

    天津專項“PEG修飾蛋白質藥物技術及產業化”-通過中期考核

      4月30日,中科院北京分院滕啟治副處長等代表科技合作處對過程工程研究所承擔的中國科學院支持天津濱海新區建設科技行動計劃項目“PEG修飾蛋白質藥物技術及產業化”進行了中期考核。  該項目由過程工程所、天津派格生物技術有限公司和天津藥研院共同完成,旨在推動天津濱海新區長效蛋白藥物的產

    PEG修飾及其修飾GLP1的意義

    PEG修飾是一個使多肽或蛋白質在治療或生物技術方面的效力得以提高的重要過程。當PEG以適當的方式連接在蛋白質或多肽上時,它能改變許多的特征,而主要的生物活性功能,如酶活性或特異結合位點,可以保留下來。PEG修飾通過如下幾種途徑改善藥物的性能。首先,PEG連接在蛋白質或多肽的表面上,提高了它的分子大小

    修飾性PEG的用途介紹

    聚乙烯亞胺在細胞培養中可增強黏附力較弱的細胞的黏附力。PEI是陽離子聚合物,細胞外表面的負電荷附著到覆蓋有PEI的培養皿底面,為細胞和平板之間提供了更強的附著力。不過,聚乙烯亞胺有很強的細胞毒性。聚乙烯亞胺是歷史上繼多聚賴氨酸之后發現的第二種聚合物轉染試劑。PEI能將DNA縮合成帶正電荷的微粒,這些

    蛋白質的泛素化修飾

    蛋白質的泛素化修飾主要發生在賴氨酸殘基的側鏈,且通常是多聚化 (多泛素化) 過程。被多泛素化修飾的蛋白質會被蛋白酶體(proteasome)識別進而被降解。三種關鍵的酶共同介導了這一多泛素化過程, 包括泛素活化酶 E1 (ubiquitin activating enzyme),泛素結合酶 E2 (

    多肽PEG聚乙二醇修飾

    PEG修飾,即聚乙二醇修飾,又稱聚環氧乙烷修飾,是將PEG通過化學方法偶聯到蛋白質或多肽分子上,從而提升多肽活性的一種方法。自Davies 1977年用PEG 修飾牛血清白蛋白以來, PEG修飾技術廣泛應用于多種蛋白質和多肽的化學修飾。?PEG修飾具有延長半衰期、降低或消失免疫原性、減少毒副作用以及

    慢病毒的濃縮與純化——PEG8000濃縮法

    實驗概要本實驗介紹了用PEG-8000濃縮法濃縮與純化慢病毒的操作步驟。主要試劑1. NaCl2. PEG8000主要設備1. 高壓滅菌鍋2. 0.45μm濾頭3. 高速離心機4. 低溫冰箱實驗步驟1. 5X PEG8000 NaCl配制稱取NaCl 8.766 g; PEG8000 50g溶解在2

    聚乙二醇(PEG)修飾劑簡介

       聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,親水性,且無免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG經過多年應用于食品業、化妝品業和制藥業證明沒有毒性。常用來修飾蛋白質、多肽、酶等生化藥物和生物醫用材料。修飾后的蛋白質和多肽等藥物主要的生物學功能保持不變,并且獲得很多有利的性質。    化

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       聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,親水性,且無免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG經過多年應用于食品業、化妝品業和制藥業證明沒有毒性。常用來修飾蛋白質、多肽、酶等生化藥物和生物醫用材料。修飾后的蛋白質和多肽等藥物主要的生物學功能保持不變,并且獲得很多有利的性質。    化

    聚乙二醇(PEG)修飾劑簡介

    聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,親水性,且無免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG經過多年應用于食品業、化妝品業和制藥業證明沒有毒性。常用來修飾蛋白質、多肽、酶等生化藥物和生物醫用材料。修飾后的蛋白質和多肽等藥物主要的生物學功能保持不變,并且獲得很多有利的性質。化學藥物或蛋白

    聚乙二醇(PEG)修飾劑簡介

       聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,親水性,且無免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG經過多年應用于食品業、化妝品業和制藥業證明沒有毒性。常用來修飾蛋白質、多肽、酶等生化藥物和生物醫用材料。修飾后的蛋白質和多肽等藥物主要的生物學功能保持不變,并且獲得很多有利的性質。    化

    蛋白質修飾與腫瘤研究

      蛋白質的修飾這一領域已成為全球生物醫學界關注的焦點。除了一些傳統的磷酸化和泛素化,硝基化、乙酰化、SUMO化引發關注外,還有一些修飾策略,如PEG化修飾、脂質體化、糖基化,這些復雜的調控作用在眾多慢性疾病(退行性疾病、代謝性疾病、腫瘤、心血管、內分泌等)以及一些炎癥等中都起到關鍵調控作用。通過對

    簡述蛋白質的修飾與加工

      包括糖基化、羥基化、酰基化、二硫鍵形成等,其中最主要的是糖基化,幾乎所有內質網上合成的蛋白質最終被糖基化。糖基化的作用是: ①使蛋白質能夠抵抗消化酶的作用;②賦予蛋白質傳導信號的功能;③某些蛋白只有在糖基化之后才能正確折疊。  糖基一般連接在4種氨基酸上,分為2種:  O-連接的糖基化(O-li

    蛋白質修飾研究現狀與未來

      蛋白質的修飾與降解,和生命活動以及各種人類疾病密切相關,這一領域已成為全球生物醫學界關注的焦點。蛋白質的糖基化修飾、磷酸化修飾、乙酰化修飾、泛素化修飾、亞硝基化修飾等,是蛋白在生物代謝過程中的重要裝備,對研究疾病具有重要意義。蛋白質的正確的修飾對于蛋白降解也非常重要,從而保證生命活動的正常循環。

    蛋白質的糖基化修飾主要分為

    特征 N-連接 O-連接合成部位 粗面內質網 主要在高爾基體合成方式 來自同一個寡糖前體 一個個單糖加上去與之結合的氨基酸殘基 天冬酰氨 絲氨酸、蘇氨酸、羥脯、羥賴最終長度 至少5個糖殘基 1-4個糖殘基第一個糖殘基 N-乙酰葡萄糖胺 N-乙酰半乳糖胺大概清楚了吧! 蛋白質糖基化是一種蛋白質修飾,作

    蛋白質提取與純化技術

    實驗概要大腸桿菌表達蛋白以可溶和不溶兩種形式存在,需要不同的純化策略。現在,許多蛋白質正在被發現而事先并不知道它們的功能,這些自然需要將蛋白質分離出來后,進行進一步的研究來獲得。分析蛋白質的方法學現已極大的簡化和改進。必須承認,蛋白質純化比起DNA克隆和操作來是更具有藝術性的,盡管DNA序列具有異乎

    蛋白質提取與純化技術

    ?選擇材料及預處理  以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方

    蛋白質提取與純化技術

      以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方法分離的兩個或幾個

    聚聚乙二醇修飾劑(PEG修飾劑)及其他衍生物

    一、聚乙二醇修飾劑 近年來,蛋白質多肽等生物大分子藥物和天然產物藥物分子被越來越多的應用于疾病治療領域,極大地推動了醫藥事業的發展。然而,生物大分子在藥用過程中的作用卻由于其半衰期短、容易產生免疫原性抗原性、易被酶解、有一定藥理毒性等問題被大大限制。為有效解決該問題,國家生化

    聚乙二醇修飾劑(PEG修飾劑)及其他衍生物(二)

    ????????? 分枝型PEG修飾G-CSF 、直鏈型PEG修飾G-CSF及未修飾G-CSF 的藥代動力學比較,分枝型PEG修飾產物半衰期可提高5倍以上。PEG-PTS修飾G-CSF的HPSEC檢測,證明其具有高的修飾選擇性,且活性保持60%以上?????????? mPEG-hydrazide修

    聚乙二醇修飾劑(PEG修飾劑)及其他衍生物(一)

    ? 一、聚乙二醇修飾劑??? 近年來,蛋白質多肽等生物大分子藥物和天然產物藥物分子被越來越多的應用于疾病治療領域,極大地推動了醫藥事業的發展。然而,生物大分子在藥用過程中的作用卻由于其半衰期短、容易產生免疫原性抗原性、易被酶解、有一定藥理毒性等問題被大大限制。為有效解決該問題,國家生化工程技術研

    講解PEG化蛋白藥物

    蛋白質(含多肽)類藥物主要包括酶、細胞因子等一些具有特殊功能的蛋白質。其療效不僅取決于蛋白特定的化學結構,而且還取決于其特定的空間結構,因此可以通過基因工程或化學修飾等手段部分或全部解決此類藥物的缺陷。蛋白質類藥物的PEG化一直是藥學領域研究的熱點之一。經過30多年的研究探索,PEG修飾現已成功應用

    蛋白質酰基化修飾與生物合成代謝研究再獲新進展

      近日,華東理工大學生物工程學院、生物反應器工程國家重點實驗室葉邦策教授團隊在蛋白質酰基化修飾與生物合成代謝研究領域再次取得重要進展,相關研究成果以“乙酰磷酸與c-di-GMP協同調節BldD活性,控制放線菌發育與抗生素合成”為題,發表于國際知名學術期刊《核酸研究》。  放線菌作為生產抗生素種類最

    蛋白質純化與結晶的原理

      獲得蛋白質的晶體結構的第一個瓶頸,就是制備大量純化的蛋白質(>10mg),其濃度通常在10mg/ml以上,并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術,將特定基因以選殖(clone)的方式嵌入表現載體(expression vector)內,此一載體通常具有易于調控的特性。之后再將帶有特定

    蛋白質提取與純化技術2

    2、等電點沉淀法 蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小,因而溶解度也最小,各種蛋白質的等電點有差別,可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉淀,但此法很少單獨使用,可與鹽析法結合用。 3、低溫有機溶劑沉淀法 用與水可混溶的有機溶劑,甲醇,乙醇或丙酮,可使多數蛋白質溶解度降低并析出,此法分

    蛋白質純化與結晶的原理

    獲得蛋白質的晶體結構的第一個瓶頸,就是制備大量純化的蛋白質(>10mg),其濃度通常在10mg/ml以上,并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術,將特定基因以選殖(clone)的方式嵌入表現載體(expression vector)內,此一載體通常具有易于調控的特性。之后再將帶有特定基因

    蛋白質純化與結晶的原理

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    蛋白質提取與純化技術(一)

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