蛋白質PEG化修飾與純化
聚乙二醇具有較廣的分子量分布，隨著平均分子量的不同，性質也產生差異，當分子量小于1000Da時，聚乙二醇是無色無臭粘稠的液體，高分子量的聚乙二醇則是蠟狀白色固體，固體聚乙二醇的熔點正比于分子量，逐漸接近67℃的極限。毒性隨分子量的增加而減少，小于400Da的 PEG在體內會經乙醇脫氫酶降解成有毒的代謝物，而分子量大于1000 Da的PEG經過多年應用于食品業、化妝品業和制藥業證明沒有毒性。聚乙二醇分子中含有大量乙氧基，能夠與水形成氫鍵，因而具有良好的水溶性，同時又可溶于除乙醚、己烷、乙二醇以外的大部分有機溶劑。大多數蛋白質經聚乙二醇修飾后，除保留或增加其水溶性外，還可以獲得在一些有機溶劑中的溶解性。在蛋白質溶液中，聚乙二醇無論是處于游離還是結合形式，即使濃度很高，對蛋白質分子都沒有副作用。聚乙二醇修飾的蛋白質一般構象不會改變，其結合物的生物學活性主要由結合物的蛋白質部分產生。聚乙二醇具有免疫學惰性，即使分子量高達5.9×106D......閱讀全文
蛋白質純化與結晶的原理
獲得蛋白質的晶體結構的第一個瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質（>10mg），其濃度通常在10mg/ml以上，并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現載體（expression vector）內，此一載體通常具有易于調控的特性。之后再將帶有特定
蛋白質提取與純化技術1
選擇材料及預處理以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方法分離
蛋白質提取與純化技術（二）
2、等電點沉淀法 蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小，因而溶解度也最小，各種蛋白質的等電點有差別，可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉淀，但此法很少單獨使用，可與鹽析法結合用。3、低溫有機溶劑沉淀法 用與水可混溶的有機溶劑，甲醇，乙醇或丙酮，可使多數蛋白質溶解度降低并析出，此法分辨
蛋白質純化與結晶的原理
獲得蛋白質的晶體結構的第一個瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質（>10mg），其濃度通常在10mg/ml 以上，并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現載（expressionvector）內，此一載體通常具有易于調控的特性。之后再將帶有特定基因的
蛋白質純化與結晶的原理
獲得蛋白質的晶體結構的第一個瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質（>10mg），其濃度通常在10mg/ml以上，并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現載體（expression vector）內，此一載體通常具有易于調控的特性。之后再將帶有特定
蛋白質純化與結晶的原理
獲得蛋白質的晶體結構的第一個瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質（>10mg），其濃度通常在10mg/ml 以上，并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現載（expressionvector）內，此一載體通常具有易于調控的特性。之后再將帶有特定基
蛋白質提取與純化技術（二）
二、蛋白質的分離純化蛋白質的分離純化方法很多，主要有：（一）根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析 中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質的溶解度增加，此稱鹽溶；當鹽濃度繼續升高時，蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出，這種現象稱鹽析，將大量鹽加到蛋白質溶
蛋白質純化策略與考慮因素
純化策略及影響因素 今天分享一些有關蛋白純化過程中應該考慮的一些因素。 1、在進行一個蛋白純化之前，應該對其蛋白有所研究，包括其性質，敏感性，例如該蛋白的溶解性，對高鹽或pH敏感，是否容易氧化等； 2、需要考慮蛋白質的用途，來決定制備蛋白的量級規模，這就要考慮到層析柱的尺寸，得到的蛋白濃度
蛋白質提取與純化技術（一）
選擇材料及預處理以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方法分離
蛋白質組學技術對營養脅迫中泛素化修飾變化情況分析與
吃貨們，為了健康，少吃點吧！ 小編知道一名資深的吃貨，無論什么都阻擋不了美食的誘惑。但我忍不住要阻止：“吃貨們！為了健康，少吃點吧！” 為什么要讓熱愛美食的你們做出如此痛苦的選擇呢？看看下面這篇文獻解讀你就知道了。 Cell Death and Disease IF=5.96
有關蛋白質的修飾與加工的介紹
包括糖基化、羥基化、酰基化、二硫鍵形成等，其中最主要的是糖基化，幾乎所有內質網上合成的蛋白質最終被糖基化。 糖基化的作用是： ①使蛋白質能夠抵抗消化酶的作用；②賦予蛋白質傳導信號的功能；③某些蛋白只有在糖基化之后才能正確折疊。 糖基一般連接在4種氨基酸上，分為2種： O-連接的糖基化（O-
sumo化與磷酸化修飾聯合分析
隨著質譜技術的不斷進步，大規模修飾組學的方法也越來越成熟，PTM作為生物體內非常重要的生理現象也逐步被揭示出參與各項生命活動。今天我們就一起來學習一篇運用質譜技術對磷酸化修飾和類泛素化修飾鑒定，找出兩種修飾聯合作用對在DNA復制損傷壓力時的響應。該篇文獻來自哥本哈根大學的研究人員于2017年10月發
多肽修飾合成常用策略（二）
4、豆蔻酰化和棕櫚酰化用脂肪酸酰化N末端可以讓多肽或蛋白質與細胞膜結合。N末端上豆蔻酰化的序列可以使Src家族的蛋白激酶和逆轉錄酶Gaq蛋白靶向結合細胞膜。利用標準的偶聯反應即可將豆蔻酸連接到樹脂-多肽的N末端，生成的脂肽可在標準條件下解離并通過RP-HPLC純化。5、糖基化糖肽類如萬古霉素和替考拉
連接橋改變PEG修飾葡激酶藥用性質研究獲進展
聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)修飾技術已經被廣泛應用于改善蛋白質藥物的理化性質和藥用功能。PEG修飾可有效提高蛋白質藥物在體內的循環半衰期、增強其對蛋白水解酶的抗性、降低免疫原性。但是，由于PEG鏈對蛋白質表面的空間屏蔽作用，影響了蛋白質藥物與其受體的相互作用，從
蛋白質純化與結晶的技術應用
蛋白質純化與結晶的技術應用蛋白質純化與結晶的原理?獲得蛋白質的晶體結構的*個瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質（>10mg），其濃度通常在10mg/ml以上，并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現載體（expression vector）內，此一
蛋白質純化與結晶的技術應用
蛋白質純化與結晶的技術應用蛋白質純化與結晶的原理?獲得蛋白質的晶體結構的*個瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質（>10mg），其濃度通常在10mg/ml以上，并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現載體（expression vector）內，此一
蛋白質純化
蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛，是一項重要的操作技術。 一個典型的真核細胞可以包含數以千計的不同蛋白質，一些含量十分豐富，一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質，必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出來。
蛋白質純化
是當代生物產業當中的核心技術。該技術難度、成本均高；例如一個生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質分離純化當中。常用技術有：１、沉淀，２、電泳：蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的，在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等。３、透析：利用透析袋把大分子蛋白質與小分
蛋白質純化
蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛，是一項重要的操作技術。 一個典型的真核細胞可以包含數以千計的不同蛋白質，一些含量十分豐富，一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質，必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出來。用于分離蛋白質的最重要特性有大小、電荷、疏水性和對其他分子的
經peg修飾后的納米結構脂質載體有什么優點
【經PEG修飾后的納米結構脂質載體的優點】PEG化學修飾是修飾納米載體最常用的方法。經PEG修飾后的NLC親水性增強．可阻止RES對NLC的吞噬．從而延長NLC在體內的循環時間，并對體內非RES的特異組織產生靶向作用。在過去幾十年里，難溶性或水不溶性藥用活性成分（APIs）制劑的發展一直是制藥技術領
PROTEOMICS：OGalNAc糖基化修飾蛋白質的系統發現
近日，上海交通大學系統生物醫學研究院張延課題組在國際知名蛋白質組學研究期刊PROTEOMICS上發表題為《Systematic identification of the protein substrates of UDP-GalNAc: polypeptide N-acetylgalactos
蛋白質糖基化修飾在生命體中的作用
治療性重組蛋白或單克隆抗體是影響細胞、組織、器官乃至生命的外源性重組蛋白，在細胞內成熟過程中幾乎均會發生蛋白質糖基化修飾，而糖基化修飾的質和量的差異，可能會影響相關重組蛋白表達水平、結構及功能。重組蛋白表達服務可以幫助研發人員研發高效、高質量的蛋白質。在生物體中50%以上的蛋白質存在糖基化現象，
蛋白質特性與分離純化技術的選擇
摘要：蛋白質的一級、二級、三級和四級結構決定了它的物理、化學、生物化學、物理化學和生物學性質，綜述了不同蛋白質之間的性質存在差異或者改變條件是使之具有差異，利用一種同時多種性質差異，在兼顧收率和純度的情況下，選擇蛋白質提純的方法。關鍵詞：蛋白質 分離純化前言??? 蛋白質在組織或細胞中一般都是以復雜
細菌中蛋白質的提取與純化技術
實驗試劑?采用T7? Tag Affinity Purification KitT7?Tag抗體瓊脂。B/W緩沖液：4.29mM Na2HPO4，1.47 mM KH2PO4，2.7 mM KCl， 0.137mM NaCl，1%吐溫-20，pH7.3 洗脫緩沖液: 0.1M檸檬酸，pH2.2. 中
蛋白質特性與分離純化技術的選擇
摘要：蛋白質的一級、二級、三級和四級結構決定了它的物理、化學、生物化學、物理化學和生物學性質，綜述了不同蛋白質之間的性質存在差異或者改變條件是使之具有差異，利用一種同時多種性質差異，在兼顧收率和純度的情況下，選擇蛋白質提純的方法。 關鍵詞：蛋白質 分離純化 前言 蛋白質
蛋白質特性與分離純化技術的選擇
摘要：蛋白質的一級、二級、三級和四級結構決定了它的物理、化學、生物化學、物理化學和生物學性質，綜述了不同蛋白質之間的性質存在差異或者改變條件是使之具有差異，利用一種同時多種性質差異，在兼顧收率和純度的情況下，選擇蛋白質提純的方法。關鍵詞：蛋白質 分離純化前言??? 蛋白質在組織或細胞中一般都是以復雜
細菌中蛋白質的提取與純化技術
實驗試劑采用T7? Tag Affinity Purification KitT7?Tag抗體瓊脂。B/W緩沖液：4.29mM Na2HPO4，1.47 mM KH2PO4，2.7 mM KCl， 0.137mM NaCl，1%吐溫-20，pH7.3 洗脫緩沖液: 0.1M檸檬酸，pH2.2
細菌中蛋白質的提取與純化技術
實驗概要大腸桿菌表達蛋白以可溶和不溶兩種形式存在，需要不同的純化策略。現在，許多蛋白質正在被發現而事先并不知道它們的功能，這些自然需要將蛋白質分離出來后，進行進一步的研究來獲得。分析蛋白質的方法學現已極大的簡化和改進。必須承認，蛋白質純化比起DNA克隆和操作來是更具有藝術性的，盡管DNA序列具有異乎
細菌中蛋白質的提取與純化技術
實驗試劑采用T7? Tag Affinity Purification KitT7?Tag抗體瓊脂。B/W緩沖液：4.29mM Na2HPO4，1.47 mM KH2PO4，2.7 mM KCl， 0.137mM NaCl，1%吐溫-20，pH7.3 洗脫緩沖液: 0.1M檸檬酸，pH2.2
“蛋白質的生成、修飾與質量控制”項目啟動
2月14日，“蛋白質的生成、修飾與質量控制”項目啟動會在中科院生物物理研究所召開。王恩多、王志珍院士等11位課題骨干，科技部基礎司和項目管理中心有關專家，以及項目外專家組成員生物物理所許瑞明研究員、北京大學趙新生教授和清華大學李艷梅教授等參加會議。 項目首席科學家、生物物理所柯莎研究員和四