納米生物技術可監控病毒感染過程
病毒性疾病嚴重威脅著人類健康，深刻認識和理解病毒感染過程及致病機制是病毒性疾病防治的重要基礎。研究病毒感染過程通常基于熒光標記技術，但是常用的熒光蛋白及傳統熒光染料往往容易發生光漂白，難以長時間動態跟蹤整個感染過程。 在“納米研究”國家重大科學研究計劃的支持下，圍繞“量子點標記技術研究病毒侵染過程及宿主應答”項目，來自武漢大學，中國科學院武漢病毒研究所、長春應化所、深圳先進技術研究院，以及北京理工大學等單位的專家，自2011年1月開始開展了有益的探索，并取得了重要進展。 據該項目首席科學家、武漢大學化學與分子科學學院教授龐代文介紹，以半導體熒光量子點為代表的性能優異的納米標記材料，可望克服現有熒光標記材料的不足，為實時動態跟蹤病毒感染宿主細胞這一復雜的動態生物學過程提供新途徑。 新型納米標簽 為了研究病毒感染過程，就需要熒光標記。一般來說，活細胞或活體示蹤要求所用的熒光標記材料在復雜的生物環境中具有良好的穩定性，能......閱讀全文
病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法：較為常用，具體步驟是：1) 抗體溶液的制備：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素：根據待標記抗體的總量，按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白
獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對...
獨特無標記細胞分析技術無需熒光染料標記細胞也可對其進行成像分析簡介基于細胞成像的分析技術一般需要使用熒光染料進行標記，一些熒光標記可能對活細胞具有毒性或者只能用于固定過的細胞進行染色。無標記細胞分析技術使得研究者既無需耗時耗力的染色流程也無需擔心染料對正常細胞活力的影響，就可以計算出細胞數目和細胞匯
免疫熒光共標記怎么計算共標記的細胞個數
共定位的定義：共定位是對樣品內兩種熒光標記的信號共同分布的位置進行分析。 共定位就如字面意思上所說的，只能夠表明蛋白A和B都在此細胞有表達，并且在同樣的細胞內位置/細胞器。相關短語：共定位通道 PDM Channel 細胞共定位 Cellular co localization 細胞內共定位信息 c
腫瘤細胞的標記及活體熒光成像
摘要 以綠色熒光蛋白( GFP) 作為標記基因轉入人類肺癌細胞系(ASTC2a21) , 經800 mg/ L G418 篩選, 獲得5 株高表達細胞系. 利用流式細胞儀對GFP 表達的穩定性進行了初步研究, 結果表明本實驗中有些細胞株間GFP 表達穩定性有顯著差異( P < 0101) . 將穩定
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強
熒光染料CFSE活細胞標記的特點
熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強
細胞骨架的熒光探針標記方法
細胞骨架主要有微管(micmtuble, MT)，微絲(microfilament, MF)，中間絲(intermediate filament, IF三種類型。它們分別由不同的蛋白單體組裝而成，其中微管蛋白(tubulin)、肌動蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是細胞骨架的重要組
武漢病毒所病毒雙特異性熒光標記研究取得進展
近日，中科院武漢病毒研究所王漢中領導的研究團隊在利用納米材料標記病毒以用于病毒與宿主細胞相互作用的可視化相關研究中繼續取得研究進展，相關文章發表于生物材料領域的專業期刊Biomaterials上。 病毒的單顆粒標記和示蹤技術為我們揭示病毒和宿主細胞間的相互作用過程提供新的視野和平臺。標記了
細胞凋亡檢測實驗——熒光探針雙標記法
實驗方法原理本實驗用1μg/ml 三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡，同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）對細胞進行雙重染色，可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿（HT）是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病，
綠色熒光蛋白(GFP)標記亞細胞定位
一、原理利用綠色熒光蛋白(GFP)來示蹤胞內蛋白的技術。利用GFP融合蛋白技術來進行活細胞定位研究是目前較為通行的一種方法，在光鏡水平進行研究，不需要制樣，沒有非特異性標記的影響。并且GFP的分子量為27kD，經激光掃描共聚集顯微鏡激光照射后，可產生一種綠色熒光，從而對蛋白質進行精確定位。激光掃描共
武漢病毒所在囊膜病毒熒光標記示蹤研究方面取得進展
近日，中科院武漢病毒研究所王漢中領導的研究團隊在納米材料標記囊膜病毒示蹤方面取得重要研究進展，相關文章發表于美國化學會刊物ACS nano(IF:11.421)上。 病毒侵染機制的研究是病毒學研究中最基本和最重要問題之一。單顆粒活病毒標記示蹤技術為病毒侵染機制的研究提供了一種更為有效的
武漢病毒所在囊膜病毒熒光標記示蹤研究方面取得進展
近日，中科院武漢病毒研究所王漢中領導的研究團隊在納米材料標記囊膜病毒示蹤方面取得重要研究進展，相關文章發表于美國化學會刊物ACS nano(IF:11.421)上。 病毒侵染機制的研究是病毒學研究中最基本和最重要問題之一。單顆粒活病毒標記示蹤技術為病毒侵染機制的研究提供了一種更為有效的
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗...2
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗體的方法 2P3（2）Chadwick氏法?試劑和材料：抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸鹽緩沖鹽水、1%硫柳汞、離心機及離心管、三角燒瓶(25 ml)、冰槽、無菌吸管及毛細滴管、燒杯(500 ml
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗...1
制備熒光抗體是免疫熒光組織化學的重要技術之一，制備特異性強和高效價的熒光抗體必須選用高質量的熒光素和高效價的抗體。?一、熒光素?熒光是指一個分子或原子吸收了給予的能量后即刻引起發光，停止能量供給，發光也瞬時停止。可以產生明亮熒光的染料物質，稱熒光素。目前主要常用于標記抗體的熒光素如下：?1、異硫氰酸
熒光素酶基因標記腫瘤細胞的實驗步驟
哺乳動物生物發光，一般是將Firefly luciferase基因（由554個氨基酸構成，約50KD）即熒光素酶基因整合到預期觀察的細胞染色體DNA上以表達熒光素酶，培養出能穩定表達熒光素酶的細胞株，當細胞分裂、轉移、分化時, 熒光素酶也會得到持續穩定的表達。將標記好的細胞接種到實驗動物
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗材料 懸浮細胞試劑、試劑盒 多聚-L-賴氨酸儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 1. ?細胞在冰浴中冷卻，然后用臺式離心機于4℃以800 g 離心5 min，吸去培養液并以4℃PBS重懸細胞。?2. ?離心吸去PBS，以1~2 ml 2%PFA固定液，或2%PFA固定液/0.1% Triton X
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒多聚
LSCM多重熒光標記
由于大部分實驗都需同時觀測兩個或多個細胞內的組分，需要對細胞進行多重熒光標記。這時，研究者需要綜合考慮實驗目的、所使用的激光共聚焦顯微鏡配置和已有的實驗材料。通常，激光共聚焦顯微鏡配備?4?個激光器(405nm?半導體固體激光器、氬離子激光器、543nm?氦/氖激光器或?561nm半導體固體激光器和
LSCM的熒光標記
傳統應用于熒光標記的染料如異硫氰酸熒光素(fluorescin isothiocyanate，FITC，ex 490 nm/em520 nm)、四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC，ex 550 nm/em 620 nm)、羅丹明(Rhodamine，ex 560 nm/em 540 ~ 660 nm)
熒光素標記抗體技術
(一) 原理 目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在鹼性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合，標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力
單層生長細胞的免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光
流式細胞儀標本制備熒光標記法
實驗方法原理活細胞免疫熒光技術是用于FCM檢測的標本準備，染色后也能在熒光顯微鏡下進行觀察，在某些實驗條件下，活細胞免疫熒光染色后的特異性和敏感性要優于滴片固定的常規間接免疫熒光的結果。活細胞表面保留有較完整的抗原或受體，先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合，再用熒光標記的第二抗體結合，
單層生長細胞的免疫熒光標記實驗
實驗材料 單層細胞試劑、試劑盒 PBS多聚甲醛甲醇抗體儀器、耗材 離心機水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?置生長成片的單層細胞于冰上冷卻，吸去培養液并以4℃PBS洗滌。吸去PBS。2. ?如欲研究細胞表面抗原，則以2%PFA于冰上面定30 min。如為細胞質抗原，則可用含0.1% Triton X-10
活體成像中熒光色素標記細胞的方法
實驗概要本實驗以研究干細胞活體移植后的存活率為例，簡介了一兩種內源性熒光色素標記的實驗方法。實驗原理活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光（bioluminescence）技術與熒光（fluorescence）技術。生物發光是用熒光素酶(Lucifer
流式細胞儀檢測的免疫熒光樣品標記
用于流式細胞儀檢測的常用熒光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5，PE和PI，在以上各種熒光染料中，PE熒光最強，適用于弱表達抗原；FITC最便宜，適用于強表達抗原，適用范圍廣。??? 1．直接免疫熒光標記法 取一定量的細胞懸液(濃度約l×l06個/m1)，直接加入熒光素標記抗體進行免疫反應(
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
?活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光（bioluminescence）技術與熒光（fluorescence）技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA，今天，生物發光標記物可以標記到任何一種基因上，使對基因功能的全面細致研究
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
? 活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)技術與熒光(fluorescence)技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA，今天，生物發光標記物可以標記到任何一種基因上，使對基因功能的全面細致研
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
?? 活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光（bioluminescence）技術與熒光（fluorescence）技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA，今天，生物發光標記物可以標記到任何一種基因上，使對基因功能的全面細致研究
細胞膜流動性測定實驗_熒光探針標記法
實驗方法原理常用于研究膜脂流動性的熒光探針為1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH摻入到細胞膜脂烴鏈區后，介質粘度增加，順反異構受到抑制，成為唯一能發光的全反構型。實驗材料腫瘤細胞試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液DPH儀器、耗材熒光分光光度計離心機實驗步驟1. ?取對數生長期的腫瘤細胞，以pH
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例
活體成像中熒光色素標記細胞的方法舉例????活體光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光（bioluminescence）技術與熒光（fluorescence）技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA，今天，生物發光標記物可以標記到任何