研究揭示細菌逆轉錄酶介導新型免疫機制
近日，中國科學院武漢病毒研究所團隊，揭示了新型細菌抗病毒防御系統DRT4的工作機制。研究發現，在遭遇噬菌體入侵時，帶有DRT4防御系統的細菌通過“自殺式防御”策略，犧牲被感染個體以保全群體。這一防御系統的啟動“鑰匙”來自于病毒自身編碼的一種核酸結合蛋白。 研究團隊綜合運用生物化學、生物物理學及微生物學等多種研究手段，從分子層面解析了DRT4系統的防御機制。團隊發現，該機制具有獨特的“無模板”DNA合成能力，盡管DRT4被定義為原核生物逆轉錄酶家族，但其具有不依賴模板合成隨機序列的單鏈DNA的酶活性。這一非典型聚合酶活性是其執行防御功能的核心基礎。同時，DRT4上高度保守的酪氨酸殘基（Tyr125）作為DNA合成的起始位點，揭示了其利用蛋白作為引物合成單鏈DNA的機制。 研究發現，病毒蛋白為系統“觸發器”，T5噬菌體編碼的單鏈DNA 3‘末端結合蛋白ORF55，是激活防御的“扳機”。在未感染狀態下，細菌體內的3‘—5‘核酸......閱讀全文
研究揭示細菌逆轉錄酶介導新型免疫機制
近日，中國科學院武漢病毒研究所團隊，揭示了新型細菌抗病毒防御系統DRT4的工作機制。研究發現，在遭遇噬菌體入侵時，帶有DRT4防御系統的細菌通過“自殺式防御”策略，犧牲被感染個體以保全群體。這一防御系統的啟動“鑰匙”來自于病毒自身編碼的一種核酸結合蛋白。 研究團隊綜合運用生物化學、生物物理學及
細菌第六型分泌系統介導的殺細菌效應的新研究
2013年10月，著名的'細胞'雜志社(Cell Press)接收了來自南開大學生命科學院博士、哈佛大學醫學院博士后研究員傅暘博士的最新科研成果--"轉座子突變測序法霍亂弧菌腸道定殖必需基因研究以及由此揭示的宿主體內細菌第六型蛋白分泌系統介導的殺細菌作用的激活"，并作為12月主推高光文章發表
Nature：CRISPR/Cas系統介導細菌躲避宿主免疫系統
CRISPR/Cas（規律成簇的間隔短回文重復）是細菌用來抵御病毒的一個基因系統，該系統在基因工程領域的應用潛力巨大，由此吸引了許多科學家的注意。而埃默里大學（Emory University）的研究人員發現，這一系統還能幫助細菌躲避哺乳動物的免疫系統，相關研究論文刊登在了近期出版的《自然》（N
AEM：趨磁細菌介導的過高熱或可有效抑制耐藥性細菌感染
隨著金黃色葡萄球菌對抗生素的耐藥性越來越強，科學家們迫切需要開發出可以有效殺滅耐藥性菌株的新方法，近日一項刊登于國際雜志Applied and Environmental Microbiology上的研究論文中，來自中國科學院的研究人員在嚙齒類動物中進行實驗，通過利用磁性納米晶體產生過高熱（Hy
邵峰課題組破解細菌感染介導自噬的機制
2019年7月18日，北京生命科學研究所邵峰課題組在Cell雜志發表了題為A Bacterial Effector Reveals the V-ATPase-ATG16L1Axis that Initiates Xenophagy的研究文章，通過研究沙門氏菌III型分泌系統效應蛋白SopF，
研究揭示喹諾酮抗性蛋白介導的細菌耐藥機制
細菌抗生素耐藥性是預防傳染病的重大威脅，通常是由質粒轉移或基因突變引起的。當細菌暴露于抗生素環境中會通過提高細菌的突變率篩選出適應抗生素環境的基因突變，結果導致臨床環境中耐藥菌株的出現。質粒驅動抗生素抗性基因的水平轉移，引發細菌耐藥性的產生。此外，質粒和細菌染色體之間的相互作用會影響抗生素抗性的
細菌感染觸發VATPase復合物招募ATG16L1，進而介導細菌自噬
2019年7月18日，北京生命科學研究所邵峰課題組在Cell發表了題為A Bacterial Effector Reveals the V-ATPase-ATG16L1Axis that Initiates Xenophagy的研究文章，通過研究沙門氏菌III型分泌系統效應蛋白SopF，揭示了細
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount 實驗材料 組織樣品和細胞培養物
逆轉錄酶的活性介紹
①RNA指導的DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高 。②RNase H活性；
逆轉錄酶的活性特點
①DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為賴氨酸的tRNA，在引物tRNA 3'－末端以5'→3'方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3'→5'外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比
關于逆轉錄酶的簡介
多反轉錄酶都具有多種酶活性，主要包括以下幾種活性 。 ①RNA指導的DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
實驗方法原理 原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount實驗材料 組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒 Nuclear Fast Red甲醛緩沖液檢測溶液DEPC 處理的水PBSKH2P04二甲苯乙醇牛血清白蛋白SSC NBT BCIP 顯色劑胃蛋白酶DNA
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
這一部分介紹了一種原位 PCR，特別是逆轉錄酶原位 PCR 的簡略方法。詳細討論了其中的每個實驗程序。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗方法原理原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount實驗材料組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒Nuc
逆轉錄酶的合成步驟
1、使用前每個組份輕輕混勻，然后2000rpm離心20s2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管，依次加入2～5μgRNAnμL3、65℃保溫5min，然后冰浴5min；4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份RNase抑制劑（40u/μL）0.5μL10×M-MLVReactionBuff
逆轉錄酶的作用過程
逆轉錄酶的作用是以dNTP為底物，以RNA為模板，tRNA(主要是色氨酸tRNA)為引物，在tRNA3'-末端上，按5'→3'方向，合成一條與RNA模板互補的cDNA單鏈，它與RNA模板形成RNA-cDNA雜交體。隨后又在反轉錄酶的作用下，水解掉RNA鏈，再以cDNA為模板合
逆轉錄酶的特點和用途
逆轉錄酶 是一種依賴RNA的DNA聚合酶。此酶首先是1970年從鼠白血病毒和勞氏肉瘤病毒中發現的。這兩個課題組的論文都發在了同一期的《Nature》雜志上。最普遍使用的是從鳥類骨髓母細胞瘤病毒（AMV）分離出來的。活性：一種可以有效地將mRNA反轉錄成DNA的酶，其產物稱為cDNA(compleme
武漢物數所等細菌雙組分系統介導pH調控機制研究獲進展
雙組分信號轉導系統（Two-component signal transduction system，TCS）是細菌體內最重要的信號轉導系統，調控著細菌的大部分生命活動。作為潛在的新型抗菌藥物靶標，細菌的TCS長久以來都是相關領域研究的熱點。 TCS由組氨酸激酶（Histidine Kin
武漢物數所細菌雙組分系統介導的pH調控機制研究獲進展
雙組分信號轉導系統（Two-component signal transduction system，TCS）是細菌體內最重要的信號轉導系統，調控著細菌的大部分生命活動。作為潛在的新型抗菌藥物靶標，細菌的TCS長久以來都是相關領域研究的熱點。沙門氏菌侵染宿主細胞示意圖沙門氏菌中，受pH調控的組氨
補體介導的細胞毒實驗——補體介導法
細胞毒實驗可應用于：（1）檢查細胞膜抗原；（2）鑒定抗體的特異性。實驗方法原理帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死
關于AMV逆轉錄酶的基本介紹
amv逆轉錄酶分離自禽類成髓細胞瘤病毒，其方法由houts等人的方法改進而來。分離得到的酶是分子量為157kd的αβ全酶。amv逆轉錄酶經高度純化，完全無核酸酶污染。amv逆轉錄酶可用于cdna合成，也可用于rna和dna的雙脫氧測序。amv逆轉錄酶以總rnd或polya+rnd為模板，具有以r
關于逆轉錄酶的合成步驟介紹
1、使用前每個組份輕輕混勻，然后2000rpm離心20s 2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管，依次加入2～5μgRNAnμL 3、65℃保溫5min，然后冰浴5min； 4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份 RNase抑制劑（40u/μL）0.5μL 10×M-MLV
逆轉錄酶抑制劑的作用
NRTI均為DNA的天然底物的衍生物,其中AZT和d4T為脫氧胸苷的類似物；ddC和3TC為脫氧胞苷的類似物；ddI和TNF為脫氧腺苷的類似物；ABC為脫氧鳥苷的類似物,均需在細胞內轉化為活性的三磷酸衍生物,通過胸苷激酶、胸苷酸激酶的磷酸化作用,形成活化型三磷酸體(AZTTP)。AZTTP為HIV-
逆轉錄酶抑制劑的應用
(1)對于抗病毒治療失敗者,病毒反彈緣于患者的依從性差和對藥物的耐受性,因此及時應用其他逆轉錄酶抑制劑更換,為選擇適宜的替代藥,確定藥物相關不良反應是由哪種藥所致尤為重要。(2)鑒于對胎兒的安全性數據尚不充分,逆轉錄酶抑制劑對幼、嬰兒可能有不利的影響,并通過乳汁分泌,因此對妊娠、哺乳期婦女慎用；對兒
逆轉錄酶抑制劑的分類
1.核苷類逆轉錄酶抑制劑上市的HIV-1核苷類逆轉錄酶抑制劑(NRTI)按結構可以分為三類? ?:(1)2',3'-二脫氧核苷類在糖基部分被修飾,包括:AZT,d4T和ABC；(2)2',3'-二脫氧核苷類在糖基部分沒有被修飾,包括:ddI和ddC；(3)2'
逆轉錄酶抑制劑的作用
NRTI均為DNA的天然底物的衍生物,其中AZT和d4T為脫氧胸苷的類似物；ddC和3TC為脫氧胞苷的類似物；ddI和TNF為脫氧腺苷的類似物；ABC為脫氧鳥苷的類似物,均需在細胞內轉化為活性的三磷酸衍生物,通過胸苷激酶、胸苷酸激酶的磷酸化作用,形成活化型三磷酸體(AZTTP)。AZTTP為HIV-
關于逆轉錄酶的醫學發展介紹
細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA（TTAGGG）序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂，端粒會丟失50～200bp，當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解，細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用，可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重
逆轉錄酶抑制劑的分類
1.核苷類逆轉錄酶抑制劑上市的HIV-1核苷類逆轉錄酶抑制劑(NRTI)按結構可以分為三類 :(1)2',3'-二脫氧核苷類在糖基部分被修飾,包括:AZT,d4T和ABC；(2)2',3'-二脫氧核苷類在糖基部分沒有被修飾,包括:ddI和ddC；(3)2',3
病毒介導基因轉移
病毒介導基因轉移：前述的化學和物理方法都是通過傳染方式基因轉移。病毒介導基因轉移（viral mediatedgene transfer）是通過轉換方式完成基因轉移，即以病毒為載體（vector），將外源目的基因通過基因重組技術，將其組裝于病毒上，讓這種重組病毒去感染受體宿主細胞，這種病毒稱為病毒運
Science：有比CRISPRCas更安全的技術嗎？基于retroelement的基因組編輯工具
在一篇展望文章中，Stephen Tang和Samuel Sternberg討論了基于retroelement的基因編輯作為CRISPR-Cas方法的一種更安全的替代方法。 精確的基因組編輯技術改變了現代生物學。可編程DNA靶向的能力已經迅速提高，這主要是由于細菌RNA引導的CRISPR-Ca
關于逆轉錄酶的注意事項介紹
在進行RT反應之前，應考慮以下幾個方面： 1、RNA 成功的cDNA合成來自高質量的RNA，高質量的RNA至少應保證全長并且不含逆轉錄酶的抑制劑，如EDTA或SDS。在提取RNA的過程中，要特別防止RNase的污染，同時在逆轉錄反應中經常加入RNase抑制劑以增加cDNA合成的長度和產量。R