不對稱PCR技術的定義和方法介紹
不對稱PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一對引物，PCR擴增后產生大量的單鏈DNA(SSDNA)。這對引物分別稱為非限制引物與限制性引物，其比例一般為50——100:1。在PCR反應的最初10——15個循環中，其 擴增產物主要是雙鏈DNA，但當限制性引物(低濃度引物)消耗完后，非限制性引物(高濃度引物)引導的PCR 就會產生大量的單鏈DNA。不對稱PCR的關鍵是控制限制性引物的絕對量，需多次摸索優化兩條引物的比例。還有一種方法是先用等濃度的引物PCR擴增，制備雙鍵 DNA，(dsDNA)，然后以此dsDNA為模板，再以其中的一條引物進行第二次PCR，制備ssDNA。不對稱PCR制備的ssDNA，主要用于核酸序列測定。......閱讀全文
不對稱PCR技術的定義和方法介紹
不對稱PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一對引物，PCR擴增后產生大量的單鏈DNA(SSDNA)。這對引物分別稱為非限制引物與限制性引物，其比例一般為50——100:1。在PCR反應的最初10——15個循環中，其 擴增產物主要是雙鏈DNA，但當限制性引物(低濃度引物)消耗完后，非限制
原位PCR技術的定義和方法介紹
1.概述：原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的，實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等.2.其基本方法為? ?
重組PCR技術的定義和原理介紹
1.定義：使兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年報道了由PCR擴增的兩個DNA片段通過重組合后再經延伸而制備出新的DNA分子。2. 其基本原理：將突變堿基，插入或缺失片段，或一種物質的幾個基因片段均設計在引物中，先分段對
RTPCR技術的定義和檢測方法
? ?1.定義：是以RNA為模板，聯合逆轉錄反應（reverse transcription，RT）與PCR，可用于檢測單個細胞或少數細胞中少于10個拷貝的RNA 模板。 RNA擴增包括兩個步驟：在單引物的介導下和逆轉錄酶的催化下，合成RNA的互補cDNA；加熱后cDNA與RNA鏈解離，然后與另一引
標記PCR和彩色PCR技術的定義及特點介紹
標記PCR(Labelled Primers，LP-PCR) 是利同位素或熒光素對PCR引物的5‘端進行標記，用來檢測靶基因是否存在。彩色PCR(Color Complementation assay PCR，CCAPCR)，是LP-PCR的一種，它用不同顏色的熒光染料；標記引物的5'端，因
反向PCR（Inverse－PCR）技術的定義和特點
1.概述：反向PCR(reverse PCR)是用反向的互補引物來擴增兩引物以外的未知序列的片段，而常規PCR擴增的是已知序列的兩引物之間DNA片段.實驗時選擇已知序列內部沒有切點的限制性內切酶對該段DNA進行酶切，然后用連接酶使帶有粘性末端的靶序列環化連接，再用一對反向的引物進行PCR，其擴增產物
巢氏PCR（Nested－PCR）技術的定義和特點
1.定義：也稱套式PCR是指利用兩套PCR引物（巢式引物）進行兩輪PCR擴增反應。在第一輪擴增中，外引物用以產生擴增產物，此產物在在內引物的存在下進行第二輪擴增。在這種技術中，首先用一對外引物進行第1輪PCR，然后再使用第1對引物擴增的DNA 序列內部的一對引物再次擴增。2.優點：由于巢式PCR反應
免疫PCR(immunoPCR)技術的定義及特點介紹
1.定義：免疫-PCR(immuno-PCR) 它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原，尤其適用于極微量抗原的檢測。是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統。主要步驟有三個:①抗原-抗體反應，②與嵌合連接分子結合，③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA)。?
PCR的定義和歷史
聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，
多重PCR技術的定義特點及用途介紹
1.概述：多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合PCR，它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的PCR反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同。? ? ? ?2.特點:? ? ①高效性，在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物，或
兼并引物PCR技術的定義
1.概述：兼并引物是指代表編碼單個氨基酸所有不同堿基可能性的不同序列的混合物。兼并度越低，產物特異性越強。2.設計引物原則：盡量選擇兼并性小的氨基酸，并避免引物3’末端兼并，因為3'端最后3個堿基的退火足以在錯誤位點起始PCR；次黃嘌呤可以同所有的堿基配對，降低引物的退火溫度。
RTPCR技術的定義
RT-PCR，反轉錄·聚合酶鏈反應（reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）是將RNA的反轉錄（reverse transcription ）和cDNA的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結合的技術。
不對稱轉錄的定義
不對稱轉錄有兩重含義:一是指雙鏈DNA只有一股單鏈用作模板,二是指同一單鏈上可以交錯出現模板鏈和編碼鏈。不對稱轉錄RNA轉錄時,一個轉錄子內是只轉錄一條鏈的DNA上的信息,表現為不對稱轉錄。而DNA上遺傳信息以基因為單位(真核),可以在不同的單鏈上。RNA在轉錄后,加工編輯的過程中,有些情況下會把不
多重PCR的定義和特點
1.概述：多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合 ，它是在同一 反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的 反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般 相同。2.特點:①高效性，在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物，或對有多個型別的目的基因進行分型，特別是
不對稱標記的定義
中文名稱不對稱標記英文名稱asymmetric labeling定 義(1)對分子中具有手性(不對稱性)結構部分的標記。(2)對核酸(DNA、RNA)互補雙鏈中一條單鏈的選擇性標記。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
甲基化特異PCR技術的定義及特點介紹
甲基化特異PCR是用對苯二酚和亞硫酸氫鈉處理氫氧化鈉變性的基因組DNA，使得未甲基化的C轉化為T。按照C轉換T后的基因序列設計出來的引物擴出目的基因。由于甲基化CpG島中的C不能被轉化為T，用以上的引物將不會擴出目的基因。通過上述手段就能達到識別基因組DNA甲基化與否的目的。
PCR技術（十一）：PCR片段拼接的SOE和SDL方法
PCR技術（多聚酶鏈式反應）是現代分子生物學的一個巨大突破，它能在體外迅速、 大量、靈敏地擴增基因片段。可是，經PCR技術擴增的大量相關基因片段如何能有效 拼接，卻是一個很值行探討的問題。傳統的方法是引入限制性內切酶位點，這不但操 作繁雜，而有時為了構建限性位點還會影響解讀三聯密碼的正確性。本介紹兩
什么是不對稱PCR？
不對稱PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一對引物，PCR擴增后產生大量的單鏈DNA(SSDNA)。這對引物分別稱為非限制引物與限制性引物，其比例一般為50——100:1。在PCR反應的最初10——15個循環中，其擴增產物主要是雙鏈DNA，但當限制性引物(低濃度引物)消耗完后，非限制性
巢式PCR(Nested－PCR)定義、原理和步驟
巢式PCR的定義巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(PCR)，使用兩對（而非一對）PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通 PCR相似。第二對引物稱為巢式引物（因為他們在第一次PCR擴增片段的內部）結合在第一次PCR產物內部，使得第二次PCR擴增片斷短于第一次擴增。巢 式PCR的好處
逆轉錄－PCR的定義和主要影響因素介紹
逆轉錄 PCR（Reverse TranscriptionPCR, RT-PCR）是一種以 RNA 為樣本，RNA鏈被逆轉錄成為互補 DNA（cDNA），再以此為模板通過 PCR 進行 DNA 擴增。在實際應用中，RT-PCR 分為一步法 RT-PCR 和兩步法 RT-PCR。整個反轉錄實驗過程有三
熒光定量PCR技術的檢測原理和方法
1.SYBRGreenⅠ法：在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖PCR產物熔解曲線圖（單一峰圖表明P
RTPCR的定義與檢測方法
1.定義：是以RNA為模板，聯合逆轉錄反應（reverse transcription，RT）與PCR，可用于檢測單個細胞或少數細胞中少于10個拷貝的RNA模板。?RNA擴增包括兩個步驟： 在單引物的介導下和逆轉錄酶的催化下，合成RNA的互補cDNA；加熱后cDNA與RNA鏈解離，然后與另一引物退火
重組PCR的定義和基本原理
1.定義：使兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年報道了由PCR擴增的兩個DNA片段通過重組合后再經延伸而制備出新的DNA分子。2.其基本原理：將突變堿基，插入或缺失片段，或一種物質的幾個基因片段均設計在引物中，先分段對模
原位PCR定義
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術，就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR既能分辨鑒定帶有靶序列的細胞，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾
什么是RTPCR，RTPCR的定義與檢測方法？
1.定義：是以RNA為模板，聯合逆轉錄反應（reverse transcription，RT）與PCR，可用于檢測單個細胞或少數細胞中少于10個拷貝的RNA模板。?RNA擴增包括兩個步驟： 在單引物的介導下和逆轉錄酶的催化下，合成RNA的互補cDNA；加熱后cDNA與RNA鏈解離，然后與另一引物退火
比色法的定義和常用方法介紹
定義 以生成有色化合物的 顯色反應為基礎，通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。比色法作為一種 定量分析的方法，開始于19世紀30～40年代。 比色分析對 顯色反應的基本要求是：反應應具有較高的 靈敏度和選擇性，反應生成的有色化合物的組成恒定且較穩定，它和 顯色劑的顏色差
PCR技術（十）：PCR產物克隆方法
平端連接 通常情況下，PCR產物可直接與平端載體DNA進行連接，但其連接效 率效低。因為TaqDNA聚合酶具有非模板依賴性末端轉移酶活性，能 在兩6條DNA鏈的3'末端加上一個多余的堿基，使合成的PCR產物成為 3'突出一個堿基的DNA分子。這種DNA分子的連接效率很低。由于PCR
篩選的定義和方法
篩選是利用篩子使物料中小于篩孔的細粒物料透過篩面，而大于篩孔的粗粒物料滯留在篩面上，從而完成粗、細料分離的過程。該分離過程可看作是物料分層和細粒透篩兩個階段組成的。物料分層是完成分離的條件，細粒適篩是分離的目的。
雜交的定義和技術應用
雜交（hybridization；cross；crossing）定義：兩條單鏈DNA或RNA的堿基配對。遺傳學中經典的也是常用的實驗方法。通過不同的基因型的個體之間的交配而取得某些雙親基因重新組合的個體的方法。一般情況下，把通過生殖細胞相互融合而達到這一目的過程稱為雜交；而把由體細胞相互融合達到這一
利用PCR技術進行產前診斷的方法和途徑
1.產前基因診斷胎兒標本的來源?由于PCR技術本身的特點,即可不短時間內將微量的DNA擴增數百萬倍,因此它適 應于各種來源的DNA標本.?(1)羊水穿刺,在如15周后可經母親脆壁穿刺獲羊水,其內含有大量的胎兒脫細 胞5-10ml羊水即可獲得足夠量的PCR分析DNA樣品.?(2)絨毛采樣,在如早期(9