RNA印跡法的概念
中文名稱RNA 印跡法英文名稱Northern blotting定 義將電泳分離的RNA從凝膠中轉移到纖維素膜或尼龍膜上,用32P標記的RNA或DNA雜交進行檢測的方法。主要用于檢測目的基因的轉錄水平。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)......閱讀全文
RNA衣殼化的概念
中文名稱RNA衣殼化英文名稱RNA encapsidation定 義RNA被蛋白質衣殼包裹生成RNA病毒的過程。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA干擾現象的概念
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。
菌落印跡法的技術用途
中文名稱菌落印跡法英文名稱colony blotting定 義將固體培養平板上的菌落吸印轉移到濾膜上的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
配體印跡法的技術用途
中文名稱配體印跡法英文名稱ligand blotting定 義受體或配體經電泳或層析等方法分離后,轉移到適宜的薄膜上,再與相應的配體或受體結合,是檢測配體與受體相互作用的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
免疫印跡法的階段
免疫印跡法分三個階段進行.第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶陰電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳動速度就越快.此階段分離效果肉眼不可見(只有在染色后才顯出電泳區帶).第二階段為電轉移:將在凝膠中已經分離的條帶轉移至硝酸纖維素
DNA-印跡法的技術特點
中文名稱DNA 印跡法英文名稱Southern blotting定 義DNA經酶切和凝膠電泳分離后轉移至尼龍膜或硝酸纖維素薄膜上,用探針進行雜交后分析目的DNA片段的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
DNA印跡法的技術原理
這種方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA轉移的方式和復印的過程一樣,比較準確地保持了特異DNA順序在電泳圖譜中的位置,也可將變性的凝膠負壓干燥后與特定的DNA探針進行原位雜交。它把電泳分離和雜交結合起來,不但能檢測出特異的DNA序列片段,而且能進行定位和測定分子量。即先以電泳
DNA印跡法的實驗步驟
注意注意,操作戴手套。凝膠處理1)凝膠照相后切去包括標記帶在內的多余部分。將凝膠的一角(·點第一個樣品的一側)切去作為標記 以便于定位。精確測量凝膠大小然后將凝膠放入一個方形瓷盤中 。2)變性:將凝膠浸泡于適量的堿變性液中,室溫下變性30分鐘。期間更換變性液一次,不斷地輕輕搖動。如果先進行酸變性酸變
Western印跡法檢測蛋白
實驗概要Western印跡法檢測蛋白的敏感性約為1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一個孔可上總蛋白量約為100μg,所以只要被檢蛋白不低于總蛋白量的萬分之一,即可被檢測出來。如果所分析的樣品為未知時,應同時作陽性對照。雜交技術主要有NC膜的封閉,靶蛋白與第一抗體的反應,結合靶蛋白的一抗
Western印跡法檢測蛋白
實驗概要Western印跡法檢測蛋白的敏感性約為1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一個孔可上總蛋白量約為100μg,所以只要被檢蛋白不低于總蛋白量的萬分之一,即可被檢測出來。如果所分析的樣品為未知時,應同時作陽性對照。雜交技術主要有NC膜的封閉,靶蛋白與第一抗體的反應,結合靶蛋白的一抗
免疫印跡法過程
免疫印跡法 是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 1、SDS-PAGE試劑:見電泳實驗。2、勻漿緩沖液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巰基乙醇 0
RNA的Nouthern印跡和狹線雜交分析實驗
Northern blot 是研究基因表達的最嚴謹的方法之一,可以定量分析組織中某一特異 mRNA 的表達豐度,根據其遷移位置也可以判斷基因表達轉錄物的大小。該技術應用十分廣泛,常用于分析 RNA 樣品中特定 mRNA 的大小和豐度,也可用于基因表達調控、基因結構及功能、遺傳變異等研究。實驗材料RN
RNA的Nouthern印跡和狹線雜交分析實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 DEPCMOPS甲醛瓊脂糖乙酸銨NaOHNaClTris·Cl磷酸鈉溴化乙錠SDS儀器、耗材 離心機電泳儀培養箱紫外線透照儀雜交爐實驗步驟 1. ?用72 ml 水溶解1 g 瓊脂糖,在水浴中冷至60℃時,移至通風櫥中加入10×MOPS電泳緩沖液和18 ml 12.3
RNA的Nouthern印跡和狹線雜交分析實驗
甲醛-瓊脂糖凝膠電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試劑、試劑盒
液相色譜儀液體樣品預處理技術分子印跡法概念及作用
分子印跡屬于超分子研究范疇。它是指制備對某一特定分子(模板分子或印跡分子)具有選擇性的聚合物的過程。通常可描述為制造識別“分子鑰匙”的人工“鎖”技術。如在非共價型印跡中以感興趣的目標分子充當模板,該分子通過氫鍵、靜電作用、疏水作用等非共價鍵作用,對可聚合的功能單體進行組裝,加入交聯劑聚合,然后除去印
胞質小RNA的概念
中文名稱胞質小RNA英文名稱small cytoplasmic RNA;scRNA定 義細胞質中的小分子RNA。通常指轉移核糖核酸(tRNA)和小的核糖體RNA(rRNA),如5S rRNA、5.8S rRNA等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA復制的概念和特點
RNA復制是以RNA為模板合成RNA的過程,是除了逆轉錄病毒以外的其他RNA病毒的復制方式。有些生物,像某些病毒的遺傳信息貯存在RNA分子中,當它們進入宿主細胞后,靠復制而傳代,當它們以RNA模板時,在RNA復制酶作用下,按5'→3'方向合成互補的RNA分子,但RNA復制酶中缺乏校正
RNA穩定性的概念
中文名稱RNA穩定性英文名稱RNA stability定 義在改變細胞環境情況下,或當分離、純化、保存,以及進行物理和化學操作時,RNA分子保留其原結構狀態和抗拒降解的程度。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA輸出的概念和功能
中文名稱RNA輸出英文名稱RNA export定 義真核生物RNA從細胞核輸送到細胞質的過程。游離RNA及其前體是不能直接通過核孔的,需要與許多RNA結合蛋白生成核糖核蛋白復合體,才能輸出到細胞質行使功能。不同種類RNA需要不同的結合蛋白。核內的信使核糖核酸在切除內含子后才能輸出。應用學科生物化學
Small-interfering-RNA(siRNA)的概念
Small interfering RNA(siRNA):是一種小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成員,激發與之互補的目標mRNA的沉默。
RNA探針的概念和分類
RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。
RNA靶向的基本概念
中文名稱RNA靶向英文名稱RNA targeting定 義(1)針對RNA分子設計的一種定向作用技術。包括一些小分子化合物(如抗生素)、反義核酸、反式作用核酶、適配體、干擾小RNA等的應用。(2)由于RNA分子本身具有較大的柔性,能專一地與RNA、DNA和蛋白質相互作用,而成為一種特異的靶向試劑。
RNA運輸的基本概念
中文名稱RNA運輸英文名稱RNA trafficking定 義將RNA引導到細胞的特定區域。細胞內的RNA運輸對細胞的生理功能至關重要。核內RNA運輸影響RNA的加工成熟和核輸出;胞質RNA運輸影響RNA的定位、運輸和基因表達的水平。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA轉運的基本概念
中文名稱RNA轉運英文名稱RNA transport定 義RNA分子從一個細胞區室或區域移動到另一個細胞區室或區域的過程。各類不同RNA(如信使RNA、核小RNA、核糖體RNA和轉移RNA)的轉運遵循不同的機制。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA輸出的基本概念
中文名稱RNA輸出英文名稱RNA export定 義真核生物RNA從細胞核輸送到細胞質的過程。游離RNA及其前體是不能直接通過核孔的,需要與許多RNA結合蛋白生成核糖核蛋白復合體,才能輸出到細胞質行使功能。不同種類RNA需要不同的結合蛋白。核內的信使核糖核酸在切除內含子后才能輸出。應用學科生物化學
反義RNA的概念和分類
反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導致的疾病和嚴重感染性疾病。根據反義RNA的作用機制可將其分為3類:Ⅰ類反義RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分編碼區,直接抑制翻譯,
RNA轉染的基本概念
中文名稱RNA轉染英文名稱RNA transfection定 義將RNA分子導入細胞的過程。可用以研究RNA的功能。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
微RNA的基本概念
微RNA(microRNAs;miRNA,又譯小分子RNA)是真核生物中廣泛存在的一種長約21到23個核苷酸的RNA分子,可調節其他基因的表達。miRNA來自一些從DNA轉錄而來,但無法進一步轉譯成蛋白質的RNA(屬于非編碼RNA)。miRNA通過與靶信使核糖核酸(mRNA)特異結合,從而抑制轉錄后
微小RNA的概念和作用
微小RNA(miRNA)是小RNA,通常與后生生物mRNA中的序列部分互補。 miRNA與mRNA的結合可以抑制該mRNA的翻譯并加速poly(A)尾部去除,從而加速mRNA降解。
RNA病毒的基本概念
RNA病毒是病毒的一種,屬于一級。 它們的遺傳物質是核糖核酸(RNA ribonucleic acid)。通常其核酸是單鏈的(ssRNA single-stranded RNA),也有雙鏈的(dsRNA double-stranded RNA).單鏈RNA病毒根據他們的翻譯意義可分為正譯、負譯和雙譯