RNA印跡法的概念
中文名稱RNA 印跡法英文名稱Northern blotting定 義將電泳分離的RNA從凝膠中轉移到纖維素膜或尼龍膜上,用32P標記的RNA或DNA雜交進行檢測的方法。主要用于檢測目的基因的轉錄水平。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)......閱讀全文
RNA-印跡法的概念
中文名稱RNA 印跡法英文名稱Northern blotting定 義將電泳分離的RNA從凝膠中轉移到纖維素膜或尼龍膜上,用32P標記的RNA或DNA雜交進行檢測的方法。主要用于檢測目的基因的轉錄水平。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
DNA-印跡法的概念
中文名稱DNA 印跡法英文名稱Southern blotting定 義DNA經酶切和凝膠電泳分離后轉移至尼龍膜或硝酸纖維素薄膜上,用探針進行雜交后分析目的DNA片段的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
RNA印跡法的原理和應用
中文名稱RNA印跡法英文名稱Northern blotting定 義RNA從電泳凝膠轉移到固相介質(如尼龍膜等)上,然后與互補的核苷酸序列雜交的操作過程。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
RNA樣品的轉膜(虹吸印跡法)
實驗概要本實驗介紹了RNA樣品的轉膜(即虹吸印跡法)的操作步驟等。主要試劑1. 20×SSC:175.3g NaCl,88.2g檸檬酸鈉,DEPC水定容1000ml ???????????????????? NaOH調pH至7.0,高壓后備用。 2. 6×SSC:用20×SSC稀釋。主要設備1. 紫
蛋白質印跡法的概念
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾弗雷德里
免疫印跡法的概念和起源
免疫印跡法 (Western blotting) 是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。?免疫印跡法(imm
RNA足跡法的基本概念
中文名稱RNA足跡法英文名稱RNA footprinting定 義分析RNA鏈與其他分子特異結合部位的方法。將標記的RNA與待研究的物質(如某種蛋白質或藥物)進行結合反應后,用RNA酶清除未被結合的部分,再用電泳顯示RNA鏈上結合位置的多寡和長度。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二
蛋白質印跡法的概念和原理
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。
RNA蛋白質印跡法的技術應用
中文名稱RNA-蛋白質印跡法英文名稱Northwestern blotting定 義將經過電泳分離的蛋白質轉移到膜上再與某種特異的RNA探針雜交,是研究蛋白質與RNA特異結合的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
RNA印跡雜交
RNA印跡雜交1)???????Northern印跡的制備預備:1.按下述步驟,每泳道加10~20μg總RNA或0.5~1μg poly(A)+RNA進行甲醛/瓊脂糖凝膠電泳,將凝膠放在紫外線透照儀上,旁邊置一標尺進行拍照。a.?總RNA(10~20μg)用下列溶液在65℃溫育5min:總RNA(1
RNA印跡(Northern-Blot)
【實驗原理】將RNA變性及電泳分離后,轉移到固相支持物上,用于與DNA探針雜交以鑒定其中特定 RNA分子的大小與含量。基本原理與Southern印跡相同,但RNA變性方法與DNA不同,不能用堿變性,因為堿會導致RNA的水解。Northern印跡主要用于組織細胞靶基因表達水平的研究以及對同一組織細胞的
Southern-印跡實驗——印跡法
Southern印跡法是將DNA片段從電泳凝膠中轉移至膜支持物上,使DNA片段固定,因此該膜半永久性地重現出凝膠電泳的帶型。實驗方法原理本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設計的,稍作修改后同樣可用于硝酸纖維素膜方法。實驗材料DNA試劑、試劑盒HClNaClTrisNaOH
Northern印跡和總RNA雜交實驗——Northern印跡分析
試劑、試劑盒甲醛凝膠溶液RNA 電泳緩沖液儀器、耗材凝膠模梳齒凝膠用具實驗步驟1. 用肥皂和水徹底清洗凝膠模,梳齒和凝膠用具。2. 準備甲醛凝膠溶液。甲醛凝膠溶液(300 ml 1% 瓊脂糖凝膠):瓊脂糖,3.0 g10x RNA 電泳緩沖液,30 ml? ???Milli-Q 或用玻璃器皿蒸餾過的
Western印跡法
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體,并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體,它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器:高壓鍋、玻璃勻漿
DNA印跡法的定義
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離,使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性(使雙鏈DNA變成單鏈),通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用,將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾膜或
免疫印跡法
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
RNA解旋酶的概念
RNA解旋酶(RNA helicases)是一個包含了與RNA代謝(從翻譯起始、核糖體形成、前mRNA拼接和mRNA降解)的許多方面有關的蛋白質家族。
微RNA的概念
微RNA(microRNAs;miRNA,又譯小分子RNA)是真核生物中廣泛存在的一種長約21到23個核苷酸的RNA分子,可調節其他基因的表達。miRNA來自一些從DNA轉錄而來,但無法進一步轉譯成蛋白質的RNA(屬于非編碼RNA)。miRNA通過與靶信使核糖核酸(mRNA)特異結合,從而抑制轉錄后
RNA干擾的概念
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DNA修
核RNA的概念
中文名稱核RNA英文名稱nuclear RNA定 義細胞核內的RNA。如核內不均一RNA、核小RNA、核仁小RNA等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA干擾的概念
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DNA修
間隔RNA的概念
中文名稱間隔RNA英文名稱spacer RNA定 義初級轉錄物中由基因間序列編碼產生的RNA序列。如哺乳動物核糖體核糖核酸(rRNA)的初級轉錄物位于18S rRNA和28S rRNA間的一段序列,這些序列不出現在成熟的rRNA中。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA探針的概念
RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。
RNA轉運的概念
中文名稱RNA轉運英文名稱RNA transport定 義RNA分子從一個細胞區室或區域移動到另一個細胞區室或區域的過程。各類不同RNA(如信使RNA、核小RNA、核糖體RNA和轉移RNA)的轉運遵循不同的機制。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA-沉默的概念
RNA 沉默(RNA silencing)或基因沉默(gene silencing)是廣泛存在于植物、動物、線蟲和真菌等真核生中的一種高度保守的、序列特異的 RNA 降解機制. RNA 沉默對于調控發育、維持基因組的穩定性以響應生物和非生物脅迫等具有重要作用.
Northern印跡和總RNA雜交實驗
Northern印跡分析雜交和放射自顯影試劑、試劑盒甲醛凝膠溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?RNA 電泳緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
Northern印跡和總RNA雜交實驗
試劑、試劑盒 甲醛凝膠溶液RNA 電泳緩沖液儀器、耗材 凝膠模梳齒凝膠用具實驗步驟 1. 用肥皂和水徹底清洗凝膠模,梳齒和凝膠用具。2. 準備甲醛凝膠溶液。甲醛凝膠溶液(300 ml 1% 瓊脂糖凝膠):瓊脂糖,3.0 g10x RNA 電泳緩沖液,30 ml ? ??Milli-Q 或用玻璃器皿蒸
Northern印跡和總RNA雜交實驗
Northern印跡分析 雜交和放射自顯影 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甲醛凝膠溶液 RNA 電泳緩沖液
southern印跡雜交的基本概念
Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則特異性地雜交形成雙鏈。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經干
DNA-印跡法的技術特點
中文名稱DNA 印跡法英文名稱Southern blotting定 義DNA經酶切和凝膠電泳分離后轉移至尼龍膜或硝酸纖維素薄膜上,用探針進行雜交后分析目的DNA片段的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)