關于單克隆抗體技術的細胞融合的介紹
首先制備細胞培養基、 氨基喋呤（A）貯存液、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷（HT）貯存液等各種細胞生長所需的營養物質。然后制備髓瘤細胞和脾淋巴細胞，之后進行細胞融合。在細胞融合后選擇性培養過程中，由于大量骨髓瘤細胞和脾細胞相繼死亡，此時單個或少數分散的雜交瘤細胞多半不易存活，通常必須加入其他活細胞使之繁殖，這 種被加入的活細胞稱為飼養細胞。飼養細胞促進其他細胞增殖的機制尚不明了，一般認為它們可能釋放非種屬特異性的生長刺激因子，為雜交瘤細胞提供必要的生長 條件；也可能是為了滿足新生雜交瘤細胞對細胞密度的依賴性。......閱讀全文
關于單克隆抗體技術的細胞融合的介紹
首先制備細胞培養基、 氨基喋呤（A）貯存液、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷（HT）貯存液等各種細胞生長所需的營養物質。然后制備髓瘤細胞和脾淋巴細胞，之后進行細胞融合。在細胞融合后選擇性培養過程中，由于大量骨髓瘤細胞和脾細胞相繼死亡，此時單個或少數分散的雜交瘤細胞多半不易存活，通常必須加入其他活細胞使之繁
關于單克隆抗體細胞融合的過程介紹
融合的方法很多，常用的有轉動法和離心法。融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例為1:1至10:1不等。3:1或5:1最為常用。 1．試劑與材料 (1)供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。 (2)1640培養液100ml。 (3)完全1640液100ml。 (4)2.5%FCS－1640液50ml。
單克隆抗體技術：細胞融合
實驗概要本文介紹了單克隆抗體技術——細胞融合實驗的操作流程。實驗原理細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳
單克隆抗體技術：細胞融合
實驗概要本文介紹了單克隆抗體技術——細胞融合實驗的操作流程。實驗原理細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳
單克隆抗體技術：細胞融合
融合劑?細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。?聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機溶劑，對熱穩定，與
單克隆抗體技術：細胞融合
實驗概要本文介紹了單克隆抗體技術——細胞融合實驗的操作流程。實驗原理細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳
單克隆抗體的細胞融合關鍵介紹
1．技術上的誤差常常導致融合的失敗。例如，供者淋巴細胞沒有查到免疫應答。這必然要失敗的。2．融合試驗最大的失敗原因是污染，融合成功的關鍵是提供一個無毒無菌的操作環境。
單克隆抗體的細胞融合
融合劑 細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如滅活的仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機溶劑，對熱穩定
單克隆抗體的細胞融合
融合劑 細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如滅活的仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機溶劑，對熱穩定
關于細胞融合技術的意義價值介紹
細胞融合不僅可用于基礎研究，而且還有重要的應用價值，在植物育種方面已經成功的有蘿卜+甘藍、粉藍煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等。細胞融合另一個重要應用就是制備單克隆抗體。單克隆抗體可以用作診斷試劑，治療疾病和運載藥物，具有準確，高效，簡易，快速等優點。 ⒈理論上說任何細胞，都有可能通過體細胞雜
關于單克隆抗體技術的介紹
一種免疫學技術，將產生抗體的單個B淋巴細胞同骨髓腫瘤細胞進行細胞融合， 獲得既能產生抗體， 又能無限增殖的雜種細胞，并以此生產抗體。是僅由一種類型的細胞制造出來的抗體，對應于多克隆抗體、多株抗體——由多種類型的細胞制造出來的一種抗體。 單克隆抗體技術(monoclonal antibody t
單克隆抗體細胞融合的融合劑的介紹
細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如滅活的仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機溶劑，對熱穩定，與許多化
單克隆抗體技術的方法細胞融合操作過程
首先制備細胞培養基、 氨基喋呤(A)貯存液、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷(HT)貯存液等各種細胞生長所需的營養物質。然后制備髓瘤細胞和脾淋巴細胞,之后進行細胞融合。在細胞融合后選擇性培養過程中,由于大量骨髓瘤細胞和脾細胞相繼死亡,此時單個或少數分散的雜交瘤細胞多半不易存活,通常必須加入其他活細胞使之繁殖,
單克隆抗體細胞融合
單克隆抗體細胞融合（一）融合劑?細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機
關于單克隆抗體技術的細胞篩選的介紹
雜交瘤細胞在融合后2周左右即可篩選，即把分泌所需抗體的雜交瘤孔從眾多的孔中選出來，通常也稱為抗體檢測。抗體檢測的方法很多，通常根據所研究的抗原和 實驗室的條件而定。但作為雜交瘤篩選的抗體檢測方法必須具有快速、準備、簡便，便于一次處理大量樣品等特點。因為往往有幾百個樣品需要在短短幾個小時就報 告結
關于細胞融合的基本介紹
細胞融合(cell fusion)，細胞遺傳學名詞，是在自發或人工誘導下，兩個細胞或原生質體融合形成一個雜種細胞。基本過程包括細胞融合形成異核體(heterokaryon)、異核體通過細胞有絲分裂進行核融合、最終形成單核的雜種細胞。細胞融合可作為一種實驗方法被廣泛適用于單克隆抗體的制備，膜蛋白的
關于細胞融合的方法介紹
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并，稱自發融合；異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合，稱誘發融合。 一、仙臺病毒法融合 ①兩種細胞在一起培養，加入病毒，在4℃條件下病毒附著在細胞 膜上。并使兩細胞相互凝聚； ②在37℃中，病毒與細胞膜發生反應，細胞膜受到破環，此時需 要Ca2+
關于細胞融合的過程介紹
細胞膜有內外兩層，細胞融合首先發生在外層，然后再到內層，由此就出現了兩種融合通道，細胞體內物質通過這兩種通道轉移。病毒膜與目標細胞融合時，只出現一種融合通道，即導致融合的基因只能在病毒中找到，而在目標細胞中卻找不到。但是，通過EFF-1發生的細胞融合則是一個雙向融合過程，需要EFF-1出現在兩個
單克隆抗體的細胞融合(cell－fusion)過程
融合的方法很多，常用的有轉動法和離心法。?融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例為1:1至10:1不等。3:1或5:1最為常用。?1．試劑與材料?(1) 供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。?(2) 1640培養液100ml。?(3) 完全1640液100ml。?(4) 2.5％FCS－1640液50ml。?(5
單克隆抗體細胞融合劑
細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機溶劑，對熱穩定，與許
細胞融合技術的融合方法介紹
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并，稱自發融合；異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合，稱誘發融合。仙臺病毒法融合①兩種細胞在一起培養，加入病毒，在4℃條件下病毒附著在細胞膜上。并使兩細胞相互凝聚；②在37℃中，病毒與細胞膜發生反應，細胞膜受到破環，此時需要Ca2+和Mg2+，最適PH為8.0
細胞融合技術的誘導物介紹
細胞融合的誘導物種類很多．常用的主要有生物法用滅活的仙臺病毒(Sendai virus），化學法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG）和物理法如電脈沖，振動、離心、電激。目前應用最廣泛的是聚乙二醇，因為它易得、簡便，且融合效果穩定。PEG的促融機制尚不完全清楚，它可能引起細胞膜
關于單克隆抗體技術的重要意義介紹
單克隆抗體（monoclonal antibody，Mab）技術是20世紀免疫學技術的一項里程碑式突破。該技術將免疫小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合生成雜交瘤細胞，這種雜交瘤細胞核內含有雙親細胞的染色體，繼承了親代細胞的特征。它既具有瘤細胞在體外培養中迅速增殖的能力，又具備免疫脾細胞合成和分
單克隆抗體技術的介紹
單克隆抗體技術(monoclonal antibody technique) 1975年英國科學家Milstein和Kohler所發明，并獲得1984年諾貝爾醫學獎。 1984 德國人G. J. F.Kohler、阿根廷人C. Milstein[3]和丹麥科學家N. K. Jerne由于發展了單
關于細胞融合技術的歷史發展簡介
19世紀30年代，科學家們相繼在肺結核，天花，水痘，麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細胞。 19世紀70年代，科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象，但是當時科學發展水平的限制，沒有給予足夠重視。 1962年，日本科學家發現日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤細胞融合的現象。 1965
關于細胞融合的應用價值介紹
細胞融合不僅可用于基礎研究，而且還有重要的應用價值，在植物育種方面已經成功的有蘿卜+甘藍、粉藍煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等。細胞融合另一個重要應用就是制備單克隆抗體。單克隆抗體可以用作診斷試劑，治療疾病和運載藥物，具有準確，高效，簡易，快速等優點。
關于細胞融合實驗的步驟介紹
1. DMEM或1640基礎培養基、PEG溶液置于37℃水浴中預溫； 2. 將Balb/c小鼠摘眼球處死后，浸入75%灑精； 3. 無菌取免疫小鼠的脾臟； 4. 脾臟用PBS洗滌后，放入無菌過濾的網篩，再把網篩放在盛有完全培養基的玻璃平皿中用研磨棒（或注射器針管）輕輕研磨或擠壓，使其通過網
關于細胞融合的發展簡史介紹
19世紀30年代，科學家們相繼在肺結核，天花，水痘，麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細胞。 19世紀70年代，科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象，但是當時科學發展水平的限制，沒有給予足夠重視。 1962年，日本科學家發現日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤細胞融合的現象。 1965
關于細胞融合的誘導物的介紹
細胞融合的誘導物種類很多．常用的主要有生物法用滅活的仙臺病毒(Sendai virus），化學法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG）和物理法如電脈沖，振動、離心、電激。目前應用最廣泛的是聚乙二醇，因為它易得、簡便，且融合效果穩定。PEG的促融機制尚不完全清楚，它可能引起細
細胞融合技術的基本內容介紹
有性繁殖時發生的精卵結合是正常的細胞融合，即由兩個配子融合形成一個新的二倍體。而細胞融合為在自然條件下或用人工方法（生物的、物理的、化學的）使兩個或兩個以上的細胞合并形成一個細胞的過程。其中人工誘導的細胞融合，在六十年代作為一門新興技術而發展起來。由于它不僅能產生同種細胞融合，也能產生種間細胞的