• <option id="immmk"></option>
  • <noscript id="immmk"><kbd id="immmk"></kbd></noscript>
    發布時間:2022-10-11 17:42 原文鏈接: 關于細胞融合的方法介紹

      同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并,稱自發融合;異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合,稱誘發融合。

      一、仙臺病毒法融合

      ①兩種細胞在一起培養,加入病毒,在4℃條件下病毒附著在細胞

      膜上。并使兩細胞相互凝聚;

      ②在37℃中,病毒與細胞膜發生反應,細胞膜受到破環,此時需

      要Ca2+和Mg2+,最適PH為8.0一8.2;

      ③細胞膜連接部穿通,周邊連接部修復,此時需Ca2+和ATP;

      ④融合成巨大細胞,仍需ATP。

      二、聚乙二醇(PEG)法

      聚乙二醇(PEG)結構為:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子量大于200小于6000者均可用作細胞融合劑。PEG經高壓滅菌后,與溫熱的Engle氏液混合。一般選用分子量為4,000,常用濃度為50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3調整),分子量小的PEG,融合效應差,又有毒性,分子量過大,則粘性太大,不易操作。

      三、電融合法

      在直流電脈沖的誘導下,細胞膜表面的氧化還原電位發生改變,使異種細胞粘合并發生質膜瞬間破裂,進而質膜開始連接,直到閉和成完整的膜,形成融合體。

      優點:融合率高、重復性強、對細胞傷害小;

      裝置精巧、方法簡單、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過程;

      免去PEG誘導后的洗滌過程、誘導過程可控性強。

      四、離心振動

      物理方法之一,使用離心機等機器實現細胞之間的融合。

  • <option id="immmk"></option>
  • <noscript id="immmk"><kbd id="immmk"></kbd></noscript>
    伊人久久大香线蕉综合影院首页