什么是PCR檢測？
PCR（聚合酶鏈反應）：類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。基本原理：PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性主要依賴于和靶序列兩端互補的寡核苷酸引物，它由變性——復性——延伸三個基本反應步驟構成。所需材料：模板DNA正二價鎂離子引物反應緩沖液TAQDNA聚合酶拓展回答：反應特點特異性強。PCR反應的特異性決定因素為：①引物與模板DNA特異正確的結合。②堿基配對原則。③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性。④靶基因的特異性與保守性。靈敏度高。PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12）量級的起始待測模板擴增到微克（μg=-6）水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位）；在細菌學中最小檢出率為3個細菌。簡便、快速。PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和......閱讀全文
PCR檢測方法
PCR反應的zui大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。污染原因一、標本間交叉污染：標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染
PCR產物的檢測PCRELISA法
在一個引物的5’端標記上生物素以便使其能與包被板上的親合素結合而固定PCR產物，而在另一引物的5’端標記FITC，用HRP標記的抗FITC抗體與之結合顯色，即可進行常規ELISA檢測。如設立標準對照，此技術還可用于定量分析。 【試劑與配置】 包被液：4.3mmol/L Na2HPO4,
什么叫pcr檢測
聚合酶鏈反應（PCR）的基本原理是一種酶促合成反應。即在模板DNA、引物和脫氧核糖核苷酸存在下，在DNA聚合酶的作用下，使DNA鏈擴增延伸。試驗先通過加熱變性，使DNA雙螺旋的氫鏈斷裂，解離成單鏈DNA；然后通過退火，突然降溫使引物與其互補的模板在局部形成雜交鏈；然后再在DNA聚合酶、脫氧核糖核苷三
什么是PCR檢測
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一
什么是PCR檢測
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一
什么是PCR檢測？
PCR（聚合酶鏈反應）：類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。基本原理：PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性主要依賴于和靶序列兩端互補的寡核苷酸引物，它由變性——復性——延伸三個基本反應步驟構成。所需材料：模板DNA正二價鎂離子引物反應緩沖液T
PCR檢測方法（二）
3.實驗操作注意事項：盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進行擴增反應是謹慎認真，在樣品的收集、抽提和擴增的所有環節都應該注意：（1）戴一次性手套，若不小心濺上反應液，立即更換手套。（2）使用一次性吸頭，嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用，吸頭不
現場PCR檢測方案
春暖花開，萬物復蘇，無論是自然界還是科學界，都在發生著日新月異的變化，近年來醫療診斷及食品安全監測領域的技術創新更是層出不窮，而這一切都離不開分子生物學檢測手段的支持。目前大家對于即時現場檢測的需求也十分多樣化，比如，技術不太熟練的基層人員需要在短時間內能夠得到準確的檢測結果，或是在野外條件下需要攜
多重PCR核酸檢測
2020年3月11日，世衛組織總干事譚德賽在日內瓦召開的新聞發布會上宣布，新冠肺炎（COVID-19）疫情已經構成全球性大流行（pandemic）。截止到目前，中國的疫情在國內聯防聯控機制下已基本得到控制，而國外的情況卻不容樂觀。新冠肺炎疫情爆發于呼吸道疾病高發的季節，有各類呼吸道病原體單一感染或合
PCR檢測方法（一）
PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。污染原因一、標本間交叉污染：標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致
PCR檢測主要優勢？
其實每一種檢測方法都有其擅長的應用場景。以病毒檢測為例，通常的免疫學檢測方法（膠體金、ELISA、化學發光等）的檢測對象是病毒的抗原或抗體，相當于“側面描繪”。由于人體從感染到抗原或抗體可檢測到存在一個時間窗口期，因此免疫學檢測方法一般不合適作為早期診斷。而核酸檢測的檢測對象是病毒的核酸分子，則是“
PCR（RTPCR）反轉錄－定性檢測方法
1、試劑 (1)10倍 RT 緩沖液:500mmol/L Tris·Cl(pH8.0),0.60 mmol/L MgCl2,400mmol/L KCl,10mmol/L DTT。 (2)10倍 PCR 緩沖液:100mmol/L Tris·Cl(pH8.3),500mmol/L kCl,15
免疫PCR(ImmunoPCR)概念、組成和免疫PCR產物的檢測
（一） 免疫PCR技術的概念免疫PCR是一種抗原檢測系統，將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上，再用PCR方法將這段DNA擴增，然后用常規方法檢測PCR產物。免疫PCR集PCR的高靈敏度與抗體和抗原反應的特異性于一體。其突出的特點是指數級的擴增效率帶來了極高的敏感度，能檢出濃度低至2ｎｇ
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀
PCR產物的電泳檢測
PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚致消失。常見問題如下：????一、假陰性，不出現擴增條帶????PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及，?④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。????模板
什么是熒光PCR檢測
熒光定量PCR是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監控反應過程，結合相應的軟件可以對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。原理： PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探
PCR法檢測支原體
實驗方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA鏈擴增延伸。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒dNTPTapDNA聚合酶瓊脂糖礦物油支原體檢測試劑盒儀器、耗材超凈工作臺PCR儀電泳儀凝膠成像分析系統臺式離心機旋渦混懸器實驗步驟1.
弓形體的PCR檢測
弓形體有廣泛的自然疫原性，人體多為隱性感染，抵抗力低時可以有臨床表現。弓形體的診斷較困難，血清學方法敏感性較高但有交叉性出現假陽性而且無法確定近期感染、遠期感染或一過性感染。確診的方法是活組織檢查或動物接各，這些方法陽性率太低不能推廣。PCR檢測可以檢出樣本中1-2個病原體而且準確性高，是目前對
多重PCR法檢測STEC
產志賀毒素大腸桿菌（STEC）具有很強的致病性，全球范圍內由其引發的食物中毒和其他公共衛生事件呈逐年升高之勢，嚴重威脅人類的健康。開發快速可靠的檢測手段對其引發的食源性疾病的監測、控制和預防意義重大。本文結合對STEC分子生物學特征的研究，著重介紹了多重PCR檢測技術在檢測食品中STEC方面的
熒光定量PCR檢測方法
所謂實時熒光定量PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。 檢測方法 1.SYBRGreenⅠ法： 在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發射熒光信
數字PCR檢測技術介紹
數字PCR（Digital PCR-dPCR）技術是一種新的核酸檢測和定量方法，又稱單分子PCR，它的原理是將一個標準PCR反應分配到大量微小的反應器中，在每個反應器中包含或不包含一個或多個拷貝的目標分子( DNA模板) ，實現“單分子模板PCR擴增”。 擴增結束后，通過陽性反應器的數目“數出”目標
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀器設
實時熒光PCR檢測技術
實時熒光PCR檢測技術眾所周知，PCR（聚合酶鏈反應）技術自從1985年問世以來，經過十幾年的發展，已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段，是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法，核酸診斷是分子水平上的診斷技術，可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷，比如，核酸診斷能
伯樂發布實時PCR檢測系統
伯樂 Laboratories 推出了 CFX Opus Deepwell 實時 PCR 檢測系統。?該系統有一個 96 孔模塊，反應體積高達 125 微升。 該系統較深的樣品孔設計用于樣品匯集、某些樣品制備程序或其他特殊方案，例如食品和工業測試，以及需要大量樣品的人類和獸醫病原體檢測。 該系統可以
PCR檢測的那點事兒（一）
聚合酶鏈式反應（PCR技術）又稱無細胞分子克隆法，它的鼎鼎大名在分子生物學領域可謂如雷貫耳，近年來無論是如日中天的精準醫療，還是穩步發展的基因診斷都離不開PCR技術這位“老母親”。對于檢驗檢測行業的小伙伴來說，PCR技術也絕對能夠稱得上是我們的“好幫手”了。尤其是致病菌檢測、動物源性
PCR檢測的質量控制
隨著獸醫防疫工作重要性的逐步提高，PCR檢測技術已被獸醫工作者比較廣泛認可，已經從實驗室研究走進了臨床應用階段。如何提高PCR檢測質量，已成為實驗室技術人員不可回避的一個問題，它直接影響實驗室檢測結果的可信度和獸醫防疫工作質量。PCR檢測質量的控制是一個系統工程，總體上涉及三個方面：一是試驗儀器；二
熒光定量PCR檢測流程
熒光定量PCR檢測一般流程如下圖，選擇檢測靶標基因，進行引物篩選及體系構建，后續進行樣本處理核酸提取，檢測分析結果。? ??
PCR檢測的那點事兒（二）
對于PCR檢測來說，必須有配套的實驗室來進行操作，規范的實驗室是實驗成功的基礎，那么PCR實驗室如何裝修設計？PCR實驗室又有哪些管理要點呢？今天小編就為大家分享這方面的知識。快來看看你的實驗室布局是否合理吧！ 一、PCR實驗室裝修知識 這里著重介紹PCR實驗室裝修的功能區劃分，建
痘苗DNA檢測實驗——PCR－法
除了 PCR 和 Southern 雜交可以檢測病毒 DNA 外，也可以利用 DNA 點跡雜交方法檢測在分離的噬斑中的重組病毒。本實驗主要介紹用這3種方法來檢測痘苗DNA。實驗材料貼壁生長良好的單層 BS-C-1 或 HuTK-143B 細胞重組病毒噬斑懸液試劑、試劑盒PBS胰酶／EDTA干冰／乙醇
PCR檢測的質量控制
隨著獸醫防疫工作重要性的逐步提高，PCR檢測技術已被獸醫工作者比較廣泛認可，已經從實驗室研究走進了臨床應用階段。如何提高PCR檢測質量，已成為實驗室技術人員不可回避的一個問題，它直接影響實驗室檢測結果的可信度和獸醫防疫工作質量。?我們認為，PCR檢測質量的控制是一個系統工程，總體上涉及三個方面：一是