elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再經孵育洗滌后,加底物顯色,底物降解的量,即為欲測抗體的量,其結果可用目測或用分光光度計定量測定操作步驟:1.將抗原按5 μg/ml稀釋于碳酸鹽緩沖液(pH 9.6),100 μl /孔,4℃過夜。2.次日PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。3.加2%BSA封閉室溫1 h,200 μl /孔。4.陽性對照從10ug/ml,做倍必稀釋,待測血清從1:50做倍比稀釋,預試驗后確定稀釋倍數及陽性對照的起始濃度及稀釋數量(以可以做標準曲線為參數),室溫1h。5.PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。6.加入1:3000(不同公司有......閱讀全文
ELISA直接法和間接法優缺點
直接法(direct ELISA)將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。缺點:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。間接法(indirect ELISA)此測定方
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
ELISA測定的常用模式間接法測抗體
基本方法的操作如下: 1.將病原體的抗原在碳酸鹽緩沖液中4~C過夜包被,形成固相抗原,洗滌去除未與固相結合或結合不緊的抗原后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結合的部分及雜質。 2.加入含待測抗體的臨床樣本如血清等,溫育一定時間后洗板;此時,待測抗體就會與固陽上特異抗原反應而
酶聯免疫吸附(ELISA)實驗——間接法(測抗體)
實驗方法原理圖1:間接法測抗體示意圖間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再經孵育洗滌后,加底物顯色,底物降解的量,即為欲測抗體的量,
間接法操作elisa試劑盒的方法介紹
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜; 2、次日洗滌3次; 3、加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌; 4、(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1
檢測elisa試劑盒組成技術原理與間接法
組成結構 1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。 2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。 3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆
ELISA直接法和雙抗體夾心法檢測抗原的區別
不直接標記一抗而標記二抗,這是從生產成本上考慮的。二抗大部分是通用的,標記一次可以大量標記,比如10ml或者更多的濃縮液,可以生產上千上萬的試劑盒。一次檢測就行了而一抗種類很多,量少,如果標記一抗,比較費事。次次得檢測(標記完得檢測)。hrp標記不是很簡單的事科研用的試劑盒。單品銷售量很小的,不值當
ELISA中雙抗體夾心法與間接法的區別在哪
雙抗體夾心法:(1)包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。(2)加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置3
電流表內接法與外接法誤差分析
若待測電阻R的阻值較小,采用外接法測出的阻值較為準確,誤差較小;若待測電阻R阻值較大,采用內接法測出的阻值較為準確。 (1)采用外接法時 電流表中示數應是流過R的電流IR和通過電壓表電流IV之和,即I=IR+IV,則R=U/I=U/(IR+IV) 引起誤差的原因是電流I中增加了
elisa批內和批間差異哪個大
當然是組間差異大啊,組間的溫度,試劑存放時間,標本存放時間,檢測酶標儀狀態都不一樣
ELISA法檢測細胞間黏附分子1
細胞黏附分子(ICAM)是存在于細胞表面的一類具有復雜功能的糖蛋白,介導細胞之間的相互黏附,參與眾多的病理生理過程。目前,研究較多的黏附分子主要有免疫球蛋白超家族、整合素家族、選擇性家族、Cadherin家族等。細胞間黏附分子-1(ICAM-1)是黏附分子免疫球蛋白超家族中的一員,由內皮細胞、淋巴細
鴨生長激素1(GH1)ELISA試劑盒的間接法
鴨生長激素1(GH1)ELISA試劑盒的間接法: 1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。 2.次日洗滌3次。 3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照
兔子視黃醇結合蛋白4ELISA試劑盒的間接法
兔子視黃醇結合蛋白4ELISA試劑盒的間接法:1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。?2.次日洗滌3次。?3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋
定氮儀測定蛋白質是間接法還是直接法?
測定大米等糧食樣品的蛋白質含量,是判斷糧食品質的一個重要方法,現代為了操作方便,并有效提高測定的效率和精度,在很多行業中都是采用定氮儀這種儀器來進行測定。而一般來說,蛋白質測定方法主要可以分為兩類,分別是間接法和直接法,那么使用定氮儀測定蛋白質采用的是間接法還是直接法呢?首先來讓我們看看什么是間接法
電極法測電解質中直接法與間接法的區別
1、ISE的直接法和間接法的區別在于直接法未作稀釋直接測定,間接法預先稀釋后測定,但是兩種方法測定的都是離子活度. 2、比較ISE法與火焰光度法之間是存在偏差的,ISE法偏高,造成這種差異的原因是:火焰法測定的是血漿中的鈉、鉀濃度;而電 極法測定的是血漿或是血清水中的鈉、鉀濃度。電極法摒棄了樣品中
電極法測電解質中直接法與間接法的區別
1、ISE的直接法和間接法的區別在于直接法未作稀釋直接測定,間接法預先稀釋后測定,但是兩種方法測定的都是離子活度.2、比較ISE法與火焰光度法之間是存在偏差的,ISE法偏高,造成這種差異的原因是:火焰法測定的是血漿中的鈉、鉀濃度;而電 極法測定的是血漿或是血清水中的鈉、鉀濃度。電極法摒棄了樣品中
免疫酶標方法(直接法、間接法、PAP法和雙PAP法)
一、直接法1.標本固定。2.PBS洗滌2×3分鐘。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制內源性過氧化物,室溫10~20分鐘。4.正常血清(1:10)孵育,室溫20分鐘。5.滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6.PBS洗滌3×3分鐘。7.DAB+H2O2顯色5~10分鐘,鏡下控制染色結
電極法測電解質中直接法與間接法的區別
1、ISE的直接法和間接法的區別在于直接法未作稀釋直接測定,間接法預先稀釋后測定,但是兩種方法測定的都是離子活度.2、比較ISE法與火焰光度法之間是存在偏差的,ISE法偏高,造成這種差異的原因是:火焰法測定的是血漿中的鈉、鉀濃度;而電 極法測定的是血漿或是血清水中的鈉、鉀濃度。電極法摒棄了樣品中蛋白
接觸器的接法選擇
接法 交流接觸器接法一: 一般三相接觸器一共有8個點.三路輸入.三路輸出.還有是控制點兩個.輸出和輸入是對應的.很容易能看出來.如果要加自鎖的話.則還需要從輸出點的一個端子將線接到控制點上面。 交流接觸器接法二: 首先應該知道交流接觸器的原理.他是用外界電源來加在線圈上.產生電磁場.加電
免疫熒光染色(間接法)
1、切片固定后用毛細滴管吸取經適當稀釋的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的濕度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗兩次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液體。?2、再滴加間接熒光抗體(如兔抗人 -球蛋白熒光抗體等),同上步驟,染色30min,37℃,緩沖鹽水
免疫酶標技術——直接法
實驗方法原理先將酶與抗體結合形成酶標抗體,然后和相應的抗原反應,使抗原抗體復合物上帶有酶分子,再與酶的底物H2O2—DAB(3’3—二胺荃聯苯胺)發生顯色反應,在顯微鏡下觀察,根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定;2. ?PBS
檢測抗體間接法操作步驟
間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下: ⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。 ⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗
免疫熒光技術——直接法
免疫熒光技術可應用于:(1)研究特異蛋白抗原在細胞內分布;(2)對抗原進行細胞定位;(3)對特定抗原進行定量檢測。內容來源:組織培養和分子細胞學技術。(北京出版社)實驗方法原理直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存
免疫酶標技術——間接法
實驗方法原理將酶標記在第二抗體上,再與已形成的抗原抗體復合物中的第一抗體反應。目前廣泛應用的PAP法、ABC法是在間接法的原理和技術的基礎上發展起來的。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定;2. ?PBS洗滌2×3 分鐘;3. ?1 %H2O2(或1 %
免疫熒光技術——間接法
實驗方法原理基本原理是先用特異性抗體與細胞內相應抗原結合,再用熒光素標記的二抗與特異性抗體相結合,形成抗原-特異性抗體-標記熒光抗體的復合物。因為在復合物上帶有比直接法更多的熒光標記物,所以比直接法更敏感。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBS伊文氏蘭儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定后,PBS洗滌3
全自動生化分析儀測量電解質直接法優于間接法
一、目前大部分全自動生化分析儀測量電解質所用間接法與直接法實有極大差別,且誤差較大。全自動生化分析儀目前在測量血液常規項目時,是以比色法為主,主要原理是運用光譜技術中不同原子吸光不同而測量的,那么對于ISE模塊的功能實現,主要有兩種方法,一是比色法,二是間接法。比色法因其測量精度,準確度等與所要求的