SDSPAGE膠的干燥方法
凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman 3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形，但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量，因此，應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態，使其真空壓力波動極少。(1)試劑與配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70）(2)電泳后的凝膠用5～10倍體積固定液在室溫下固定，酸性固定液擴散后可使凝膠中的溴酚藍變黃。藍色全部消失后，繼續固定5min。為防止凝膠破裂，在進行步驟(2)之前可將凝膠浸泡于含20%甲醇、30%甘油的溶液中過夜。(3)將凝膠標記好方向后放在保鮮膜或玻璃紙上面，上面放一張比凝膠四周長出1～2cm的Whatman 3MM濾紙。(4)另將一張濾紙放在凝膠干燥器上。將Whatman 3MM濾紙/凝膠/保鮮膜或玻璃紙，放在凝膠干燥器上的濾紙上面，保鮮膜或玻璃紙在最上面。(5)放下凝膠干燥器的蓋子，抽真空使凝膠四周封閉以干燥凝膠，干燥時間常由廠家提供，一般0.7......閱讀全文
SDSPAGE膠制備
一. 實驗原理： SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。 SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣
SDSPAGE膠的干燥
凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman 3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形，但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量，因此，應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態，使其真空壓力波動極少。(1)試劑與配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70）(2)電泳后的凝膠用
SDSPAGE膠的干燥方法
凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman 3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形，但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量，因此，應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態，使其真空壓力波動極少。(1)試劑與配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70）(2)電泳后的凝膠用
如何配制sdspage梯度膠
操作步驟（ 1 ）在制板支架上置一專用有機玻璃槽，將固定好的玻璃板下部插入槽內，中部用兩個文具夾固定在支架豎板上。在槽內倒入已充分溶化的瓊脂，冷凝后封閉膠腔底部。（ 2 ）用直徑約 2mm 的聚乙烯管連接好梯度混合器、恒流泵、凝膠模。（ 3 ） 30% 膠液的配制取 50ml 燒杯一只，加凝膠貯液①
SDSPAGE梯度膠怎么配置
操作步驟（ 1 ）在制板支架上置一專用有機玻璃槽，將固定好的玻璃板下部插入槽內，中部用兩個文具夾固定在支架豎板上。在槽內倒入已充分溶化的瓊脂，冷凝后封閉膠腔底部。（ 2 ）用直徑約 2mm 的聚乙烯管連接好梯度混合器、恒流泵、凝膠模。（ 3 ） 30% 膠液的配制取 50ml 燒杯一只，加凝膠貯液①
電泳跑膠SDSPAGE的定義
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝膠電泳詳細資料如下：聚丙烯酰胺凝膠電泳是網狀結構，具有分子篩效應，它有兩種形式，一種是非變性聚丙烯酰胺凝膠，蛋白質在電泳中保持完整的狀態，蛋白在其中依三種因素分開：蛋白大小，形狀和電荷。而SDS-PAGE僅根據蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。這個技術首先是1967年由s
電泳跑膠SDSPAGE的定義
聚丙烯酰胺凝膠電泳是網狀結構，具有分子篩效應，它有兩種形式，一種是非變性聚丙烯酰胺凝膠，蛋白質在電泳中保持完整的狀態，蛋白在其中依三種因素分開：蛋白大小，形狀和電荷。而SDS-PAGE僅根據蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。這個技術首先是1967年由shapiro建立，他們發現在樣品介質和丙烯酰胺凝膠
SDSPAGE凝膠－自配？配膠試劑盒？預制膠？
蛋白質印跡的發明者一般認為是美國斯坦福大學的喬治·斯塔克(George Stark)。在尼爾·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化學》(Analytical Biochemistry)中首次被稱為Western Blot。蛋白免疫印跡( Western Blot)
SDSPAGE蛋白電泳配膠不凝固
我分析原因是過硫酸胺失效，過硫酸氨最好是先用現配，如果怕麻煩而且跑膠的頻率很高的話，那么用完之后ap要放在4℃保存，一周之后必須新配。另外可以適當的增加temed的量，從5μl提高到8μl并無大礙。如你所說，是不是就是ap失效呢，還有，我強烈建議你復查一邊濃縮膠，分離膠各各buffer的組分是否配制
蛋白質SDSPAGE電泳分離膠和濃縮膠的濃度如何確定
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12膠紅線左右可以用12或10跑幾百的很大的用6的膠小蛋白12的10的一般都能跑如果不考慮效率的話...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2，看樣品濃度多少，以及你想用幾次通常我們是定到4微每微，總量100微，用10次如果濃度小的話定到2用5次
怎樣根據蛋白質大小確定SDSPAGE電泳分離膠的濃度
按的是你丙烯酰胺和雙丙烯酰胺的總質量與膠總體積的質量體積比（m/v）首先你要將上述藥品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液（一般為30%,也是m/v）而10%,12%,16%你自然也就知道應該用多少的母液去配制了.相信如何配膠你是知道的.
做WB時SDSPAGE膠凝固后多長時間上樣最好
配膠時，建議濃縮膠室溫凝固20-30分鐘后，再加分離膠，室溫凝固2-3小時后再用效果佳，如果當天配完不用，需塑料薄膜手套之類的將其包好，放置 4°冰箱過夜，第二天即用，不建議時間過長使用！
怎樣根據蛋白質大小確定SDSPAGE電泳分離膠的濃度
你可以用12%的膠濃度，如果marker是fermentas家的SDS非預染marker（批號SM0431）的話，可以看到116kd 66.2kd 45kd 35kd 25kd 18.4kd 14.4kd，這樣你的目的條帶20kd就差不多在整塊膠的中間
8KDa蛋白在SDSPAGE電泳時分離膠的濃度該選擇多大
聚丙烯酰胺凝膠濃度與蛋白質分離范圍的關系：聚丙烯酰胺凝膠濃度/% 蛋白質分離范圍/kd5 36—2007.5 24—20010 14—20012.5 14—10015 14—60濃縮膠濃度低；分離膠濃度高于濃縮膠，一般不小于5%。8KD的蛋白質可能就要用Tricine–SDS-PAGE系統，因為濃縮
SDSPAGE蛋白質電泳－配膠緩沖液系統對電泳的影響
在SDS-PAGE不連續電泳中，制膠緩沖液使用的是Tris-HCL緩沖系統，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9;而電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統。在濃縮膠中，其pH環境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場的作用下，泳動效率低;而CL離子卻很高，兩者之間形成導電性較低的區帶，蛋白分子就介
完整蛋白質從－SDSPAGE－膠中的電洗脫及其－MALDITOF－MS－分析...
試劑、試劑盒?電泳緩沖液蛋白質染色液微量離心管儀器、耗材?水平凝膠電泳儀器電洗脫試劑盒真空離心濃縮儀實驗步驟 3.1 蛋白質檢測一 般而言，凝膠染色和脫色非常易于操作。在本實驗方法中，我們使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考馬斯亮藍染色液顯色蛋白質（見注釋 1) 。( 1 ) SDS
完整蛋白質從－SDSPAGE－膠中的電洗脫及其－MALDITOF－MS－分析...
試劑、試劑盒：電泳緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? 蛋白質染色液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
為什么SDSPAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳中樣品跑不進膠
溴酚藍指示劑跑進去沒有，有沒有在合適的位置？染料配制的有無問題，最好找別的膠試一試。另外脫色液也很重要，加熱（55度）脫色。可以同時上一個預染Marker看一看。
完整蛋白質從SDSPAGE膠中的電洗脫及其MALDITOF－MS－分析實驗
試劑、試劑盒電泳緩沖液蛋白質染色液微量離心管儀器、耗材水平凝膠電泳儀器電洗脫試劑盒真空離心濃縮儀實驗步驟3.1 蛋白質檢測一 般而言，凝膠染色和脫色非常易于操作。在本實驗方法中，我們使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考馬斯亮藍染色液顯色蛋白質（見注釋 1) 。( 1 ) SDS-PA
SDSPAGE常用參數
聚丙烯酰胺的特性，包括機械性能，彈性，透明度，孔徑大小取決于T，C，T是兩個單體(單體丙烯酰胺和N-N’-甲叉雙丙烯酰胺)的總百分濃度，C 是與總濃度有關的交聯百分比濃度。T=(a+b)/mC=b/(a+b)（a為單體丙烯酰胺的克數，b為N-N’-甲叉雙丙烯酰胺的克數，m為緩沖液終體積）a，b的比例
簡介冷膠噴膠機的供膠裝置
組成部份說明：膠桶、泵 膠桶的容量為30L，桶蓋用于安裝活塞泵活塞泵 4:1活塞泵用于泵起和供應膠水，配有不銹鋼膠管和過濾器過濾器 不銹鋼過濾器具有過濾膠水和消除泵的震動雙重功能調壓器 4:1不銹鋼調壓器能自動控制膠量 I/P自動壓力追蹤閥 根據糊盒機的速度自動調節膠水的壓力與流量技術參數泵的
自動滴膠勻膠機
自動滴膠勻膠機/真空旋轉涂層機 ?型號：MHY-29071MHY-29071產品簡介：主要用于液體，膠體在材料表面薄膜的形成，適用于硅片，晶片，玻璃，陶瓷等制版表面涂覆工藝。可在科研，教育，生產中應用。?MHY-29071主要特點：1可設定存儲26個不同樣片的旋轉涂敷工藝過程。2每個涂敷工藝過程可以
蛋白膠如何干膠保存
最好有個干膠儀的，直接按照儀器要求做就可以了。如果你要讓膠自然干，需要很長時間，而且膠容易變形破裂。
SDSPAGE檢測蛋白表達
一、材料與儀器30%丙烯酰胺溶液；1.5mol/L Tris-HCl分離膠緩沖液，PH8.8；1.0mol/L Tris-HCl濃縮膠緩沖液，PH6.8；電泳緩沖液，PH8.3；10%SDS溶液；10%過硫酸銨溶液；樣品處理液；染色液；脫色液；電泳玻璃板，電泳電源架，電泳槽，電泳儀等；蛋白Mark。
SDSPAGE的影響因素
1. 帶電顆粒的性質凈電荷多少、顆粒大小及形狀。一般凈電荷多，直徑小而且近于球狀，則泳動速度快，反之則慢。?2. 電場強度（電位梯度）指單位長度（cm）支持物體上的電位降，它對泳動度起著十分重要的作用。一般電場強度越高，帶電顆粒移動速度越快。根據電場強度可將電泳分為低壓（常壓）電泳100—500V，
SDSPAGE的影響因素
1. 帶電顆粒的性質凈電荷多少、顆粒大小及形狀。一般凈電荷多，直徑小而且近于球狀，則泳動速度快，反之則慢。2. 電場強度（電位梯度）指單位長度（cm）支持物體上的電位降，它對泳動度起著十分重要的作用。一般電場強度越高，帶電顆粒移動速度越快。根據電場強度可將電泳分為低壓（常壓）電泳100—500V，電
SDSPAGE的影響因素
1. 帶電顆粒的性質 凈電荷多少、顆粒大小及形狀。一般凈電荷多，直徑小而且近于球狀，則泳動速度快，反之則慢。 2. 電場強度（電位梯度） 指單位長度（cm）支持物體上的電位降，它對泳動度起著十分重要的作用。一般電場強度越高，帶電顆粒移動速度越快。根據電場強度可將電泳分為低壓
Tricine－SDSPAGE實用方案
Tricine-SDS-PAGE是用于分離分子量在1-10kD的肽類用的。一、 試劑配制：1． Low Bis acrylamide（49.5% T, 3% C）Acylamide 48.0gBis 1.5gWater make up to 100ml2. High Bis acrylamide (
SDSPAGE實驗方法
試劑：1. 5x樣品緩沖液（10ml）:0.6ml 1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油，2ml 10%的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml 1%溴酚藍，0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周，或在－20℃保存數月。2. 凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g，甲叉雙丙烯酰
SDSPAGE的操作步驟
(1) SDS-PAGE凝膠配制SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻資料進行配制，也可以使用碧云天生產的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒(P0012A)。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。(主要分為濃縮膠和分離膠，配方可自己上網查下)(2) 樣品處理在收集