完整蛋白質從SDSPAGE膠中的電洗脫及其MALDITOFMS分析...
試劑、試劑盒：電泳緩沖液 蛋白質染色液 &n......閱讀全文
完整蛋白質從－SDSPAGE－膠中的電洗脫及其－MALDITOF－MS－分析...
試劑、試劑盒：電泳緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? 蛋白質染色液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
完整蛋白質從－SDSPAGE－膠中的電洗脫及其－MALDITOF－MS－分析...
試劑、試劑盒?電泳緩沖液蛋白質染色液微量離心管儀器、耗材?水平凝膠電泳儀器電洗脫試劑盒真空離心濃縮儀實驗步驟 3.1 蛋白質檢測一 般而言，凝膠染色和脫色非常易于操作。在本實驗方法中，我們使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考馬斯亮藍染色液顯色蛋白質（見注釋 1) 。( 1 ) SDS
完整蛋白質從SDSPAGE膠中的電洗脫及其MALDITOF－MS－分析實驗
試劑、試劑盒電泳緩沖液蛋白質染色液微量離心管儀器、耗材水平凝膠電泳儀器電洗脫試劑盒真空離心濃縮儀實驗步驟3.1 蛋白質檢測一 般而言，凝膠染色和脫色非常易于操作。在本實驗方法中，我們使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考馬斯亮藍染色液顯色蛋白質（見注釋 1) 。( 1 ) SDS-PA
SDSPAGE膠制備
一. 實驗原理： SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。 SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣
蛋白質SDSPAGE電泳分離膠和濃縮膠的濃度如何確定
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12膠紅線左右可以用12或10跑幾百的很大的用6的膠小蛋白12的10的一般都能跑如果不考慮效率的話...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2，看樣品濃度多少，以及你想用幾次通常我們是定到4微每微，總量100微，用10次如果濃度小的話定到2用5次
SDSPAGE膠的干燥
凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman 3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形，但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量，因此，應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態，使其真空壓力波動極少。(1)試劑與配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70）(2)電泳后的凝膠用
SDSPAGE膠的干燥方法
凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman 3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形，但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量，因此，應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態，使其真空壓力波動極少。(1)試劑與配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70）(2)電泳后的凝膠用
SDSPAGE梯度膠怎么配置
操作步驟（ 1 ）在制板支架上置一專用有機玻璃槽，將固定好的玻璃板下部插入槽內，中部用兩個文具夾固定在支架豎板上。在槽內倒入已充分溶化的瓊脂，冷凝后封閉膠腔底部。（ 2 ）用直徑約 2mm 的聚乙烯管連接好梯度混合器、恒流泵、凝膠模。（ 3 ） 30% 膠液的配制取 50ml 燒杯一只，加凝膠貯液①
如何配制sdspage梯度膠
操作步驟（ 1 ）在制板支架上置一專用有機玻璃槽，將固定好的玻璃板下部插入槽內，中部用兩個文具夾固定在支架豎板上。在槽內倒入已充分溶化的瓊脂，冷凝后封閉膠腔底部。（ 2 ）用直徑約 2mm 的聚乙烯管連接好梯度混合器、恒流泵、凝膠模。（ 3 ） 30% 膠液的配制取 50ml 燒杯一只，加凝膠貯液①
電泳跑膠SDSPAGE的定義
聚丙烯酰胺凝膠電泳是網狀結構，具有分子篩效應，它有兩種形式，一種是非變性聚丙烯酰胺凝膠，蛋白質在電泳中保持完整的狀態，蛋白在其中依三種因素分開：蛋白大小，形狀和電荷。而SDS-PAGE僅根據蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。這個技術首先是1967年由shapiro建立，他們發現在樣品介質和丙烯酰胺凝膠
電泳跑膠SDSPAGE的定義
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝膠電泳詳細資料如下：聚丙烯酰胺凝膠電泳是網狀結構，具有分子篩效應，它有兩種形式，一種是非變性聚丙烯酰胺凝膠，蛋白質在電泳中保持完整的狀態，蛋白在其中依三種因素分開：蛋白大小，形狀和電荷。而SDS-PAGE僅根據蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。這個技術首先是1967年由s
怎樣根據蛋白質大小確定SDSPAGE電泳分離膠的濃度
按的是你丙烯酰胺和雙丙烯酰胺的總質量與膠總體積的質量體積比（m/v）首先你要將上述藥品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液（一般為30%,也是m/v）而10%,12%,16%你自然也就知道應該用多少的母液去配制了.相信如何配膠你是知道的.
怎樣根據蛋白質大小確定SDSPAGE電泳分離膠的濃度
你可以用12%的膠濃度，如果marker是fermentas家的SDS非預染marker（批號SM0431）的話，可以看到116kd 66.2kd 45kd 35kd 25kd 18.4kd 14.4kd，這樣你的目的條帶20kd就差不多在整塊膠的中間
2D－凝膠的蛋白－Edman－測序實驗
試劑、試劑盒?SDS 抽樣緩沖液分離膠緩沖液濃縮膠緩沖液SDS-PAGE 電泳緩沖液實驗步驟 3.1 Cleveland 肽圖譜[5]( 1 ) 樣品進行 2D-PAGE 分離，然后用考馬斯亮藍（CBB ) 染色，去除含有蛋白質點的凝膠碎片。( 2 ) 用電泳濃縮儀洗脫凝膠中的蛋白質，2W 恒功率洗
2D－凝膠的蛋白－Edman－測序實驗
試劑、試劑盒SDS 抽樣緩沖液分離膠緩沖液濃縮膠緩沖液SDS-PAGE 電泳緩沖液實驗步驟3.1 Cleveland 肽圖譜[5]( 1 ) 樣品進行 2D-PAGE 分離，然后用考馬斯亮藍（CBB ) 染色，去除含有蛋白質點的凝膠碎片。( 2 ) 用電泳濃縮儀洗脫凝膠中的蛋白質，2W 恒功率洗脫
2D－凝膠的蛋白－Edman－測序實驗
試劑、試劑盒：SDS 抽樣緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?分離膠緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
SDSPAGE凝膠－自配？配膠試劑盒？預制膠？
蛋白質印跡的發明者一般認為是美國斯坦福大學的喬治·斯塔克(George Stark)。在尼爾·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化學》(Analytical Biochemistry)中首次被稱為Western Blot。蛋白免疫印跡( Western Blot)
SDSPAGE蛋白質電泳－配膠緩沖液系統對電泳的影響
在SDS-PAGE不連續電泳中，制膠緩沖液使用的是Tris-HCL緩沖系統，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9;而電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統。在濃縮膠中，其pH環境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場的作用下，泳動效率低;而CL離子卻很高，兩者之間形成導電性較低的區帶，蛋白分子就介
SDSPAGE蛋白電泳配膠不凝固
我分析原因是過硫酸胺失效，過硫酸氨最好是先用現配，如果怕麻煩而且跑膠的頻率很高的話，那么用完之后ap要放在4℃保存，一周之后必須新配。另外可以適當的增加temed的量，從5μl提高到8μl并無大礙。如你所說，是不是就是ap失效呢，還有，我強烈建議你復查一邊濃縮膠，分離膠各各buffer的組分是否配制
小型垂直電泳槽儀器介紹
儀器介紹該電泳系統有四部分組成：A電泳槽外殼、相對應的模塊、緩沖液槽和蓋；B玻璃板和梳子；C加樣引導器；D制膠支架和制膠框。該系統設計zui大特點是功能靈活，即可以做普通的蛋白電泳、Western印跡，又可以做電洗脫和雙向凝膠電泳。另外制膠簡便，大大節約了整個電泳的時間。主要特點1. 模塊化設計，使
免疫共沉淀－簡介
蛋白質間相互作用研究方法：免疫共沉淀1．用磷酸鹽緩沖液洗30塊10 cm培養板上的適宜細胞。刮去每塊板上的細胞到1 ml冰冷的EBC裂解緩沖液中。2．將每毫升細胞懸液轉移到微量離心管中，在微量離心機上4℃以最大速度離心15 min。3．收集上清（約30 ml）并加入30μg的適當抗體，4℃搖動免疫沉
蛋白質間相互作用研究方法2：免疫共沉淀
相互作用在生理上的證實和探索l? 通過免疫共沉淀確定結合蛋白1．用磷酸鹽緩沖液洗30塊10 cm培養板上的適宜細胞。刮去每塊板上的細胞到1 ml冰冷的EBC裂解緩沖液中。2．將每毫升細胞懸液轉移到微量離心管中，在微量離心機上4℃以最大速度離心15 min。3．收集上清（約30 ml）并加入3
蛋白質間相互作用研究方法：免疫共沉淀
相互作用在生理上的證實和探索l??????通過免疫共沉淀確定結合蛋白1．用磷酸鹽緩沖液洗30塊10 cm培養板上的適宜細胞。刮去每塊板上的細胞到1 ml冰冷的EBC裂解緩沖液中。2．將每毫升細胞懸液轉移到微量離心管中，在微量離心機上4℃以最大速度離心15 min。3．收集上清（約30 ml）并加入3
電洗脫的概念
中文名稱電洗脫英文名稱electroelution定 義將在某些支持物中含有的目的成分電泳遷移出來的技術。如瓊脂糖、聚丙烯酰胺凝膠電泳后，將含有所分離成分的凝膠切出來，放在適當的電場中，使凝膠內所要的成分移到緩沖液中。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
免疫共沉淀實驗操作方法介紹
1．用磷酸鹽緩沖液洗30塊10 cm培養板上的適宜細胞。刮去每塊板上的細胞到1 ml冰冷的EBC裂解緩沖液中。 2．將每毫升細胞懸液轉移到微量離心管中，在微量離心機上4℃以最大速度離心15 min。 3．收集上清（約30 ml）并加入30μg的適當抗體，4℃搖動免疫沉淀物1 h。 4．加入
蛋白質的SDSPAGE電泳
蛋白質的SDS-PAGE電泳 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 過硫酸銨 含 2-巰基乙醇的樣品緩沖液
蛋白質的SDSPAGE實驗
實驗材料蛋白質溶液團粒狀細胞蛋白試劑、試劑盒4X濃縮膠緩沖4X分離膠緩沖10X電泳緩沖液2XSDS-PAGE上樣緩沖液正丁醇甲醇SDS儲存液儀器、耗材離心機電泳裝置凝膠上樣吸頭玻璃板加熱器實驗步驟一、灌制平板膠1.清洗玻璃板。a.將玻璃板放人 2%PCC-54 清洗液中浸泡 3?24 h。b.自來水
蛋白質的SDSPAGE電泳
試劑、試劑盒 過硫酸銨含 2-巰基乙醇的樣品緩沖液樣品緩沖液 (2X) 儲液電泳緩沖液電極緩沖液壓縮膠緩沖液分離膠緩沖液實驗步驟 鑄分離膠（下層膠)裝置的清洗為使角蛋白的污染減至最少，將玻板、梳子和隔條浸泡在含強堿性去垢劑〔2%RBS 35 液（Pierce Chemical Co.)〕提濃物的
蛋白質的SDSPAGE電泳
按所用小型平板凝膠裝置調整溶液體積，膠板大小約在 8X10X0.15 cm。在此大小范圍內有幾種形式可以利用。制膠的裝置有玻璃板、塑料隔條（通常厚度為 0.1~0.2 cm) 和鑄膠時成孔用的 Teflon 梳子。下面逐步示教 SDS-PAGE 的操作程序。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者
SDSPAGE－蛋白質樣品的制備
試劑、試劑盒SDS-PAGE Loading BufferddH2O30%丙烯酰胺混合液1.5M Tris(pH8.8)10%SDS10%過硫酸銨TEMEDTris-甘氨酸電泳緩沖液溴酚藍考馬斯亮藍 R-250 染色液考馬斯亮藍脫色液儀器、耗材離心機冷室水浴鍋電泳裝置微量移液器水平搖床濾紙實驗步驟實