免疫組織化學染色方法(SP法)
免疫細胞化學(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗體同特定抗原專一結合,對抗原進行定位測定的技術。抗原主要為大分子或與大分子相結合的小分子;抗體則是由漿細胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結合上標記物,再與組織中的抗原發生反應,即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。常用的標記物有熒光素和酶。熒光素標記的稱為免疫熒光法(immunofluorescent technique),常用的螢光素有異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate)、羅丹明(rhodamine)等。酶標記的稱為酶標免疫法(enzyme-labeled antibody method),常用的酶有辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase),酶與底物發生反應后形成不透明的沉積物,從而顯示出抗原存在的部位。抗體與抗原的結合方法可分為直接法和間接法兩種,直接法是將帶有標記的抗體......閱讀全文
免疫組織化學染色方法(SP法)
免疫細胞化學(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗體同特定抗原專一結合,對抗原進行定位測定的技術。抗原主要為大分子或與大分子相結合的小分子;抗體則是由漿細胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結合上標記物,再與組織中的抗原發生反應,即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于
免疫堿性磷酸酶組織化學實驗——間接免疫堿性磷酸酶法
免疫堿性磷酸酶組織化學技術是以堿性磷酸酶(AKP 或 AP)取代 HRP 來顯示結果的免疫酶組織化學技術。最早出現的是間接免疫堿性磷酸酶法(IAP),1983 年 Mason 及 Moir 等建立了堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶(APAAP)復合物法。隨后,人們建立了更為敏感的生物素-親和素-堿性磷酸酶復合
親和免疫組織化學實驗——LSAB-法
實驗方法原理LSAB 法或稱 S-P 法、SABC 法,它是采用生物素標記的第二抗體與結合有 HRP 或 AKP 酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質,相對分子質量 60000,不含糖鏈,等電點 pI 為 6.0~6.5
巨細胞包涵體病的病理學檢查
1、組織病理學檢查活檢或尸解組織病理切片,用蘇術精-伊紅或姬姆薩染色后鏡檢,在光鏡下檢查受染細胞,可發現細胞及細胞核的巨大化且有包涵體,核內包涵體周圍與核膜間有一清晰的透明圈隔開,似貓頭鷹眼睛,有診斷價值。但陰性結果不能除外。有報道采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白,過氧化酶連結法(s-P法)檢測組
巨細胞包涵體病的診斷及病理學檢查
診斷 確診CID包括臨床表現及實驗室確診的證據,僅有實驗室檢測證據無臨床表現稱為CMV感染.不能診斷為CID。以下情況提示有CID的可能性:新生兒有黃疸、肝脾腫大、皮膚粘膜有出血點、周圍血異常淋巴細胞增多,但血清嗜異性凝集反應陰性。 病理學檢查 1、組織病理學檢查活檢或尸解組織病理切片,用
SABC法親和素與生物素系統的操作流程
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法,它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質,相對分子質量60000,不含
水解酶如何分類?
水解酶在EC編號中分類為EC3,并以它分解的鍵再細分為幾個子類:EC3.1:酯鍵(酯酶)EC3.2:糖(糖基酶)EC3.3:醚鍵EC3.4:肽鍵(肽酶)EC3.5:C-N鍵,但不包括肽鍵EC3.6:酸酐EC3.7:C-C鍵EC3.8:鹵鍵EC3.9:P-N鍵EC3.10:S-N鍵EC3.11:S-P
水解酶的分類介紹
水解酶在EC編號中分類為EC3,并以它分解的鍵再細分為幾個子類:EC3.1:酯鍵(酯酶)EC3.2:糖(糖基酶)EC3.3:醚鍵EC3.4:肽鍵(肽酶)EC3.5:C-N鍵,但不包括肽鍵EC3.6:酸酐EC3.7:C-C鍵EC3.8:鹵鍵EC3.9:P-N鍵EC3.10:S-N鍵EC3.11:S-P
水解酶的基本分類
水解酶在EC編號中分類為EC3,并以它分解的鍵再細分為幾個子類:EC3.1:酯鍵(酯酶)EC3.2:糖(糖基酶)EC3.3:醚鍵EC3.4:肽鍵(肽酶)EC3.5:C-N鍵,但不包括肽鍵EC3.6:酸酐EC3.7:C-C鍵EC3.8:鹵鍵EC3.9:P-N鍵EC3.10:S-N鍵EC3.11:S-P
SABC法親和素與生物素系統的操作流程
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法,它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質,相對分子質量60000,不含
學者們利用地震噪聲互相關發現下地幔散射體的反射波
下地幔占地球體積近60%,在各種尺度上都表現出強烈的不均勻性。對下地幔不均勻體特別是小尺度散射體的分布、形態和性質的研究,可以為認識地球深部物質組成及相變、地幔流變性、地幔對流尺度、地幔混合效率等提供重要制約。 傳統研究方法主要有S-P轉換波法和反射前驅波法。其中,利用震源下方的S-P轉換波法
親和免疫組織化學實驗——改進-CSA法
實驗方法原理已有的研究結果證實,CSA 法較 LSAB 法敏感 500~1000 倍,較 EnVision 法敏感 20~100 倍。其對細胞周期素等核內抗原的定位,有獨特的優點,定位準確性、敏感性、穩定性要較標準的 CSA 法好,其敏感性和穿透性要好于 EnVision 法。最近,Hasui K
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry兩者都是生物檢驗的化學試劑。 bradford法,也稱考馬斯藍染色法(coomassie blue staining)。考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色,當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色,前者最大光吸收在
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry兩者都是生物檢驗的化學試劑。 bradford法,也稱考馬斯藍染色法(coomassie blue staining)。考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色,當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色,前者最大光吸收在
沉淀法、過濾法、蒸餾法的區別
一沉淀法:固液分離。有時為了加速沉淀,可以加入一些凝聚劑,如明礬、活性炭等。二過濾法:固液分離。但是固體必須是不溶于水的才行。三蒸餾法:液液分離。利用沸點不同,沸點低的先蒸餾出來,沸點高的后蒸餾出來。
內標法與外標法
一、內標法 什么叫內標法?怎樣選擇內標物? 內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時,加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響,以提高分析結果的準確度。 內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時,在樣品中加入一定量的標準物質,它可被
外標法與內標法
? 一、內標法 什么叫內標法?怎樣選擇內標物? 內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時,加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響,以提高分析結果的準確度。 內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時,在樣品中加入一定量的標準物質
Folin—酚試劑法(Lowry法)
實驗概要本文介紹了Folin—酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Fol
氣相法液相法固相法優缺點
氣相法液相法固相法優點:分離效率高,分析速度快,樣品用量少和檢測靈敏度高。選擇性好,可分離、分析恒沸混合物,沸點相近的物質,某些同位素,順式與反式異構體鄰、間、對位異構體,旋光異構體等。氣相法液相法固相法缺點:分析成本高,液相色譜儀價格及日常維護費用貴,分析時間一般比氣相長。檢測器氣相色譜法中可以使
色譜定量方法:標準加入法內標法外標法
色譜分析的重要作用之一是對樣品定量。而色譜法定量的依據是:組分的重量或在載氣中的濃度與檢測器的響應信號成正比。常見定量分析方法分為面積歸一化法、內標法、外標法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫過于內標法、外標法了。 以內標法為例,選一與欲測組分相近但能完全分離的組分做內標物(當然是樣品中沒有的組
可見異物檢查法第一法(燈檢法)
取規定量供試品,除去容器標簽,擦凈容器外壁,必要時將藥液轉移至潔凈透明的適宜容器內,將供試品置遮光板邊緣處,在明視距離(指供試品至人眼的清晰觀測距離,通常為25cm),手持容器頸部,輕輕旋轉和翻轉容器(但應避免產生氣泡),使藥液中可能存在的可見異物懸浮,分別在黑色和白色背景下目視檢查,重復觀察,總檢
峰面積歸一法、內標法、外標法區別
色譜定量分析方法可以分為外標法、內標法、歸一化法三大類。當能夠精確進樣量的時候,通常采用外標法進行定量。這種方法標準物質單獨進樣分析,從而確定待測組分的校正因子;實際樣品進樣分析后依據此校正因子對待測組分色譜峰進行計算得出含量。其特點是標準物質和未知樣品分開進樣,雖然看上去是二次進樣,但實際上未知樣
各顯神通!淺談歸一化法、內標法、外標法及標準加入法
面積歸一法、內標法、外標法、標準加入法。這么多定量法,用哪一種呢?每一種的適用范圍是什么呢?其優缺點又是什么?其標準物又有什么要求呢?看完你就都知道了。 1、歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法,稱為歸一化法,各成分校正因子一致時可用該法。 歸一化法的優點: 該法簡便
淺談歸一化法、內標法、外標法及標準加入法區別很重要!
1.歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法,稱為歸一化法。 各成分校正因子一致時可用該法,該法簡便、準確,特別是進樣量不容易準確控制時,進樣濃度及進樣量的變化的影響很小。 其他操作條件,如流速、柱溫等變化對定量結果的影響也很小。GC應用廣于HPLC。
消化道接種法、鼻腔接種法及角膜接種法
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒病毒試劑儀器、耗材注射器實驗步驟消化道接種。在分離腹瀉病毒或經由消化道病毒感染的研究中,可采用灌胃接種法將所接種的臨床標本或病毒用灌胃器灌到動物胃內。抓取固定小鼠,用灌胃器吸取接種物,將灌胃針從鼠的口腔插入,使口腔與食道成一條直線,再將灌胃針沿咽后壁慢慢插入食道,可感到輕
TGFf3/Smad信號通路相關蛋白表達
TGF-f3/Smad信號通路相關蛋白表達 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 TGF-13/Smads信號傳導通路中任一元件的異常都可以引起TGF-13/Smads信號傳導紊亂,
TGFf3/Smad信號通路相關蛋白表達
TGF-f3/Smad信號通路相關蛋白表達 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 TGF-13/Smads信號傳導通路中任一元件的異常都可以引起TGF-13/Smads信號傳導紊亂,
親和免疫組織化學實驗——-CSA法
實驗方法原理催化信號放大系統(catalyzed signal amplification system,CSA),也稱釀胺信號放大(tyramine signal amplification system,TSA)或稱 CARD(catalyzed repoter deposition)。該方法的
動態色譜法和靜態法
動態色譜法是將待測粉體樣品裝在U型的樣品管內,使含有一定比例吸附質的混合氣體流過樣品,根據吸附前后氣體濃度變化來確定被測樣品對吸附質分子準確度差、對設備要求很高等缺陷已很少使用。另一種可行的方法是采用CO2作吸附質在室溫進行吸附,可以無需分子渦輪泵級的真空度。可以很方便的得到比表面積、微孔孔徑、微孔
藥物鑒別法呈色反應鑒別法
呈色反應鑒別法是指供試品溶液中加入適當的試劑溶液,在一定條件下進行反應,生成易于觀測的有色產物。在鑒別試驗中最為常用的呈色反應類型有以下幾個。(1)三氯化鐵呈色反應:應用于含有酚羥基或水解后產生酚羥基的藥物,如水楊酸及其鹽。(2)異羥肟酸鐵反應:應用于含有芳酸、芳酸酯或酰胺的藥物,如β-內酰胺類。(