頑拗性植物組織的蛋白質組學研究實驗
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)實驗材料植物組織 試劑、試劑盒苯酚 ......閱讀全文
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究實驗
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)實驗材料植物組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒苯酚 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)
實驗材料植物組織試劑、試劑盒苯酚提取緩沖液沉淀液等電聚焦緩沖液儀器、耗材低溫粉碎機實驗步驟3.1 蛋白質提取( 1 ) 新鮮植物組織在液氮中冷凍,然后在自動低溫粉碎機中預先冷卻的鋼杯中將材料研磨成細碎的粉末(見注釋 4) 。( 2 ) 在一個 15 ml 的離心管(falcon? tube) 中加入
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)
1. 前言提取蛋白質是蛋白質組學研究的第一步。植物組織的蛋白質含量較低,并且存在多種非蛋白質成分,如細胞壁及貯藏多糖、脂質和酚類化合物,使蛋白質的提取難度增大 。植物蛋白質的可溶性與它們的細胞內定位關系密切,傳統的蛋白質提取方法是用水合緩沖液、去垢劑或直接沉淀法 [1] 。除了普遍使用的 TCA
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質...
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)實驗實驗材料?植物組織試劑、試劑盒?苯酚提取緩沖液沉淀液等電聚焦緩沖液儀器、耗材?低溫粉碎機實驗步驟 3.1 蛋白質提取( 1 ) 新鮮植物組織在液氮中冷凍,然后在自動低溫粉碎機中預先冷卻的鋼杯中將材料研磨成細碎的粉末(見注釋 4) 。( 2 ) 在
版納植物園頑拗性種子生物學研究獲綜合進展
龍腦香科瀕危植物多毛坡壘(Hopea mollissima C. Y. Wu)的頑拗性種子萌發 西雙版納是我國少有的幾個熱帶地區之一,同時又是我國植物種類最多、種植資源最豐富的地區,豐富的植物資源使其享有“植物王國”的美譽。然而,由于數十年來不合理的開發利用, 物種受
骨組織的蛋白質組學研究成果
??? 鄒漢法近年來廣泛開展了蛋白質組學和多肽組學新技術新方法的研究,近兩年來相關研究成果已在Mol.? Cel.? Proteomics(IF? 9.876),Angew.? Chem.? Int.? Ed.(IF? 9.596),Nucleic? Acids? Research(IF? 7.
植物蛋白質組學和糖基化實驗
實驗材料鏈霉親和素-過氧化物酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? 牛胰核糖核酸酶 B ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
蛋白質組學在植物科學研究中的應用
1 植物群體遺傳蛋白質組學 1.l 遺傳多樣性蛋白質研究基于基因組學的一些遺傳標記,如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen
植物蛋白質組學和糖基化實驗1
實驗材料鏈霉親和素-過氧化物酶牛胰核糖核酸酶 B甲基比喃甘露糖苷卵清白蛋白試劑、試劑盒DIG 糖鏈檢測試劑TTBS 緩沖液Lectin- biotinTBS 緩沖液實驗步驟3.1 這個蛋白質是糖蛋白嗎只有一種方法能全面的回答“這個蛋白質是糖蛋白嗎?”這個問題。這需要使用能檢測并定量印記上糖蛋白的總糖
植物蛋白質組學和糖基化實驗(二)
刀豆球蛋白 A (ConA)- 過氧化物酶方法(根據參考文獻 20 修改的方法)。( 1 ) 通過 1D 或 2D 電泳分離,并轉移到硝酸纖維素膜上。( 2 ) 用 TTBS 緩沖液浸泡印跡膜 1 h。( 3 ) 將印跡膜在含有 ConA ( 25 μg/ml)的 TTBS 緩沖液中,室溫下溫育 2
植物蛋白質組學和糖基化實驗(五)
1. 含高甘露糖型 N-糖苷糖蛋白的鑒定本方法是我們實驗室以油菜籽為實驗材料建立的,本方法也適用于其他植物材料。( 1 ) 將 6 g 植物材料放入 4°C 預冷的研缽中,加入 50 ml 預冷的 TBS 緩沖液,研磨萃取蛋白質(見注釋 13),接著 10000 g 離心萃取物 30 min,去
植物蛋白質組學和糖基化實驗(一)
實驗材料?鏈霉親和素-過氧化物酶牛胰核糖核酸酶 B甲基比喃甘露糖苷卵清白蛋白試劑、試劑盒?DIG 糖鏈檢測試劑TTBS 緩沖液Lectin- biotinTBS 緩沖液實驗步驟 3.1 這個蛋白質是糖蛋白嗎只有一種方法能全面的回答“這個蛋白質是糖蛋白嗎?”這個問題。這需要使用能檢測并定量印記上糖蛋白
植物蛋白質組學和糖基化實驗(四)
3.3 我的糖基化蛋白在哪實驗人員可通過這個方法獲得關于糖苷在蛋白骨架上的分布及糖苷本身的結構信息。這類實驗可在純化的糖蛋白或者從 1D 或 2D 電泳膠上分離出來的蛋白上進行,首先,用蛋白內切酶消化蛋白質,通過高效液相色譜(HPLC) 分離消化后的肽和糖肽混合物。對含有糖苷的收集組分進行糖
植物蛋白質組學和糖基化實驗2
3. 糖基釋放后的蛋白質分析1 ) 糖基釋放的化學處理方法還原性氨化反可應選擇性的解離糖蛋白上的 O-糖苷(見注釋 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析,將其遷移情況與其糖基化形式的蛋白進行比較,電泳遷移率的增加是 O-連糖苷出現在蛋白上的證據(見注釋 11)。( 1 ) 將 1
植物蛋白質組學和糖基化實驗(三)
3. 糖基釋放后的蛋白質分析1 ) 糖基釋放的化學處理方法還原性氨化反可應選擇性的解離糖蛋白上的 O-糖苷(見注釋 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析,將其遷移情況與其糖基化形式的蛋白進行比較,電泳遷移率的增加是 O-連糖苷出現在蛋白上的證據(見注釋 11)。( 1 ) 將 1
蛋白質組學研究技術
可以說,蛋白質組學的發展既是技術所推動的也是受技術限制的。蛋白質組學研究成功與否,很大程度上取決于其技術方法水平的高低。蛋白質研究技術遠比基因技術復雜和困難。不僅氨基酸殘基種類遠多于核苷酸殘基(20/ 4), 而且蛋白質有著復雜的翻譯后修飾,如磷酸化和糖基化等,給分離和分析蛋白質帶來很多困難。此外,
蛋白質組學的研究內容
主要有兩方面,一是結構蛋白質組學,二是功能蛋白質組學。其研究前沿大致分為三個方面: ①針對有關基因組或轉錄組數據庫的生物體或組織細胞,建立其蛋白質組或亞蛋白質組及其蛋白質組連鎖群,即組成性蛋白質組學。 ②以重要生命過程或人類重大疾病為對象,進行重要生理病理體系或過程的局部蛋白質組或比較蛋白質組學
植物組織制備基因組DNA實驗
氯化銫法 CTAB法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則
植物組織制備基因組DNA實驗
實驗方法原理?加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部, 從而達到提取的目的。實驗材料?植物組織試劑、試劑盒?抽提緩沖液十二烷基肌氨酸鈉TE異丙醇溴化乙錠氯化銫儀器、耗材?離心機實驗步驟 ? 收取1
2025蛋白質組學大會之單細胞蛋白質組學研究
2025年10月13日上午10:10,第12屆AOHUPO大會暨第8屆AOAPO大會、π-HuB國際大科學計劃第三屆全球峰會暨第13屆CNHUPO大會“Single Cell Proteomics”分論壇在廣州白云國際會議中心汕頭廳(Shantou Hall)成功舉行。 本場論壇由浙江大學方群
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗
試劑、試劑盒尿素裂解溶液IPG 干膠條水化液IPG 膠條平衡液SDS 凝膠緩沖液電極緩沖液儲液丙烯酰胺 甲叉雙丙烯酰胺溶液過硫酸銨溶液瓊脂糖溶液儀器、耗材等電聚焦儀IPGphor多重垂直 SDS 電泳儀實驗步驟3.1 第一向:在 IPG 膠條中進行等電聚焦( IPG-IEF)采用 IPG ( IPG
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗
試劑、試劑盒尿素裂解溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? IPG 干膠條水化液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
蛋白質組,蛋白質組學及研究技術路線
基因組(genome)包含的遺傳信息經轉錄產生mRNA,一個細胞在特定生理或病理狀態下表達的所有種類的mRNA稱為轉錄子組(transcriptome)。很顯然,不同細胞在不同生理或病理狀態下轉錄子組包含的mRNA的種類不盡相同。mRNA經翻譯產生蛋白質,一個細胞在特定生理或病理狀態下表達的所有種類
蛋白質組,蛋白質組學及研究技術路線
基因組(genome)包含的遺傳信息經轉錄產生mRNA,一個細胞在特定生理或病理狀態下表達的所有種類的mRNA稱為轉錄子組(transcriptome)。很顯然,不同細胞在不同生理或病理狀態下轉錄子組包含的mRNA的種類不盡相同。mRNA經翻譯產生蛋白質,一個細胞在特定生理或病理狀態下表達的所有種類
蛋白質組學實驗技術大全
每一個領域的發展都是基于技術的進步和革新,蛋白質組學亦然。蛋白質的可變性和多樣性等特殊性質導致了蛋白質研究技術遠遠比核酸技術要復雜和困難得多,但正是這些特性參與和影響著整個生命過程。在開始實驗之前,先看看這篇技術簡介吧。一?蛋白質與DNA相互作用在許多的細胞生命活動中,例如DNA復制、mRNA轉錄與
2025蛋白質組學大會之跨物種蛋白質組學研究
2025年10月14日下午,第12屆AOHUPO大會、第8屆AOAPO大會、π-HuB國際大科學計劃第三屆全球峰會暨第13屆CNHUPO大會“Cross-species Proteomics(跨物種蛋白質組學)”分會場于廣州白云國際會議中心國際會堂順利舉行。會議由中國科學院北京基因組研究所 (國
定量蛋白質組學的研究內容
1.蛋白質鑒定:可以利用一維電泳和二維電泳并結合Western等技術,利用蛋白質芯片和抗體芯片及免疫共沉淀等技術對蛋白質進行鑒定研究。 2.翻譯后修飾:很多mRNA表達產生的蛋白質要經歷翻譯后修飾如磷酸化,糖基化,酶原激活等。翻譯后修飾是蛋白質調節功能的重要方式,因此對蛋白質翻譯后修飾的研究對
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗(四)
3.3 第二向:多重垂直 SDS-PAGESDS-PAGE 可以在水平或垂直系統上進行 [29] 。水平設備適用于預制膠(ExcelGel SDS;Amersham Biosciences/ GE Healthcare) 。而垂直系統則應用于多塊膠平行進行的電泳中,尤其是大規模的蛋白質組分析
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗(一)
試劑、試劑盒?尿素裂解溶液IPG 干膠條水化液IPG 膠條平衡液SDS 凝膠緩沖液電極緩沖液儲液丙烯酰胺 甲叉雙丙烯酰胺溶液過硫酸銨溶液瓊脂糖溶液儀器、耗材?等電聚焦儀 IPGphor多重垂直 SDS 電泳儀實驗步驟 3.1 第一向:在 IPG 膠條中進行等電聚焦( IPG-IEF)采用 IPG (
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗(三)
使用 IPGphor 進行 IEF 的典型工作條件見表13-2和 表 13-3 。正如前文指出的那樣 ,為了使高分子質量的蛋白質更好地進入聚丙烯酰胺膠內,水化時應在膠條兩端加低電壓(30~50 V ) ,否則將給水化上樣造成困難[ 15,28] 。然后電壓逐步升高至 8000 V。如果 IP