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    冰凍組織制備及切片實驗

    實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟1. 將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2. 在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。 3. 保證CryoKwik 呈液狀(必要的話,通過接觸一熱的金屬棒使其熔化),將樣品浸于冷的CryoKwik 中1 min。 4. 置帶樣品的濾紙條于冰凍切片儀的樣品槽中,并固定在有一薄層OCT化合物的切片托盤上。圖一、切片程序5. 將冰凍切片儀中的樣品切片托盤放入預冷的加熱槽中或CO2噴射型冰凍器中冰凍,直至OCT化合物凝結,并在冰凍切片儀中放置10 min 以上,使溫度均衡。6. 用一預冷的剃須切片,將樣品塊修成梯形(在不會影響樣品形態情況下),撕去濾紙。7......閱讀全文

    冰凍組織制備及切片實驗

    實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟1. ?將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2. ?在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。?3. ?保證C

    冰凍組織制備及切片實驗

    實驗材料?冰凍組織試劑、試劑盒?異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材?濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟?1.? 將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2.? 在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。?3.?

    組織病理實驗_冰凍切片

    組織病理實驗廣泛應用于生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等實驗方法原理冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等

    冰凍切片固定實驗

    實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 PFAPBS乙醇儀器、耗材 加濕盒實驗步驟 1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2. ?吸去固定液,用毛細吸管或用噴水瓶以3×PBS沖冼切片,

    冰凍切片固定實驗

    實驗方法原理原位雜交中所用冰凍切片必須用多聚甲醛固定,然后再脫水。實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PFAPBS乙醇儀器、耗材加濕盒實驗步驟1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2.

    實驗技術:組織切片的制備

    【目的】組織標本必須首先被制成組織切片,再經過染色處理,然后才能在顯微鏡下進行臨床診斷和科學研究。【原理】蘇木素染色結合伊紅染色是常規組織學染色技術,也稱為H & E染色。蘇木素是堿性染色,細胞核被染成深紫或蘭色,常用作核染色;伊紅是酸性染色,細胞漿染呈紅色,常用作胞漿染色。【材料】1.試劑和溶液(

    冰凍切片實驗技巧(四):脂肪組織的處理

    脂肪組織無疑是冰凍切片者的絆腳石,道理很簡單脂肪不會結冰,把溫度降低讓脂肪變硬可以切出較薄的片子,但是這個溫度對同一組織中的其他成分來說顯得太低而不合適切片,當脂肪破碎影響切片時這個問題就變得明顯,下面是一些我的經驗總結。1.盡可能的削掉不需要的脂肪組織當我準備切淋巴結時,我會先檢查一遍,小心翼翼地

    冰凍切片前的組織怎樣保存

    冰凍切片是不需要固定的,冰凍切片新鮮取材后,應立刻放入冰凍切片機內切片。如不能立即切片,要放入液氮中速凍,然后放在-70度低溫冰箱內長期保存抗原性不會丟失。在手術臺上取下的組織放到冷凍機里面-20度左右凍成硬塊,制成切片用于快速診斷,該診斷僅作參考,應以石蠟診斷為主。

    冰凍切片前的組織怎樣保存

    冰凍切片組織可先固定后凍存,也可直接凍存,直接凍存一般采取液氮中速凍,然后轉入-20度保存,凍存組織應避免反復凍融,且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉),影響形態學觀察。

    冰凍切片前的組織怎樣保存

    冰凍切片組織可先固定后凍存,也可直接凍存,直接凍存一般采取液氮中速凍,然后轉入-20度保存,凍存組織應避免反復凍融,且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉),影響形態學觀察。

    石蠟切片、冰凍切片及振動切片的區別

    一、石蠟切片??? 把修好的蠟塊裝在旋轉切片機上,即可進行切片(section)。切片必須保持切片刀銳利,切片厚度通常為5~7um,也可根據染色需要切成不同厚度,一般不旋轉式切片機超過10um。切好的蠟帶,放人40℃左右的溫水中將蠟片展平。良好的切片應無刀痕、裂痕,切片厚度均一平整。切片如有上述

    冰凍切片

    實驗概要冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。實驗步驟1. 冷凍切片的制作方法??? 1) 將恒冷箱冷凍切片機的速凍頭和箱內溫度調整到適宜的切溫度,一般情況下為-18~-25℃。??? 2) 在標本冷凍托上涂布一層冷凍包埋劑——OCT

    組織芯片的制備——冰凍組織芯片

    實驗材料新鮮組織試劑、試劑盒OCT 包埋劑切片黏合劑儀器、耗材1 mm 孔徑針載玻片實驗步驟將每個需要制備 TMA 的新鮮組織,不經固定包埋在 OCT 包埋劑中, -20℃ 中凍成塊。另外,再將 OCT 包埋劑倒在長 3 cm×寬 1.5 cm×高 lcm 的模具中, -20℃ 中凍成塊。用特制的

    組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片

    二者應該都是可以的,具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,OCT包埋劑等等),石蠟片的制作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容

    石蠟切片與冰凍切片

    一、組織和細胞標本類型:(一) 組織標本類:1、 石蠟切片:組織形態保存好2、 冰凍切片:抗原性保存好(二)細胞標本類:1、組織印片 2、細胞培養片(細胞爬片) 3、細胞涂片二、組織取材1、腦組織和神經組織應采用灌注固定后,再進行后固定。2、組織取材注意事項:(1)標本新鮮:組織要求離體后30min

    冰凍切片的原位雜交實驗

    細胞RNA的原位雜交實驗用于在混雜的細胞群體和組織中、定位特異的mRNA在細胞中的存在位置。冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷。實驗材料冰凍切片試劑、試劑盒Tris·

    冰凍切片的原位雜交實驗

    實驗材料 冰凍切片試劑、試劑盒 Tris·ClEDTA甘氨酸PBSSSC乙醇甲酰胺硫酸葡聚糖DTTNaCl儀器、耗材 加濕盒水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?從冰箱中取出載玻片,平衡至室溫,再打開玻片盒。置載玻片于架中,浸泡于以50 mmol/l Tris·Cl(pH7.5)/5 mmol/l EDTA

    冰凍切片的原位雜交實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 冰凍切片 試劑、試劑盒

    冰凍切片免疫熒光實驗步驟

    1.組織用4%多聚甲醛固定6-8小時,轉至20%蔗糖溶液至組織沉底。2.冰凍切片8-10μm,推薦瑞沃德冷凍切片機,溫度穩定,切片質量高。室溫放置30分鐘以上防脫片,-20℃保存。從冰箱拿出的冰凍切片在室溫放置30分鐘以上再進行免疫熒光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分鐘。4.用2%BSA室溫或3

    冰凍切片免疫熒光實驗步驟

    1.組織用4%多聚甲醛固定6-8小時,轉至20%蔗糖溶液至組織沉底。2.冰凍切片8-10μm,推薦瑞沃德冷凍切片機,溫度穩定,切片質量高。室溫放置30分鐘以上防脫片,-20℃保存。從冰箱拿出的冰凍切片在室溫放置30分鐘以上再進行免疫熒光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分鐘。4.用2%BSA室溫或3

    振動切片方法及與石蠟、冰凍切片的比較

    振動切片用振動切片機,可以把新鮮組織(不固定不冰凍)切成厚片20~10μm,以漂浮法在反應板進行免疫組織化學染色,然后在解剖顯微鏡下檢出免疫反應陽性部位,修整組織進行后固定,最后按電鏡樣品制備、脫水、包埋、超薄切片、染色觀察等。組織不冰凍,無冰晶形成和組織抗原破壞,在免疫組化染色前避免了組織脫水、透

    腦組織冰凍切片的步驟和注意事項

    1.固定。大鼠或小鼠灌注取腦,取腦后用多聚甲醛浸泡固定,即能達到沖洗的目的,又不損害組織。2.脫水。先后用15%,20%,30%的PB蔗糖溶液 進行腦組織梯度脫水,腦組織沉下去就是脫水好了。3.冰凍切片,推薦瑞沃德冷凍切片機。取出腦組織,用OCT膠包埋,一層層的包埋,注意:不能有氣泡,否則營銷切片;

    冷凍組織及切片的準備實驗

    為了獲得較好的結果,應當用新鮮的組織,因為在-80°C 中保存超過 24 h 的樣品,其RNA 的產量和完整性將大打折扣。盡管有幾個實驗小組曾經報道用 LCM 技術從石蠟包埋的組織中獲得了沒有降解的 RNA, 但作者還是推薦使用冷凍的組織塊。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮

    冷凍組織及切片的準備實驗

    實驗材料 新鮮的組織試劑、試劑盒 丙酮 蒸餾水 干冰磷酸鹽緩沖液(PBS) Tek OCT 組織復合物儀器、耗材 封閉容器燒杯 恒冷裝置 解剖工具 平盤組織模子載玻片刀片實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑丙酮蒸餾水干冰磷酸鹽緩沖液(PBS)Tek OCT 組織復合物(Sakura Finet

    冷凍組織及切片的準備實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 新鮮的組織 試劑、試劑盒 丙酮 蒸餾水 干冰 磷酸鹽緩沖液(PBS

    冰凍切片的應用

      (1)在手術進行中,突然發現病人的病變與原診斷,原定手術方案不相符合,或者懷疑時,需要病理確定。  (2)了解淋巴結內是否有轉移的腫瘤細胞,或者轉移的程度,以利于確定是否需要徹底掃除淋巴結或者其它的治療措施。  (3)對于已確定為惡性腫瘤的患者,則需要了解其手術范圍是否足夠,上下切緣是否有殘存的

    冰凍切片的定義

      冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷。冰凍切片的種類較多,有低溫恒冷箱冰凍切片法,二氧化碳冰凍切片法,甲醇循環制冷冰凍切片法等。這些方法,隨著時代的變遷,科技的發展

    GFP骨的冰凍切片實驗方法

    Protocol for Frozen section of GFP Bone:Fix the bone in 4% Paraformaldehyde at 4?C under constant agitation for 3 days.Decalcification in 14% EDTA sol

    冰凍切片實驗技巧(三)-學會看片子

    這里指的是片子滑過刀片時就要辨別出質量的好壞,如果到鏡下才發現片子的缺陷那就無法挽救。1. 觀察片子的厚薄盡管冰凍切片機可以設置厚度,但人為辨別片子的厚度是否合適仍然很重要。片子太薄看起來象半透明的鏡紙,片子太厚看起來混濁、柔性差,對我來說,5-6um的片子較合適,象一張薄的打印紙。 2. 片子破裂

    石蠟切片和冰凍切片的比較

    (1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時不需抗原修復這一步。缺點是細

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