冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材 濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟 1. 將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2. 在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。 3. 保證CryoKwik 呈液狀(必要的話,通過接觸一熱的金屬棒使其熔化),將樣品浸于冷的CryoKwik 中1 min。 4. 置帶樣品的濾紙條于冰凍切片儀的樣品槽中,并固定在有一薄層OCT化合物的切片托盤上。5. 將冰凍切片儀中的樣品切片托盤放入預冷的加熱槽中或CO2噴射型冰凍器中冰凍,直至OCT化合物凝結,并在冰凍切片儀中放置10 min 以上,使溫度均衡。6. 用一預冷的剃須切片,將樣品塊修成梯形(在不會......閱讀全文
組織芯片的制備——冰凍組織芯片
實驗材料新鮮組織試劑、試劑盒OCT 包埋劑切片黏合劑儀器、耗材1 mm 孔徑針載玻片實驗步驟將每個需要制備 TMA 的新鮮組織,不經固定包埋在 OCT 包埋劑中, -20℃ 中凍成塊。另外,再將 OCT 包埋劑倒在長 3 cm×寬 1.5 cm×高 lcm 的模具中, -20℃ 中凍成塊。用特制的
組織病理實驗_冰凍切片
組織病理實驗廣泛應用于生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等實驗方法原理冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料?冰凍組織試劑、試劑盒?異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材?濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟?1.? 將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2.? 在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。?3.?
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟1. ?將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰凍,燒杯中加CryoKwik(或異戊烷)。2. ?在濾紙條一端以鉛筆注明標簽,用鑷子將樣品放于另一端。?3. ?保證C
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片是不需要固定的,冰凍切片新鮮取材后,應立刻放入冰凍切片機內切片。如不能立即切片,要放入液氮中速凍,然后放在-70度低溫冰箱內長期保存抗原性不會丟失。在手術臺上取下的組織放到冷凍機里面-20度左右凍成硬塊,制成切片用于快速診斷,該診斷僅作參考,應以石蠟診斷為主。
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片組織可先固定后凍存,也可直接凍存,直接凍存一般采取液氮中速凍,然后轉入-20度保存,凍存組織應避免反復凍融,且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉),影響形態學觀察。
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片組織可先固定后凍存,也可直接凍存,直接凍存一般采取液氮中速凍,然后轉入-20度保存,凍存組織應避免反復凍融,且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉),影響形態學觀察。
冰凍組織固定和蔗糖浸制實驗
實驗方法原理 實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 PBSPFA蔗糖實驗步驟 1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫組織化學時)或4%PFA固定液(做原位雜交時) 中,固定小的組織樣品或分離的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗組織樣品2次。3. 在30%蔗糖中浸制樣品,直
冰凍組織固定和蔗糖浸制實驗
實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PBSPFA蔗糖實驗步驟1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫組織化學時)或4%PFA固定液(做原位雜交時) 中,固定小的組織樣品或分離的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗組織樣品2次。3. 在30%蔗糖中浸制樣品,直至組織沉下(1~3
冰凍切片實驗技巧(四):脂肪組織的處理
脂肪組織無疑是冰凍切片者的絆腳石,道理很簡單脂肪不會結冰,把溫度降低讓脂肪變硬可以切出較薄的片子,但是這個溫度對同一組織中的其他成分來說顯得太低而不合適切片,當脂肪破碎影響切片時這個問題就變得明顯,下面是一些我的經驗總結。1.盡可能的削掉不需要的脂肪組織當我準備切淋巴結時,我會先檢查一遍,小心翼翼地
腦組織冰凍切片的步驟和注意事項
1.固定。大鼠或小鼠灌注取腦,取腦后用多聚甲醛浸泡固定,即能達到沖洗的目的,又不損害組織。2.脫水。先后用15%,20%,30%的PB蔗糖溶液 進行腦組織梯度脫水,腦組織沉下去就是脫水好了。3.冰凍切片,推薦瑞沃德冷凍切片機。取出腦組織,用OCT膠包埋,一層層的包埋,注意:不能有氣泡,否則營銷切片;
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
二者應該都是可以的,具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,OCT包埋劑等等),石蠟片的制作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容
冰凍血漿和新鮮冰凍血漿區別
新鮮冷凍血液與一般冷凍血液的差別取決于規定的標準不一樣。新鮮冷凍血液在有限的時間與溫度下產生,而一般冷凍血液在保存期內當然沉定而成。抗凝全血于6-8鐘頭以內在4℃標準下抽濾將血液分離出來,并快速在-30℃下列冷凍成塊,即是新鮮冷凍血液,冷凍情況一直持續到應用以前,有效期限為1年,產品內帶有所有的凝血
冰凍切片
實驗概要冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。實驗步驟1. 冷凍切片的制作方法??? 1) 將恒冷箱冷凍切片機的速凍頭和箱內溫度調整到適宜的切溫度,一般情況下為-18~-25℃。??? 2) 在標本冷凍托上涂布一層冷凍包埋劑——OCT
冰凍蝕刻的冰凍蝕刻原理
冰凍蝕刻(freeze-etching)亦稱冰凍斷裂(freeze-fracture)。標本置于-100?C的干冰或-196?C的液氮中,進行冰凍。然后用冷刀驟然將標本斷開,升溫后,冰在真空條件下迅即升華,暴露出斷面結構,稱為蝕刻(etching)。蝕刻后,向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑,再以90度
冰凍蝕刻的冰凍蝕刻原理
冰凍蝕刻(freeze-etching)亦稱冰凍斷裂(freeze-fracture)。標本置于-100?C的干冰或-196?C的液氮中,進行冰凍。然后用冷刀驟然將標本斷開,升溫后,冰在真空條件下迅即升華,暴露出斷面結構,稱為蝕刻(etching)。蝕刻后,向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑,再以90度
冰凍蝕刻的冰凍蝕刻原理
冰凍蝕刻(freeze-etching)亦稱冰凍斷裂(freeze-fracture)。標本置于-100?C的干冰或-196?C的液氮中,進行冰凍。然后用冷刀驟然將標本斷開,升溫后,冰在真空條件下迅即升華,暴露出斷面結構,稱為蝕刻(etching)。蝕刻后,向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑,再以90度
冰凍切片組織蛋白酶B(CATHEPSIN-B)活性原位熒光染色檢...
主要用途冰凍切片組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位熒光染色檢測試劑是一種旨在通過熒光染料甲酚紫標記的多肽底物作為探針,自由進入細胞內,受到組織蛋白酶B水解后,呈現熒光現象,以分析樣品酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種冰凍組織內組織蛋白酶B的
冰凍切片組織馮庫薩(VON-KOSSA)染色試劑盒使用說明
主要用途冰凍切片組織馮庫薩(VON KOSSA)染色試劑是一種旨在使用銀還原技術,分析固定處理的組織細胞樣本中鈣沉積現象的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良VON KOSSA方法、成功實驗證明的。主要適用于冰凍切片的組織鈣沉積和鈣化結節檢測;同時也適合動物原生代或培養細胞的檢測。廣泛用
冰凍切片組織馮庫薩(VON-KOSSA)染色試劑盒使用說明
冰凍切片組織馮庫薩(VON KOSSA)染色試劑盒產品說明書(中文版) 主要用途 冰凍切片組織馮庫薩(VON KOSSA)染色試劑是一種旨在使用銀還原技術,分析固定處理的組織細胞樣本中鈣沉積現象的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良VON KOSSA方法、成功實驗證明的。主要適用
冰凍切片固定實驗
實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 PFAPBS乙醇儀器、耗材 加濕盒實驗步驟 1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2. ?吸去固定液,用毛細吸管或用噴水瓶以3×PBS沖冼切片,
冰凍切片的定義
冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷。冰凍切片的種類較多,有低溫恒冷箱冰凍切片法,二氧化碳冰凍切片法,甲醇循環制冷冰凍切片法等。這些方法,隨著時代的變遷,科技的發展
冰凍切片的應用
(1)在手術進行中,突然發現病人的病變與原診斷,原定手術方案不相符合,或者懷疑時,需要病理確定。 (2)了解淋巴結內是否有轉移的腫瘤細胞,或者轉移的程度,以利于確定是否需要徹底掃除淋巴結或者其它的治療措施。 (3)對于已確定為惡性腫瘤的患者,則需要了解其手術范圍是否足夠,上下切緣是否有殘存的
如何運輸冰凍細胞
干冰保存就可以吧,快遞公司有這種業務;之前做過把細胞復蘇后,將培養瓶灌滿培養液包好直接帶走,不過時間不能太長
冰凍切片固定實驗
實驗方法原理原位雜交中所用冰凍切片必須用多聚甲醛固定,然后再脫水。實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PFAPBS乙醇儀器、耗材加濕盒實驗步驟1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2.
中國冰凍圈科學大會探索減緩冰凍圈影響科學對策
第一屆中國冰凍圈科學學術大會日前在京召開。會議以“冰凍圈變化、影響與可持續發展”為主題,探討了冰凍圈的變化機理以及對全球和區域氣候、環境的影響,并探索減緩和適應冰凍圈影響的技術和科學對策。 冰凍圈科學委員會主席秦大河介紹說,2000年世界氣候研究計劃專門啟動了新的核心計劃——氣候與冰凍圈計劃,
冰凍切片組織蛋白酶B活性原位熒光染色檢測試劑盒
冰凍切片組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位熒光染色檢測試劑盒產品說明書(中文版) 主要用途 冰凍切片組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位熒光染色檢測試劑是一種旨在通過熒光染料甲酚紫標記的多肽底物作為探針,自由進入細胞內,受到組織蛋白酶B水解后,呈現熒光現象,
冰凍切片的制作技巧
這個主要看組織固定包埋技術和冰凍切片機性能吧,固定包埋因人而異,因為需要快速出診斷報告,這一點要求切片機的速凍效果好,機器能馬上進入工作狀態。這一點我覺得深圳瑞沃德廠家的冰凍切片機設計的很好,可以上班前自動喚醒(無需人員手動),上班了,機器也就可以馬上進入工作狀態。樣本快速制冷,2-3分鐘就可以了
徠卡冰凍超薄切片技術
?徠卡冰凍超薄切片技術是使樣品迅速冷凍,然后用冷凍切片機進行徠卡冷凍超薄切片。它省去了普通超簿切片法中繁雜的化學固定與包埋操作,在細胞化學研究中有著特殊的用途。為了很好保存形態結構,必須使游離水形成玻璃態的冰,防止產生冰晶。這就要求很高的冰凍速率(~度/秒),這對于傳熱性能差的生物材料來說是困難的。
怎么切好冰凍切片
冰凍組織的取材,就是選擇好合適的組織塊,放在一個小的金屬托上進行速凍,凍到一定的硬度后,就在病理切片機進行切片。然后將切片放入酒精或者專有的固定液里固定,最后進行相應的染色及封片。再蓋上蓋玻片,貼上病理號標簽,這樣一張冰凍切片就制作完成了。