新鮮實體組織樣本的制備(機械法)——研磨法
實驗方法原理機械法分散實體組織。用手術剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿,再用細注射針頭抽吸細胞或用 300 日尼龍網濾出單細胞懸液;采用網搓法也能獲得大量細胞。機械法易造成細胞碎片和細胞團塊,所以常與其他方法配合使用。實驗材料組織試劑、試劑盒生理鹽水儀器、耗材研磨器尼龍網實驗步驟1. 先將組織剪成 1~2 mm3 大小組織塊。2. 放入組織研磨器中加入 1~2 ml 生理鹽水。3. 轉動研棒,研至勻漿。4. 加入 10 ml 生理鹽水,沖洗研磨器。5. 收集細胞懸液,并經 300 目尼龍網過濾,離心沉淀 500~800 r/min,1~2 min,再以生理鹽水洗 3 遍,離心沉淀。6. 固定或低溫保存細胞懸液,備用。展開......閱讀全文
新鮮實體組織樣本的制備(機械法)——研磨法
實驗方法原理機械法分散實體組織。用手術剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿,再用細注射針頭抽吸細胞或用 300 日尼龍網濾出單細胞懸液;采用網搓法也能獲得大量細胞。機械法易造成細胞碎片和細胞團塊,所以常與其他方法配合使用。實驗材料組織試劑、試劑盒生理鹽水儀器、耗材研磨器尼龍網實
新鮮實體組織樣本的制備(機械法)
剪碎法網搓法研磨法實驗方法原理機械法分散實體組織。用手術剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿,再用細注射針頭抽吸細胞或用 300 日尼龍網濾出單細胞懸液;采用網搓法也能獲得大量細胞。機械法易造成細胞碎片和細胞團塊,所以常與其他方法配合使用。實驗材料組織 ? ? ? ? ?
新鮮實體組織樣本的制備(機械法)——網搓法
實驗方法原理機械法分散實體組織。用手術剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿,再用細注射針頭抽吸細胞或用 300 日尼龍網濾出單細胞懸液;采用網搓法也能獲得大量細胞。機械法易造成細胞碎片和細胞團塊,所以常與其他方法配合使用。實驗材料組織儀器、耗材尼龍網實驗步驟1. 將 100 目
新鮮實體組織樣本的制備(機械法)_剪碎法
實驗方法原理機械法分散實體組織。用手術剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿,再用細注射針頭抽吸細胞或用 300 日尼龍網濾出單細胞懸液;采用網搓法也能獲得大量細胞。機械法易造成細胞碎片和細胞團塊,所以常與其他方法配合使用。實驗材料組織酶試劑、試劑盒生理鹽水儀器、耗材剪刀尼龍網實
新鮮實體組織樣本的制備(酶消化法)
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面:① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等;② 可以水解組織間的黏多糖等物質;③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織酶儀器、耗材試管離心管尼龍網實驗步驟1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~2 ml
新鮮實體組織樣本的制備(酶消化法)
實驗方法原理 對實體組織分散的作用原理主要有3個方面:① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等;② 可以水解組織間的黏多糖等物質;③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料 組織酶儀器、耗材 試管離心管尼龍網實驗步驟 1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~
新鮮實體組織樣本的制備(酶消化法)
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面:① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等;② 可以水解組織間的黏多糖等物質;③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
新鮮實體組織樣本的制備(化學處理法)
實驗方法原理化學處理法是將組織細胞間起黏著作用的鈣、鎂離子置換出來,從而使細胞分散開來。實驗材料胰酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
新鮮實體組織樣本的制備(化學處理法)
實驗方法原理化學處理法是將組織細胞間起黏著作用的鈣、鎂離子置換出來,從而使細胞分散開來。實驗材料胰酶組織試劑、試劑盒EDTA儀器、耗材尼龍網實驗步驟一、試劑的配制1. 0.2% EDTA 配制:稱 EDTA 0.2 g,加入 Hank 液 100 ml,封裝高壓消毒。置 0~4℃ 保存。2. 胰酶加
如何制備新鮮實體組織單細胞懸液
流式細胞術對細胞的各種參數分析必須基于單細胞的基礎上,根據不同實體組織成分的特點可選擇不同的分散細胞的方 法,以期達到單細胞產量高、細胞損傷小的目的。在實體組織分散為單細胞的過程中,解離的方法有可能瞬間或持久地影響細胞的性質,比如,形態上顯而易見的細 胞膜破損,細胞表面上可出現泡狀特征,還有一些是難
組織的分離實驗_機械分散法
試劑、試劑盒Hanks儀器、耗材鑷子網篩碟皿吸管注射器培養瓶實驗步驟一、切割分離法在進行組織塊培養時,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的塊。具體操作如下:1. ?無菌切取1 cm3組織一塊,置入青霉素瓶或小燒杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或彎剪(剪柄較長為好)伸入容器中,反復剪切組織至1
酵母蔗糖酶的制備實驗——研磨法
蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特異地催化非還原糖中的α-呋喃果糖苷鍵水解, 具有相對專一性。不僅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉
石蠟包埋組織樣本的制備
實驗材料組織胰蛋白酶試劑、試劑盒二甲苯乙醇生理鹽水儀器、耗材尼龍網實驗步驟1. 把石蠟包埋組織切成 40~50 μm 厚的組織片 3~5 片,或用乳缽研成 0.5 mm 直徑大小顆粒狀,放入 10 ml 的試管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 時,在室溫下脫蠟 1~2 d,視石蠟脫凈與否,更換 1
石蠟包埋組織樣本的制備
實驗材料 組織胰蛋白酶試劑、試劑盒 二甲苯乙醇生理鹽水儀器、耗材 尼龍網實驗步驟 1. 把石蠟包埋組織切成 40~50 μm 厚的組織片 3~5 片,或用乳缽研成 0.5 mm 直徑大小顆粒狀,放入 10 ml 的試管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 時,在室溫下脫蠟 1~2 d,視石蠟脫凈與否,
流式細胞術的樣品制備(七種樣品的制備方法)(一)
流式細胞術的樣品制備流式細胞術的實驗檢測對象是單細胞懸液,因此需把樣品制備成細胞懸液,細胞濃度為105~107個/ml。制備成的單細胞懸液經熒光或免疫熒光標記即可上機檢測。樣本制備的基本原則:1.使各種液體和懸浮細胞樣本新鮮,盡快完成樣本制備和檢測;2.針對不同的細胞樣本進行適當洗滌、酶消化或EDT
離子研磨儀的截面研磨法
截面研磨法是在樣品和離子槍之間安裝一個遮擋板,使樣品局部突出遮擋板邊緣,然后用離子束照射樣品。沿遮擋板邊緣濺射突出邊緣的部分,由此可獲得切割均勻的截面。使樣品突出遮擋板數十微米至100微米,并以±15~40°旋轉樣品桿,以防產生離子研磨痕跡(細條紋)。截面研磨普遍適用于塊狀樣品和多層結構等機械研
離子研磨儀的平面研磨法簡介
平面研磨法是將氬離子束傾斜照射到樣品表面,并將氬離子束中心和樣品旋轉中心進行偏心調整,實現廣域加工的方法3) 。氬離子束的照射角度(θ)可設置為0°~90°4) 。當照射角度≥80°時,離子束照射角度與樣品加工面近乎平行,因此,可以減少由于晶體取向和成分蝕刻速率差造成的凹凸不平,形成相對平滑的加
實驗動物組織標本的制備實驗_解剖法
通常選用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等動物,禁食24 小時。擊頭致昏,以避免麻醉或失血對胃腸道機能的影響。立即打開腹腔,取出所需的胃、腸、膽囊等。去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2?)保溫(37 ℃)的營養液中,并以注射器用營養液將管腔內的食物殘渣清洗干凈。實驗材料家兔
蛋白質印跡法所需樣本的制備方法
1、單層貼壁細胞總蛋白的提取:(1)倒掉培養液,并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養液(或將瓶直立放置一會兒使殘余培養液流到瓶底然后再用移液器將其吸走)。(2)每瓶細胞加3ml 4℃預冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放輕輕搖動1min洗滌細胞,然后棄去洗液。重復以上操作兩次,共洗細胞
苯酚法鑒別糧食新鮮好壞
1 原理 新鮮糧食酶的活性很強,隨著儲存時間增長,酶的活性逐漸降低,可用酶的活性來判斷糧食新鮮程度。該法利用鄰甲氧基苯酚在過氧化氫存在的條件下,與新鮮的氧化還原酶作用,生成紅色的四聯鄰甲基苯酚,陳糧則不顯色。 2 試劑 1% 鄰甲氧基苯酚溶液:取鄰甲氧基苯酚用蒸餾100 倍稀釋。3% 過氧化氫
機械法分離葉綠體
一、原理研磨葉片得到的勻漿,經過濾、離心可制備葉綠體。葉綠體的被膜比較脆弱,分離葉綠體應在等滲的緩沖溶液中,0~4℃溫度下進行。葉綠體活力會隨著離體時間延長而不斷下降,因此,分離工作盡可能在短時間內完成。二、儀器與用具冰箱;離心機;扭力天平;顯微鏡;pH計;研缽;量筒;移液管;離心管;脫脂紗布等。分
組織和細胞RNA的制備——(異硫氰酸胍法)
[試劑主要]1.CSB緩沖液:42mM檸檬酸鈉;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸鈉);0.2 mM β-巰基乙醇。2.變性液:異硫氰酸胍(終濃度 4 M)25g、CSB緩沖液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助溶。4℃保存備用。3.2 M乙酸鈉:pH 4
高通量組織研磨儀的酵母制備過程
? ? 酵母是單細胞真菌,它可以將糖發酵成酒精和二氧化碳,常被人們作為發酵劑,可用于釀造生產。為了研究酵母的品質和安全性,實驗人員也會開展各種檢測實驗,但在此之前,實驗人員會對酵母進行研磨,以便提取其中的DNA/RNA,以條形酵母為例,它是將酵母通過小孔注入到裝有液體氮的氣罐中壓縮制成的,其研磨過
流式細胞術的樣品制備
樣本制備的基本原則:1.使各種液體和懸浮細胞樣本新鮮,盡快完成樣本制備和檢測;2.針對不同的細胞樣本進行適當洗滌、酶消化或EDTA處理,以清除雜質,使粘附的細胞彼此分離而形成單細胞狀態;3.對新鮮實體瘤組織可選用或聯用酶消化法,機械打散法和化學分散法來獲得足夠數量的單細胞懸液;4.對石蠟包埋組織應先
寶予德HF-extract高通量組織研磨儀在樣本研磨上的應用
早在2019年12月之前,新冠病毒可能已經在人群“隱秘傳播”(cryptic spread)階段發生了一些關鍵突變。也就是說,這種新型病毒在人群中出現的時間可能比設想的更早,甚至不一定最早出現在武漢。上述推測結論來自兩位病毒學專家:澳大利亞悉尼大學瑪麗·巴希爾傳染病和生物安全研究所的愛德華·霍爾姆斯
從實體組織中制備粗微體實驗
實驗材料 雄大鼠試劑、試劑盒 蔗糖蔗糖HM儀器、耗材 玻璃板實驗步驟 1. 用斷頸法殺死約 150 g 重的雄大鼠,大鼠的數量取決于要制備的粗微體的數量。由于一個 150 g 重的大鼠肝(6 g)大約每克肝蛋白含有 10 mg 粗微體,所以大鼠的數量可以以回收率為 50% 來進行估計。2. 流干血液
從實體組織中制備粗微體實驗
從大鼠肝臟制備微體從狗的胰臟中制備粗微體實驗材料雄大鼠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒蔗糖 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
從實體組織中制備粗微體實驗
從大鼠肝臟制備微體 從狗的胰臟中制備粗微體 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 雄大鼠 試
肉品新鮮度的快速檢驗法
1.pH值的檢驗方法 用清潔干凈的刀將瘦肉沿與肌纖維垂直的方向橫斷切割,但不將肉塊完全切斷。撕下一條pH試紙,以其長度的三分之二緊貼肉面,合攏剖面,緊緊夾住試紙5分鐘;或將pH值試紙浸入被檢肉的浸出液當中數秒鐘;然后取出試紙與標準色板比較,直接讀取pH的近似數值。本法的精密度在pH
植物組織制備基因組DNA實驗——CTAB法
實驗方法原理加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部, 從而達到提取的目的。實驗材料植物組織試劑、試劑盒CTAB液2-疏基乙醇TE高鹽TE氯仿異戊醇儀器、耗材研缽離心機培養箱實驗步驟1. ?在所需量