新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織 酶 ......閱讀全文
關于酶消化法的胰蛋白酶消化的基本介紹
1、加入消化液：小心吸出舊培養液，用PBS清洗（沖洗），加入適量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以蓋住細胞最好，在37℃培養箱消化2min。 2、顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若細胞質回縮，細胞間不再連接成片，表明此時細胞消化適度。 3、加入培養液：更換吸管，加入新鮮的培養
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的，所用膠原酶有不同類型：1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞，用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的，所用膠原酶有不同類型：1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞，用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
蛋白復合體直接酶消化法
Direct Enzymatic Digestion of Protein ComplexesSherry Niessen, Ian McLeod and John R. Yates IIIDepartment of Cell Biology, The Scripps Research Instit
細胞純化酶消化法的方法介紹
酶消化法是比較常用的純化方法，不僅對貼壁細胞可行，能利用上皮細胞和成纖維細胞對胰蛋白酶的耐受性不同，使兩者分開，達到純化的目的，對貼壁細胞與半貼壁及粘附細胞間的分離純化也是十分有效的。
細胞人工純化的酶消化法介紹
酶消化法是比較常用的純化方法，不僅對貼壁細胞可行，能利用上皮細胞和成纖維細胞對胰蛋白酶的耐受性不同，使兩者分開，達到純化的目的，對貼壁細胞與半貼壁及粘附細胞間的分離純化也是十分有效的。 (1)上皮細胞與成纖維細胞的分離純化 兩者在胰蛋白酶的作用下，由于成纖維細胞先脫壁，而上皮細胞要消化相當長
酶法組織消化技術：從粗制的膠原酶到高純度消化產品一
酶法組織消化中常用的膠原酶（Collagenase），能特異性地降解胞外膠原蛋白，使膠原蛋白和纖維粘連蛋白的網狀結構解離，而不損壞細胞表面結構的完整性。由于細胞外基質的成分復雜，除膠原蛋白外，還含有彈性蛋白，糖蛋白等其他大分子結構。而且不同組織類型，不同物種來源，不同年齡的組織中胞外基質組份不同。所
酶法組織消化技術：從粗制的膠原酶到高純度消化產品二
羅氏高純度研究級別酶混合物Liberase Research Grade Enzyme BlendsLiberase Research Grade Enzyme Blends包含了一系列酶混合物，它們由不同比例的中性蛋白酶（非梭菌蛋白酶）和高純度Collagenase I + Collage
酶消化法的實驗前準備相關介紹
1、預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。準備離心管、吸管，紫外線30min消毒超凈工作臺。 2、用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。 3、正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染。 4、點燃酒精燈，
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以：（1）獲得神經膠質細胞；（2）用于神經膠質細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，并能分泌多種神
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織酶儀器、耗材試管離心管尼龍網實驗步驟1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~2 ml
細胞原代培養實驗——胰酶消化法
細胞原代培養可以：（1）為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；（2）為傳代培養創造條件；（3）服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理 對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料 組織酶儀器、耗材 試管離心管尼龍網實驗步驟 1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以：（1）獲得神經膠質細胞；（2）用于神經膠質細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，并能分泌多種神
腫瘤細胞原代培養實驗——酶消化法
實驗方法原理本法是利用成纖維細胞對膠原酶較為敏感的特點，通過消化進行選擇。可用0.5mg/ml的膠原酶消化處理，邊消化邊在倒置顯微鏡下窺視，當發現成纖維細胞被除掉后，即終止消化；用Hanks洗滌處理一次后，更換新培養液，繼續培養，可獲純凈腫瘤細胞。如成纖維細胞未被除凈，可再次重復。實驗材料組織試劑、
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
組織的分離實驗_胰蛋白酶消化消化分離法
實驗方法原理胰蛋白酶適于消化細胞間質較小的軟組織，如胚胎組織、羊膜、上皮組織、肝、腎等軟組織，對傳代細胞也非常好。用于消化纖維性組織或較硬的癌組織則較差。Ca2+和Mg2+對胰蛋白酶的活性有一定抑制作用，故需用不含這些離子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用，因此在做細胞傳代時，用胰蛋白酶消
酶消化法從Wharton膠中分離干細胞
試劑和材料：1. 培養基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%熱滅活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；2. PBSA；3. 胰蛋白酶，2.5%；4. 膠原酶A，0.1%用PBSA配制；5. 培養瓶；6. 圓錐形離心管，50ml；7. 剪刀
干消化法與濕消化法的優缺點
1.濕消化法：指在適量的食品樣品中，加入氧化性的強酸，然后在一定溫度條件下反應，破壞食品中的有機物，使待測的無機成分釋放出來，形成不揮發的無機化合物的方法。 優點：有機物分解速度快，加熱溫度較干灰化法低，可減少待測成分的揮發損失。 缺點：試劑用量大，有時空白值比較高，消化過程中會產生大量有害
大鼠星型膠質細胞培養實驗——酶消化法
大鼠星型膠質細胞培養可以：（1）用于神經系統發育、分化及再生等基礎研究；（2）腦缺血預處理上調神經保護蛋白的機制研究；（3）腦損傷和腦疼痛的研究；（4）新蛋白的功能研究。實驗方法原理大鼠星形膠質細胞原代培養后，作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定，應用缺氧D-Hanks'液及缺
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于：（1）細胞保種；（2）用于相應細胞生理、形態學研究；（3）用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置α-MEM生長培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于：（1）細胞保種；（2）用于相應細胞生理、形態學研究；（3）用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置α-MEM生長培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
小鼠肝細胞原代培養實驗——胰酶消化法
小鼠肝細胞原代培養可用于：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS
大鼠星型膠質細胞培養實驗——胰酶消化法
實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培養液儀器、耗材離心管培養箱手術器材實驗步驟一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射，待麻醉后置于手術臺上，酒精棉球消毒皮膚，開腹取出子宮（約12-14個），放入解剖液中，剖開子宮，取出胚胎，放入解剖液中，
神經膠質細胞培養實驗_胰蛋白酶消化法
實驗材料大鼠試劑、試劑盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12儀器、耗材水浴鍋培養箱實驗步驟一、原代培養1. ?選用生后1周的新生大白鼠，用碘酒,酒精棉球消毒，斷頭取其大腦皮層組織。?2. ?解剖顯微鏡下，剝離腦膜，切除大腦髓質部分。?3. ?將大腦皮質在無Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
組織的分離實驗_膠原酶消化分離法
實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶，對膠原有很強的消化作用，適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性，但膠原酶對細胞間質有好的消化作用，可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害，效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性，故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗_酶消化法
大鼠乳鼠成骨細胞培養培養用于：（1）獲得大鼠乳鼠成骨細胞；（2）骨修復的細胞學機制研究。實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨，以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養，采用膠原酶消化法分離成骨細胞，并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快速的細胞原代分離培養
膠原酶消化法—培養臍帶間充質干細胞
人臍帶間充質干細胞具有高度分化潛能，基因穩定、不易突變，不會引起腫瘤；無需配型、無排異，廣泛應用于疾病治療及抗衰老研究。目前，在美容行業及針對亞健康群體的應用，也越來越引人注目。臍帶間充質干細胞臍帶是由包膜、華通氏膠、臍靜脈、臍動脈臍構成。臍帶間充質干細胞存在于華通氏膠中。由于存在數量少，用膠原酶消
大鼠肝星狀細胞原代培養實驗_胰酶消化法
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液
錨定酶消化cDNA實驗
試劑、試劑盒 溶液與緩沖液引物儀器、耗材 試劑盒MPC-EPCR儀Gene PulserII 型系統實驗步驟 實驗方案 A1.通過加入下列物質來消化雙鏈 cDNA2.在 37°C 下消化 lh。3.65°C 孵育 20 min 熱失活限制性酶。4.等體積 PCI 抽提后乙醇沉淀（實驗方案 A, 第