從實體組織中制備粗微體實驗_從大鼠肝臟制備微體
實驗材料雄大鼠試劑、試劑盒蔗糖蔗糖HM儀器、耗材玻璃板實驗步驟1. 用斷頸法殺死約 150 g 重的雄大鼠，大鼠的數量取決于要制備的粗微體的數量。由于一個 150 g 重的大鼠肝（6 g）大約每克肝蛋白含有 10 mg 粗微體，所以大鼠的數量可以以回收率為 50% 來進行估計。2. 流干血液后，打開腹部和胸腔，切取肝，將它們放在盛有冰冷勻漿介質的燒杯中：勻漿介質（HM）：0.5 mol/L 蔗糖1 mmol/L DTT3. 用冰冷 HM 沖洗大鼠肝，將它們放在紙巾上，如果有結締組織去掉之，迅速稱重。4. 將肝放在干凈的玻璃板上，用剃須刀片將其切成盡可能小的碎片，直到形成漿糊樣稠狀物。當肝在小燒杯里用剪刀剪碎時，不加HM 要容易些，因為 HM 妨礙剪切。5. 將切碎的肝放入盛有 4~5 倍體積冰冷 HM 的燒杯中，輕輕混旋，等碎片沉到底部后去掉液體以去除血液。6. 4 倍體積的 HM 在配套寬松的 Dounce 勻漿器（帶兩個研杵......閱讀全文
從實體組織中制備粗微體實驗_從大鼠肝臟制備微體
實驗材料雄大鼠試劑、試劑盒蔗糖蔗糖HM儀器、耗材玻璃板實驗步驟1. 用斷頸法殺死約 150 g 重的雄大鼠，大鼠的數量取決于要制備的粗微體的數量。由于一個 150 g 重的大鼠肝（6 g）大約每克肝蛋白含有 10 mg 粗微體，所以大鼠的數量可以以回收率為 50% 來進行估計。2. 流干血液后，打開
從實體組織中制備粗微體實驗_從狗的胰臟中制備粗微體
實驗材料胰臟試劑、試劑盒HM 緩沖液蔗糖-緩沖液三乙基氨基乙酸緩沖液實驗步驟1. 從動物身體切下胰臟，立即用大約 50 ml 冷 HM 緩沖液沖洗，放置于干凈的紙巾上，去除結締組織：勻漿介質（HM）0.25 mol/L 蔗糖-緩沖液A緩沖液A：50 mmol/L 三乙基氨基乙酸緩沖液（TEA），pH
從實體組織中制備粗微體實驗
實驗材料 雄大鼠試劑、試劑盒 蔗糖蔗糖HM儀器、耗材 玻璃板實驗步驟 1. 用斷頸法殺死約 150 g 重的雄大鼠，大鼠的數量取決于要制備的粗微體的數量。由于一個 150 g 重的大鼠肝（6 g）大約每克肝蛋白含有 10 mg 粗微體，所以大鼠的數量可以以回收率為 50% 來進行估計。2. 流干血液
從實體組織中制備粗微體實驗
從大鼠肝臟制備微體從狗的胰臟中制備粗微體實驗材料雄大鼠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒蔗糖 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
從實體組織中制備粗微體實驗
從大鼠肝臟制備微體 從狗的胰臟中制備粗微體 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 雄大鼠 試
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒環己酰亞胺勻漿緩沖液儀器、耗材培養皿實驗步驟1. 培養基中加入環己酰亞胺（溶于蒸餾水，貯存液濃度 0.1 mol/L，-20℃ 保存。如果不溶，試著加熱到 40℃ 以幫助溶解）（終濃度 10 μmol/L)，37℃ 保溫 5~10 分鐘。2. 培養皿從 37℃ 轉移到冷室，立
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 環己酰亞胺 勻漿緩沖液
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒環己酰亞胺 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?勻漿緩沖液 ? ?
從肝臟組織中制備細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 大鼠 試劑、試劑盒 裂解緩沖液 濃蔗糖溶液
從肝臟組織中制備細胞核實驗
實驗材料大鼠試劑、試劑盒裂解緩沖液濃蔗糖溶液儀器、耗材超速離心機組織研磨器實驗步驟1. 配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解緩沖液：0.25 mol/L 蔗糖網織紅細胞標準緩沖液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超級純）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 植物組織 試劑、試劑盒 Trizol 氯仿 異丙醇 乙醇
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
實驗材料 植物組織試劑、試劑盒 Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態N2NaCl檸檬酸鈉儀器、耗材 轉子-定子均化器研缽和杵圓錐形管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑Trizol(Invitrogen)氯仿異丙醇乙醇，70%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水配制DEPC 處
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
下述方案是經修改過的 Trizol 方案，用于從植物組織中分離 RNA，其中增加了一個高鹽異丙酵沉淀步驟，以選擇性地沉淀 RNA，而將多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料植物組織試劑、試劑盒Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 石蠟包埋的組織樣品 試劑、試劑盒 甲酰胺 消化緩沖液 乙醇 肝糖
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
實驗材料 石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒 甲酰胺消化緩沖液乙醇肝糖異丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯儀器、耗材 微量離心管恒溫箱實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去離子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水消化緩沖液（lmol/L 異硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巰基乙醇
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
該方案是由 Godfrey 等改進 Fisher 的方案發表的。此前已有從固定組織中純化 RNA 的方案發表。Ambion 和 Roche 發明了從石蠟包埋的組織中純化 RNA 的商品化試劑盒。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒甲酰胺
從組織和培養細胞中制備輕線粒體組分
試劑和器材：?1.?勻漿介質：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2.?按要求向溶液加入蛋白酶抑制劑；3.?磷酸鹽緩沖液；4.?低速冷凍離心機，配有30—40ml離心管的吊桶式離心轉子；5.?高速離心機，配有30—40ml離心管
細胞核連綴分析實驗_從組織中制備細胞核
實驗材料動物組織試劑、試劑盒PBS蔗糖儀器、耗材電動勻漿器特氟隆研杵實驗步驟一、用超速離心法從組織中分離細胞核1. 切下動物組織，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 沖洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃須刀片將組織切碎，轉入一個干凈試管中，加蔗糖Ⅰ溶液至終體積為每克組織 10 ml。3. 用
桿狀病毒儲液制備實驗——從單層培養中制備
實驗材料單層培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗——從懸浮培養中制備
實驗材料懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
從熔體中結晶寶石
適宜組分的熔化和結晶是這類合成方法的特點，它主要有四種方法：1.焰熔法焰熔法也稱維爾納葉法。它是維爾納葉在1908年創造完成的，也是合成寶石的第一種商業生產方法。它主要用來生長合成紅寶石、藍寶石、金紅石、尖晶石和鈦酸鍶等。圖10-1-1 維爾納葉爐焰熔法的基本原理是：適宜組分的細粉末落入烈焰之中熔化
氣流粉碎機制備微納米粉體的應用現狀
氣流粉碎機是利用物料在高速氣流的作用下，獲得巨大的動能，在粉碎室中造成物料顆粒之間的高速碰撞、劇烈摩擦，同時高速氣流對物料產生剪切作用，從而達到粉碎物料的目的，它能將原料加工成極細的粉末(
從包涵體中純化表達蛋白
實驗材料 表達靶蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液 I細胞裂解緩沖液Ⅱ脫氧膽酸濃鹽酸包涵體溶解緩沖液 I包涵體溶解緩沖液ⅡKOHPMSFSDS 凝膠加樣緩沖液含尿素的 Tris-ClDNaseI溶菌酶SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材 Sorvall GSA 轉頭或相當的轉頭pH 試紙磨光
從包涵體中純化表達蛋白
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 蛋白質在大腸桿菌中的高水平表達，常常導致形成相差顯微鏡下可見的細胞質顆粒或包涵體。這些由表達蛋白聚集成的包涵體很容易與可溶性蛋白和膜結合蛋白分離。高水平表達外源蛋白的細菌經離心濃縮后，可通過機械法、超聲處理法或溶菌酶加去污劑的方
從包涵體中純化表達蛋白
實驗方法原理蛋白質在大腸桿菌中的高水平表達，常常導致形成相差顯微鏡下可見的細胞質顆粒或包涵體。這些由表達蛋白聚集成的包涵體很容易與可溶性蛋白和膜結合蛋白分離。高水平表達外源蛋白的細菌經離心濃縮后，可通過機械法、超聲處理法或溶菌酶加去污劑的方法進行裂解。包涵體經離心沉淀后，可用Triton X-100
細胞膜的制備方法實驗——從懸浮細胞中制備細胞膜
實驗材料膠原酶試劑、試劑盒EDTAHBSS膠原酶溶液陽離子硅膠貯存液儀器、耗材離心機實驗步驟一、用膠原酶/EDTA 釋放細胞1. 用預保溫溶液洗滌單層細胞并用膠原酶處理(1) 預保溫溶液洗滌細胞。預保溫溶液：5 mmol/L EDTA 鈉鹽溶于 HBSS，不含二價陽離子。(2) 在單層細胞上加 1%
鮭精擔體DNA制備實驗
實驗材料 鮭精DNA試劑、試劑盒 TE酚氯仿乙酸鈉儀器、耗材 離心機搖床超聲儀實驗步驟 1. ?將TE緩沖液加入裝有干燥鮭精DNA的燒杯中，至鮭精DNA濃度為5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反復吹打后，用攪拌棒于4℃攪拌過夜，最終獲得一種均勻粘稠液體。?2. ?將一個較大的超聲波探頭插入燒杯
鮭精擔體DNA制備實驗
利用這一方案可獲得剪切好的高質量鮭精擔體DNA，它可用于轉化實驗和其他需要高質量擔體DNA的實驗中。實驗材料鮭精DNA試劑、試劑盒TE酚氯仿乙酸鈉儀器、耗材離心機搖床超聲儀實驗步驟1. ?將TE緩沖液加入裝有干燥鮭精DNA的燒杯中，至鮭精DNA濃度為5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反復吹打后
鮭精擔體DNA制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 鮭精DNA 試劑、試劑盒
什么是微體？
微體（microbody或cytosome）是一些由單層膜包圍的小體，直徑約0.5μm。它的大小、形狀與溶酶體相似，二者區別在于含有不同的酶。微體內含有氧化酶和過氧化氫酶類。另外，有些微體中含有小的顆粒、纖絲或晶體等 [1] 。微體中都存在過氧化氫酶，因此有人建議改名為過氧化物酶體。過氧化物酶體