北大魏文勝最新發表CRISPR綜述
探索基因及其表達的蛋白在特定生理、病理、發育等過程中所起的作用一直是生命科學領域研究的重要內容。盡管利用RNA干擾鑒 定高等生物基因功能的技術已經普及，但是這種方法經常伴隨脫靶現象；而且由于只能部分抑制基因表達，往往不足以造成表型變化從而影響對其基因型的判斷。近 幾年基因編輯技術的出現，使得對單一基因進行修飾的遺傳手段得到迅速發展，然而在哺乳細胞內基于基因完全敲除進行大規模功能性篩選的方法依然空缺。 生命科學學院魏文勝課題組為此開發了一種基于CRISPR/Cas9系統的慢病毒聚焦型人源細胞文庫、功能性基因篩選平臺以及基于高通量深度測序技術解析數據的完整技術路線。利用這一高效的新型遺傳篩選技術，成功鑒定出對兩種細菌毒素侵染宿主所必需的宿主受體、以及多種新型蛋白位點。 這一強大的高通量基因篩選技術的建立不僅能夠幫助人們研究與病菌侵染相關的宿主蛋白及通路，還可以惠及眾多生物醫學相關領域的研究。這一重要研究結果發表在2014年4......閱讀全文
Cell：光學混合篩選技術幾天內篩選人細胞中的數千基因
如今，在一項新的研究中，來自美國麻省理工學院和布羅德研究所的研究人員開發出一種方法，該方法將大規模混合篩選與基于圖像的細胞行為分析相結合。這種稱為光學混合篩選（optical pooled screen）的方法允許人們在空間和時間分辨率下研究基因如何影響細胞過程，而其他的混合篩選方法則無法做到這
基因測序技術首次實現胚胎篩選
來自牛津大學的科學家們利用新的基因測序技術對胚胎進行分析，從而選擇試管受精的胚胎。之前，新的基因測序技術從來沒用被用于胚胎的篩選。 這項分析技術稱為“下一代測序技術”，一種強大的方用來解讀所有的基因。通過測試每個樣品產生大量的DNA數據，同時揭示遺傳性疾病，染色體的異常及線粒體的突變。下一
單細胞技術在藥物篩選中的應用
單細胞的異質性會被組織等高通量細胞樣本的均質化生信數據覆蓋以致難以凸顯，尤其是在臨床診斷中。所以開發應用單細胞技術在發現甚至篩選藥物靶點成為了有力的手段之一。蘇州系統醫學研究所李貴登課題組、加州理工學院的David Baltimore課題組和西雅圖系統醫學研究院的James Heath課題組在綜合性
多基因風險評分技術可篩選基因，避免低智商嬰兒出生
美國一家專注于篩查基因檢測公司Genomic Prediction透露，利用一種叫做多基因風險評分（a polygenic risk score）的技術，可使計算出一個人擁有某些條件或特征成為可能。 譬如，如果想要篩查智商“更高”的嬰兒，可以篩選與智力有關的上千種基因。 該公司聲稱，他們通過
基因芯片技術的應用藥物篩選和新藥開發
由于所有藥物(或獸藥)都是直接或間接地通過修飾、改變人類(或相關動物)基因的表達及表達產物的功能而生效,而芯片技術具有高通量、大規模、平行性地分析基因表達或蛋白質狀況(蛋白質芯片)的能力,在藥物篩選方面具有巨大的優勢。用芯片作大規模的篩選研究可以省略大量的動物試驗甚至臨床,縮短藥物篩選所用時間,提高
蛋白質芯片技術應用與基因表達的篩選
基因表達的篩選AngelikaL．等人從人胎兒腦的cDNA文庫中選出92個克隆的粗提物制成蛋白質芯片，用特異性的抗體對其也進行檢測，結果的準確率在87%以上，而用傳統的原位濾膜技術準確率只達到63%。與原位濾膜相比，用蛋白質芯片技術在同樣面積上可容納更多的克隆，靈敏度可達到pg級。
藥物作用靶點篩選與基因敲除技術的關系
2018年一對雙胞胎嬰兒的CCR5基因敲除的事件在社會上引起了軒然大波，拋開這次事件而言，作為一項生物研究技術，基因敲除在藥物研發領域應用也很廣泛，今天我們來看一下它在藥物作用靶點篩選上的作用吧！ 通過藥物作用的靶點來設計開發創新藥物是目前創新藥制劑開發的一條重要線索，每年都會有作用于新靶
藥物作用靶點篩選與基因敲除技術的關系
2018年一對雙胞胎嬰兒的CCR5基因敲除的事件在社會上引起了軒然大波，拋開這次事件而言，作為一項生物研究技術，基因敲除在藥物研發領域應用也很廣泛，今天我們來看一下它在藥物作用靶點篩選上的作用吧！ 通過藥物作用的靶點來設計開發創新藥物是目前創新藥制劑開發的一條重要線索，每年都會有作用于新靶
抗體篩選技術匯總
近年來，生物藥的市場需求逐年擴容，其中抗體藥物因其靶向性好，治療效果顯著，在生物藥中占據著舉足輕重的地位，目前已經進入了抗體藥物發展的黃金時代。隨著抗體藥的需求越來越大，抗體篩選技術的發展也是日新月異，目前應用較普遍的有雜交瘤技術、抗體文庫篩選技術、納米抗體技術和轉基因小鼠抗體篩選技術。其中抗體
關于單克隆抗體技術的細胞篩選的介紹
雜交瘤細胞在融合后2周左右即可篩選，即把分泌所需抗體的雜交瘤孔從眾多的孔中選出來，通常也稱為抗體檢測。抗體檢測的方法很多，通常根據所研究的抗原和 實驗室的條件而定。但作為雜交瘤篩選的抗體檢測方法必須具有快速、準備、簡便，便于一次處理大量樣品等特點。因為往往有幾百個樣品需要在短短幾個小時就報 告結
單克隆抗體雜交瘤細胞篩選技術介紹
1986年，美國FDA批準了第一個單克隆抗體藥物上市，距今已快30年。目前，全世界共有超過40個治療用抗體藥物被批準上市，每年實現超過600億美元的銷售額。在國際及國內形成了抗體藥物開發熱潮。巨大的市場前景和現存的技術問題及壁壘并存的現實不可避免地引發抗體藥物新一輪技術革命。而其結果又將毫無疑問地改
《科學》：基因組大規模篩選新技術助力癌癥研究
3000種基因經初次篩選后，大約24個符合要求 ?多年來生物學家一直在搜尋癌細胞的弱點，以期找到對付癌癥的線索。美國科學家近日研究出了一種基因組大規模篩選技術，有望提供一種強大的經濟有效的方法以挑選出對付癌癥的新藥靶。相關論文發表在2月1日的《科學》（Science）上。?2005年，美國國立衛
轉基因植物中的篩選基因
基因工程（DNA重組技術）是在離體條件下對不同生物的遺傳物質（DNA）進行人為“加工”，并按照人們的意愿重新組合，以改變生物的性狀和功能，然后再通過適當的載體將重組DNA轉入生物體或細胞內，并使其在生物體內或細胞中表達，從而獲得新的生物機能。這種利用基因工程技術獲得的植物一般稱為“基因工程植物”。自
細胞轉染所需細胞的篩選方法
1．確定抗生素作用的最佳濃度：不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性，因此在篩選前要做預試驗，確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔，接種量以第二天長成25%單層為宜，置CO2 孵箱中37℃培養過夜。2) 將培養液換成含抗生素的培養基，抗生
高通量細胞遷移篩選
細胞遷移是一個活的生物生長和維持生命過程中不可缺少的的關鍵過程。為了完成相應的功能，體內的細胞經常會以特定的方向遷移到特定的位置。遷移是一個循環的過程，細胞向前端伸出突觸，縮回其尾端。動物組織中的細胞發生遷移主要是為了響應特定的外部信號。細胞遷移對于胚胎發育、傷口愈合、分化以及免疫應答等都是非常重要
細胞篩選方法和步驟
篩選步驟：a.殺滅曲線的確定將未轉染的細胞按每孔0.05million鋪入24孔板，孵育過夜，2.第二天，除去24孔板中舊的培養基，3.將含不同濃度嘌呤霉素（1ug/mL，2ug/mL，3ug/mL，4ug/mL，5 ug/mL，6ug/mL，7ug/mL）的新鮮培養基加入已鋪有細胞的24孔板，4.
轉染細胞的篩選原則
1．確定抗生素作用的最佳濃度：不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性，因此在篩選前要做預試驗，確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔，接種量以第二天長成25%單層為宜，置CO2 孵箱中37℃培養過夜。2) 將培養液換成含抗生素的培養基，抗生
轉染細胞的篩選方式
1．確定抗生素作用的最佳濃度：不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性，因此在篩選前要做預試驗，確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔，接種量以第二天長成25%單層為宜，置CO2 孵箱中37℃培養過夜。2) 將培養液換成含抗生素的培養基，抗生
藥物高通量篩選技術
藥物高通量篩選技術簡單介紹一下關于藥物高通量篩選技術的知識。一.概念高通量篩選(High throughputscreening，HTS)技術是指以分子水平和細胞水平的實驗方法為基礎，以微板形式作為實驗工具載體，以自動化操作系統執行試驗過程，以靈敏快速的檢測儀器采集實驗結果數據，以計算機對實驗數
CRISPR篩選發現關鍵基因，讓抗腫瘤T細胞療法更持久
免疫療法方興未艾，并在腫瘤治療中展現出極佳的治療效果，而抗腫瘤T細胞療法是免疫療法的重要代表。 細胞毒性CD8 T細胞可以直接殺死腫瘤細胞，是在臨床使用的許多免疫治療方法中動員的關鍵武器。然而，腫瘤組織能夠創造嚴酷的微環境，招募免疫調節細胞，并誘導抑制T細胞功能的信號分子的產生，從而阻礙了T細
細胞－SELEX(CellSELEX)技術篩選適配體的方法介紹
該方法的主要靶標物質是細胞、細菌或病毒等，操作過程中采用離心、沉淀的方法分離去除未結合適配體，再通過熱解離或酶切作用獲得特異性適配體序列。Liang 等針對感染狂犬病毒的活細胞，應用 Cell-SELEX 經過35 輪重復篩選獲得了 5 條 DNA 適配體。病毒效價測定與實時定量反轉錄 PCR
基因芯片技術在藥物篩選和新藥開發領域的應用
由于所有藥物（或獸藥）都是直接或間接地通過修飾、改變人類（或相關動物）基因的表達及表達產物的功能而生效，而芯片技術具有高通量、大規模、平行性地分析基因表達或蛋白質狀況（蛋白質芯片）的能力，在藥物篩選方面具有巨大的優勢。用芯片作大規模的篩選研究可以省略大量的動物試驗甚至臨床，縮短藥物篩選所用時間，提高
篩選穩定表達細胞株轉染后多久藥物篩選
穩定細胞株篩選是一個長期的過程，穩定細胞株篩選優化，有許多條件需要摸索，而且是從源頭開始①在構建載體時，目的基因直接整合到細胞染色體組上，最好不要通過先瞬轉在篩選穩定細胞株的這種方法，因為轉染效率沒有保證②高表達載體的構建，哺乳動物表達量一直是它自身的缺點，最好根據高表達載體定向的馴化細胞，提高蛋白
開發新型微滴反應篩選技術并開展單細胞分析應用
中國科學院微生物研究所微生物資源前期開發國家重點實驗室杜文斌研究組和黃力研究組共同開發了一種新型的微流控界面納升注射技術（Interfacial Nanoinjection, INJ），該技術可以將傳統的生化反應體系微縮在一個納升體積的油包水微液滴體系中完成。針對這一技術創新，團隊申請了多項中國
單克隆抗體技術的方法細胞篩選操作過程
雜交瘤細胞在融合后2周左右即可篩選,即把分泌所需抗體的雜交瘤孔從眾多的孔中選出來,通常也稱為抗體檢測。抗體檢測的方法很多,通常根據所研究的抗原和 實驗室的條件而定。但作為雜交瘤篩選的抗體檢測方法必須具有快速、準備、簡便,便于一次處理大量樣品等特點。因為往往有幾百個樣品需要在短短幾個小時就報 告結果,
日本發明利用電分離篩選iPS、ES細胞的新技術
據日本媒體報道，慶應義塾大學宮田昌悟副教授帶領的研究小組利用給細胞加電壓時其反應各異的特點，發明了可以從飼養層細胞中簡單分離出所需的ES細胞和iPS細胞的新技術。與以往胰蛋白酶分離辦法相比，該技術具有操作簡單，并且不會傷害細胞的優點。 研究人員預先在長10毫米、寬5毫米的電路板上
關于轉染細胞篩選的介紹
1、確定抗生素作用的最佳濃度： 不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性，因此在篩選前要做預試驗，確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。 1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔，接種量以第二天長成25%單層為宜，置CO2 孵箱中37℃培養過夜。 2) 將培養液換成含抗生
轉染細胞的穩定篩選實驗
本實驗主要用于獲得含目的外源基因的真核細胞。實驗方法原理外源基因轉染真核細胞后整合入基因組DNA，能夠長期存在于細胞中，隨染色體復制而傳給子代。外源基因進入培養細胞一般要經過幾天才能夠整合入基因組DNA。實驗材料轉染細胞試劑、試劑盒抗生素培養基胰酶儀器、耗材6孔板24孔板96孔板CO2培養箱濾紙片培
轉染細胞的穩定篩選實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 外源基因轉染真核細胞后整合入基因組DNA，能夠長期存在于細胞中，隨染色體復制而傳給子代。外源基因進入培養細胞一般要經過幾天才能夠整合入基因組DNA。 實驗材料
雜交瘤細胞的篩選
雜交瘤細胞的篩選??在細胞融合后，要從上述五種細胞中篩選出雜交瘤細胞，一般使用HAT培養進行篩選，HAT培養基中含有次黃嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶（T）三種成分。細胞的DNA合成有內源性途徑（主要途徑）和外源性途徑（旁路途徑）兩種方式。內源性途徑就是利用谷氨酰胺或單磷酸尿苷酸在二氫葉酸還原