JCI:應用FISH技術檢測腫瘤microRNA
霍華德?休斯醫學研究所(HHMI)的研究人員通過微調熒光探針的設計以及RNA固定技術,開發出一種檢測和定量腫瘤活檢樣本中microRNA分子的方法。這種新的熒光原位雜交(FISH)技術實現了腫瘤類型的鑒定。《The Journal of Clinical Investigation》雜志近日刊登了這一成果。 文章的通訊作者,霍華德?休斯醫學研究所的研究員Thomas Tuschl認為:“之前人們開發出RNA FISH方法,但它存在很多問題。我認為這篇文章是一個新的基礎,說明過去許多觀點是錯誤的,但沒有化學家進入這一領域,真正優化這些方法。” 對于microRNA的檢測,實時定量PCR等方法較為常用,但會抹去組織樣本中寶貴的空間信息。在 FISH技術中,熒光探針與特定RNA或DNA序列結合,產生熒光,可通過顯微鏡檢測。由于許多癌癥包含獨特的microRNA或microRNA組合,故這些分子的檢測也許有助......閱讀全文
細胞遺傳學——原位雜交(ISH)
In Situ Hybridization· ????????In Situ Hybridization?(jsmith1@po-box.mcgill.ca)In situ?hybridization, as the name suggests, is a method of localizing,
石蠟切片或細胞的原位雜交實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 石蠟切片 試劑、試劑盒 HCl 二甲苯 乙醇 SSC
石蠟切片或細胞的原位雜交實驗
細胞RNA的原位雜交實驗用于在混雜的細胞群體和組織中、定位特異的mRNA在細胞中的存在位置。實驗材料石蠟切片試劑、試劑盒HCl二甲苯乙醇SSCPBS鏈霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸銨儀器、耗材染色盤加濕盒載玻片烘箱水浴鍋培養箱實驗步驟1. ?準備脫蠟/再水化系統(可重復使用數次)及0.2 m
石蠟切片或細胞的原位雜交實驗
實驗材料 石蠟切片試劑、試劑盒 HCl二甲苯乙醇SSCPBS鏈霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸銨儀器、耗材 染色盤加濕盒載玻片烘箱水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?準備脫蠟/再水化系統(可重復使用數次)及0.2 mol/l HCl同時,將載有切片樣品的載玻片(玻片盒中,于-20℃或-70℃貯存)置
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛應
腺泡細胞癌的病因
腫瘤的細胞形態完全與腺泡的漿液細胞相似,所以認為腺泡細胞癌發生于腺泡細胞。但在病變中見有閏管細胞,并有由閏管細胞到腺泡細胞過渡,所以認為腺泡細胞癌來源于閏管上皮。 閏管上皮細胞病變(50%) 腫瘤的細胞形態完全與腺泡的漿液細胞相似,所以認為腺泡細胞癌發生于腺泡細胞,但在病變中見有閏管細胞,并
腺泡細胞癌的診斷
由于臨床上無特征性表現,雖然經涎腺造影、CT、B型超聲及放射性同位素掃描等特殊檢查,但術前也難以作出正確診斷, 一般需在病理檢查后方能確診。
膽管細胞癌的簡介
[病因病理] 肝內膽管癌即從肝左右管合流部(肝門部)至末梢的膽管上皮細胞發生的癌。組織學表現為腺樣分化或伴有粘液分泌,富于纖維性間質,比肝細胞癌硬。根據其發生部位分為末梢型膽管癌(肝內膽管瘤)及肝門部膽管癌。 [臨床表現] 臨床癥狀因發生部位不同而異。末梢型膽管癌早期無癥狀,晚期可有上腹不
燕麥細胞癌的治療
除了傳統的手術、化療以、放療及中醫的治療方法。新興的CLS-MCT多細胞免疫治療突破了傳統治療腫瘤“不徹底”、“易復發”、“副作用大”的三大瓶頸,治療效果迅速,沒有任何毒副作用。并且和手術治療、化療和放療方法一起應用會有很強的互補作用。該療法解決了手術和放化療存在的不足,也增強了治療效果,更重
膽管細胞癌的癥狀
黃疸:通常為中上腹或右上腹疼痛,逐漸加重,可放射至背部或右肩胛處,伴惡心嘔吐、厭食、消瘦、乏力、貧血、皮膚瘙癢、尿色加深等,大便多呈陶土色。 肝大:可觸及明顯腫大的膽囊,如合并膽道感染可出現明顯的壓痛。 膽道感染:可出現典型的Charcot三聯征(間歇性寒戰、發熱、黃疸),較少見的是Reyn
燕麥細胞癌的分類
燕麥細胞癌是小細胞肺癌的亞型分支。燕麥細胞癌在電鏡下胞質內可見神經內分泌顆粒,屬肺神經內分泌癌。近20%的肺癌患者屬于小細胞肺癌(SCLC)或燕麥細胞癌,小細胞肺癌的腫瘤細胞倍增時間短,進展快,常伴內分泌異常或類癌綜合征。
燕麥細胞癌診斷介紹
痰細胞學檢查 多數原發性肺癌病人在痰液中可找到脫落的癌細胞,并可判定癌細胞的組織學類型。因此痰細胞學檢查是肺癌普查和診斷的一種簡便有效的方法。中央型肺癌痰細胞學檢查的陽性率可達70~90%,周圍型肺癌痰檢的陽性率則僅約50%左右,因此痰細胞學檢查陰性者不能排除肺癌的可能性。 X線檢查 診斷
GP73在肝細胞癌和膽管細胞癌中的表達
GP73在肝細胞癌和膽管細胞癌中的表達鄒 凡1a,揭小華1a,巢映暉1b,傅華群1b,王榮勝2,王開陽1c,昌毓穗1d(1.南昌大學a.臨床醫學院2012級;b.第二附屬醫院肝膽外科;c.第二附屬醫院急診科;d.附屬醫院急診科;2.江西省人民醫院ICU,南昌330006)摘要:目的 探討血清高爾
原位雜交儀原位雜交的意義
原位雜交:在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應用帶有標記的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質)DNA或R
原位雜交儀—原位雜交實驗(二)
原位雜交第二天 1. 1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復使用十次左右)。 2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復一次。 3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。 4)置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復一次。
熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結
原位雜交儀—原位雜交實驗(三)
原位雜交第三天 1) 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時以上,最后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。 2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置
原位雜交儀—原位雜交試驗(一)
收集斑馬魚的胚胎,在Holfretor水中培養,到達所需要的發育時期時,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗,然后換成甲醇,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧水處理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養,可阻斷色素的形成)
FISH熒光原位雜交實驗(原位雜交)
1. 實驗目的??????? 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理??????? 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺
熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術
熒光原位雜交可應用于:(1)動植物基因組結構研究;(2)染色體精細結構變異分析;(3)病毒感染分析;(4)腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
細胞組分的分析方法——核酸序列的原位雜交
一.基本原理 核酸分子雜交技術是目前分子生生物學、細胞生物學和生物化學研究中應用最廣泛的技術之一,是定性、定量和定位檢測兩條來源不同的聚核苷酸鏈上堿基順序同源性的一種手段。DNA分子是高度有序的雙鍵分子。一條鏈的堿基與另一條鏈的堿基以氫鍵配對相連.形成腺嘌呤與胸腺嘧啶(A.T),鳥嘌呤與胞嘧啶(G
胚胎癌性細胞的定義
中文名稱胚胎癌性細胞英文名稱embryonal carcinoma;EC cell定 義在胚胎發育早期形成的一種惡性腫瘤細胞,具有類似干細胞的多種分化潛能。應用學科遺傳學(一級學科),發育遺傳學(二級學科)
基底細胞癌的病因
本病為來自基底細胞的惡性腫瘤,它與日光照曬有密切關系,所以它好發于日光照曬的頭、面、頸部或手背等處。現在普遍認為它是來自表皮多潛能細胞的腫瘤,用單克隆抗體證實基底細胞癌來自表皮細胞。
基底細胞癌的診斷
本病為侵襲性潰瘍,有卷曲狀珍珠色邊緣,基底部呈黑色,慢性病程,確診要依靠病理檢查。組織病理學見表皮內基底細胞呈融漿狀團塊,邊緣呈柵欄狀排列,可有角質囊腫,診斷不難。
透明細胞癌的治療
冷凍療法和加溫療法 冷凍療法和加溫療法低溫(-40℃以下)和高溫(45℃以上)都可以將癌細胞殺死。因此人們開展了用液氮冷凍治療淺表皮膚癌和某些良性皮膚腫瘤,以及局部加溫治療皮膚癌、四肢癌和膀胱癌。加溫方法有短波、超短波、微波及激光等手段。 基因療法 基因是細胞內的遺傳物質,化學成分是脫氧核
肝細胞癌的病理特征
如同任何其他癌癥一樣,當細胞機制發生突變導致細胞以更高的速率復制和/或導致細胞避免凋亡時,肝細胞癌就會發展。 特別地,乙型肝炎和/或丙型慢性感染可以通過反復引起機體自身的免疫系統攻擊肝細胞,其中一些被病毒感染,其他細胞的無視有助于肝細胞癌的發展。 雖然修復后的這種不斷的損傷循環可能導致修復期間的錯誤
透明細胞癌的病因
透明細胞癌的真正起因仍不能確定,認為能夠引起透明細胞癌的有:放射線,包括太陽光,游離性輻射品,如鈾、鐳、紫外光線。可引起皮膚癌、骨癌和血液方面的癌癥。化學物質 空氣污染與吸煙 :產生碳氧化合物,易刺激呼吸道,引起肺透明細胞癌。飲食的不當:如嗜吃酸辣食物或腌浸蔬菜,易得胃透明細胞癌,而一些食品
鱗狀細胞癌常見類型
常見類型包括:鱗狀細胞皮膚癌:一種皮膚癌肺鱗狀細胞癌:肺癌的一種鱗狀細胞甲狀腺癌:一種甲狀腺癌食管鱗狀細胞癌:一種食管癌陰道鱗狀細胞癌:一種陰道癌盡管同名“鱗狀細胞癌”,但不同身體部位的鱗狀細胞癌在癥狀、自然病程、預后和對治療的反應方面存在差異。