細胞培養基的基本介紹
動物細胞培養必需的溶液平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。抗生素溶液:1)青、鏈霉素,每毫升培養液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養液。3)制霉菌素:濃度25U/ml,小瓶分裝,每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,前者來源少,價格高;后者要求剛產下尚未哺乳的小牛,因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等。蛋白質主要是白蛋白和球蛋白。氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,必須由培養液提供。激素有胰島素、生長激素和多種生長因子如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、增殖刺激因子(MS......閱讀全文
細胞培養基的基本介紹
動物細胞培養必需的溶液平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。抗生素溶液:1)青、鏈霉素,每毫升培養液含100U青霉素
細胞培養基的成份基本介紹
細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質，也是培養細胞生長和繁殖的生存環境。細胞培養基的成份基本介紹動物血清成分復雜，各種生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效，但后期對培養產物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質量的動物血清來源有限，成
原代細胞分離和培養基本步驟介紹
1、器官和組織的選擇盡可能的去除不必要的組織和血跡。2、原代細胞的分離（1）應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。（2）根據組織來源不同，可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。3、原代細胞的培養：（1）PriCells原代細胞特制培養基（2）PriCells原代細胞特制添
細胞培養基本技術
實驗概要無菌操作基本技術?1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失
細胞培養基本方法
= 細胞培養基本方法 =?(一)準備和安裝過濾器 (二)合成培養基的配制 (三)小牛血清的處理 (四)生長培養基的配制(五)凍存細胞的復蘇 (六)傳代 (七)凍存 (八)注意事項 (一)準備和安裝過濾器 清洗好過濾器，干燥，放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜，用布包裝好，
細胞培養基本方法
一)準備和安裝過濾器??清洗好過濾器，干燥，放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜，用布包裝好，15磅20 min進行高壓滅菌處理。 在超凈臺內打開過濾器架好，膠管一端接入濾泵再插入待除菌的液體中，出口端膠管深入到已消毒好的瓶子中。用泵過濾，過濾后要檢查濾膜是否完好無損。?(二)合成培養基的配制?1、根
關于免疫細胞無血清培養基的基本介紹
人免疫細胞無血清基礎培養基是無血清、不含異源動物成分（Xeno-free）的人免疫細胞培養基，可用于人淋巴細胞、CIK、DC、NK等各類免疫細胞的培養，具有很高的成活率、殺傷活性和擴增倍數，甚至優于國外進口同類優質產品。 無血清培養基是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培
細胞培養基本知識
一.細胞培育的基本概念體外培育（in vitro culture）包含一切構造層次的培育，即：安排培育（tissue culture）、細胞培育（cell culture）和器官培育（organ culture）。細胞培育(Cell culture)指從生物機體取出有些安排渙散成單個細胞或直接從機體
完全培養基的基本介紹
基礎培養基添加血清、抗生素等物質后，叫完全培養基，也叫（血清）細胞培養基。基礎培養基只能維持細胞生存，要想使細胞生長和繁殖，還需添加天然培養基，常用的是牛血清，因為牛血清中含有促細胞增殖的各種生長因子和其他多種有利于細胞生存的物質。此外為防止污染，培養液中尚需加一定量的抗生素。 完全培養基根據添
細胞培養基的基本要求
體外培養的細胞直接生活在培養基中，因此培養基應能滿足細胞對營養成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。 一、營養成分 維持細胞生長的營養條件一般包括以下幾個方面： 1.氨基酸：是細胞合成蛋白質的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸：纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪
細胞培養基本技術概述（一）
無菌操作基本技術 ?1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 %ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或
細胞培養基本技術概述（七）
冷凍細胞活化 1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。 2. 細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒溫水槽 3.2 新鮮培養基 3.3 無菌吸管/
細胞培養基本條件
細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下，使其生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞，也可以是細胞群。?1、合適的細胞培養基?合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的zui重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養細胞
實驗技術：細胞培養基本技術
細胞培養 一、操作規程： 1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用
實驗技術：細胞培養基本技術
一、操作規程：1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用70％酒精擦拭無菌操作臺面,再
原代細胞分離和培養基本步驟
?1、器官和組織的選擇??? 盡可能的去除不必要的組織和血跡。??? 2、原代細胞的分離??? （1）應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。??? （2）根據組織來源不同，可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。??? 3、原代細胞的培養：??? （1）PriCells原代
細胞培養基本技術概述（三）
血清 ?1. 血清必須貯存于–20 ～ -70 oC，若存放于4 oC，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將40～45 ml 分裝于無菌50 ml 離心管中，由于血清結凍時體積會增加約10 %，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發生污染或容器凍裂之情形。 ?2. 一般廠商提供之血清為無菌，不需再
細胞培養基本條件
1、合適的細胞培養基合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的最重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。2、無菌無毒細胞培養環境無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御
細胞培養基本技術概述（五）
實驗用品 1. 種類︰ 1.1. 細胞培養實驗用品均為無菌，除了玻璃容器與pasteur pipet 外，其它均為塑料無菌 制品。 1.2. TC 級培養盤表面均有coating 高分子物質以讓細胞吸附，培養容器種類有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等，依
細胞培養基本技術概述（二）
培養基 ?1. 液體培養基貯存于4 oC 冰箱，避免光照，實驗進行前放在37 oC 水槽中溫熱。 2. 液體培養基(加血清) 存放期為六個月，期間glutamine 可能會分解，若細胞生長不佳，可以再添加適量glutamine。 ?3. 粉末培養基配制(以1 升為例)： ?3.1. 細胞培
原代細胞分離和培養基本步驟
原代細胞分離和培養基本步驟?1、器官和組織的選擇盡可能的去除不必要的組織和血跡。?2、原代細胞的分離（1）應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。（2）根據組織來源不同，可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。?3、原代細胞的培養：（1）PriCells原代細胞特制培養基（2
細胞培養基本技術概述（四）
細胞傳代培養 ?1. 細胞生長至高密度時，即須分殖至新的培養瓶中，一般稀釋比例為1:3 至1:6，依細胞種類而異。 ?2. 材料： ?2.1. 無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL
細胞培養基本技術概述（六）
抗生素 1. 細胞庫之細胞培養基不加抗生素 1.1. 培養自ATCC 引進之細胞株，培養基中不加抗生素。 1.2. 培養自其它實驗室引進之細胞株，制作token freeze 前培養基須添加抗生素，待token freeze 通過污染測試后，大量培養時則不加抗生素。 2. 寄送活細胞時，須將培養液充
關于發酵培養基的基本介紹
發酵培養基是供菌種生長、繁殖和合成產物之用。它既要使種子接種后能迅速生長,達到一定的菌絲濃度,又要使長好的菌體能迅速合成需產物。因此,要求發酵培養基的組成應豐富、完全,碳、氮源要注意速效和遲效的互相搭配,少用速效營養,多加遲效營養；還要考慮適當的碳氮比,加緩沖劑穩定pH值；并且還要有菌體生長所需
培養基制備基本方法的介紹
1、培養基配方的選定 同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規定進行配制外．一般均應盡量收集有關資料．加以比較核對．再依據自己的使用目的加以選用，記錄其來源。 2、培養基的制備記錄 每次制備培養基均應有記錄，包括培養基名稱，配方及其來源．和各種成
半固體培養基的基本介紹
半固體培養基，如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中，就制成了半固體培養基。以瓊脂為例，它的用量在0.2~0.7%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力，有時用來保藏菌種。 固體培養基是在培養液中加了瓊脂（瓊脂，一種凝固劑，在44度以下都呈凝固狀）。這種培養基常用于鑒定菌種和計數。 半固體
關于hat培養基的基本介紹
缺失這兩種酶之一的細胞，在HAT培養基中，應該不能生存，只有發生融合或者其他情況下，才能使細胞重新獲得用旁路途徑進行DNA合成能力。 HAT培養基也就是指含有這三種物質的細胞培養基。對￡具有合成DNA原料的核苷酸的形成上，在細胞內具有起始合成途徑（denovopathway）和中間合成途徑（s
關于固體培養基的形式—斜面培養基的基本介紹
斜面培養基（agarslantculture-medium ）：固體培養基（solid culture medium ）的一種形式；制作時應趁熱定量分裝于試管內，并凝固成斜面的稱為斜面培養基，用于菌種擴大轉管及菌種保藏。 與斜面培養基相對和并列的概念是：平面培養基、高層培養基。固體培養基倒在培
關于基本培養基的基本內容介紹
基本培養基：僅能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養基，稱為基本培養基（minimal medium,MM），有時用符號“[ － ]”來表示。不同微生物的基本培養基是不同的，基本培養基又稱無機鹽培養基。 一、基本培養基的配方： 蒸餾水1L 葡萄糖 0.5% 硝酸銨 1.0 g/L 磷酸二
細胞生長培養基的作用介紹
細胞生長培養基（液）是用以維持細胞生長增殖之用，含血清比例較大。生長培養液是培養細胞工作中最主要的培養用液。其組成為：基礎培養基80%～90%，血清（多用小牛血清) 10%～20%，抗生素（多用青霉素100U/mL和鏈霉素100μg/mL）。 這是適用于一般細胞的培養液組成。為培養特定細胞，還