雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟
1．一步雙染色法先將兩種熒光標{己抗體按適當比例混合(A+B)，按直接法進行染色。2．二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色，再用FITC標記的B抗體染色，根據兩種抗體的動物種屬不同，可用直接法也可用間接法，結果A抗原呈現橘紅色熒光，而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中，常用的方法是免疫熒光組織化學中間接法和SABC-Cy3法相結合。例如，在實驗設計時，選擇小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作為兩種不同的特異性一抗，相匹配的二抗分別為FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。進行雙重染色時，由于兩種一抗種屬來源不同，可把一抗混合使用。孵育結束后洗滌未結合的一抗，滴加二抗時，先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育，洗滌后，滴加SABC-Cy3復合物，經熒光顯微鏡下觀察已出現特異性熒光，再進行FITC―抗小鼠IgG(二抗)的孵育，最后封片觀察。其結果A抗原呈現綠色熒光，B抗原呈現紅色熒光。此法應注意兩種一抗在混合稀釋時，抗體的......閱讀全文
雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟
1．一步雙染色法先將兩種熒光標{己抗體按適當比例混合(A+B)，按直接法進行染色。2．二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色，再用FITC標記的B抗體染色，根據兩種抗體的動物種屬不同，可用直接法也可用間接法，結果A抗原呈現橘紅色熒光，而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中，常用的方法是免疫
免疫熒光組織化學染色法
一)免疫熒光組織化學原理? ? 將已知抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗體，再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素，利用熒光顯微鏡觀察標本，熒光素受到激發光的照射會發出明亮的熒光(黃綠色或橘紅色)，熒光素受激發光照
DAPI染色法的步驟
原來用dapi是用做原位雜交的配置的時候用滅菌水配置就可以了，以前用的濃度時1ml里面加2ul就可以了配置好的溶液保存在4℃就行，盡量避光，原液要用黑色的或錫箔紙包好放到-20℃為好原來是染載玻片上的染色體，直接滴到載玻片上就好了，之后用緩沖液洗凈注意事項就是別沾到手上了，那個東西還是很毒的，染色的
革蘭氏染色法實驗步驟簡介
步驟 革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸銨結晶紫染1分鐘。 3）蒸餾水沖洗。 4）加碘液覆蓋涂面染約1分鐘。 5）水洗，用吸水紙吸去水分。 6）加95%酒精數滴，并輕輕搖動進行脫色，20秒后水洗，吸去水分。 7）蕃紅染
免疫熒光染色原理及步驟
免疫熒光又稱免疫熒光抗體。免疫熒光實驗原理是將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少，相對使用標記抗體用量偏大。利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。下面詳細介紹免疫熒光染色步驟：1. 滴加 0.01mol/L，pH7.4 的PBS于待
抗酸染色法的步驟和染色配制簡介
一、抗酸染色一般步驟 1、初染 用玻片夾夾持涂片標本，滴加石炭酸復紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現蒸汽即暫時離開，若染液蒸發減少，應再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標本冷卻后用水沖洗。 2、脫色 3%鹽酸酒精脫色30秒~1分鐘；用水沖洗。 3、復染 用堿性美蘭溶液
瑞氏染色法的操作步驟
1、 取病料涂片、自然干燥； 2、 滴加瑞氏染液染3分鐘,使標本被其中甲醛所固定； 3、 加等量PH6.4的磷酸鹽緩沖液(或等量超純水)輕輕晃動玻片,均勻靜置5分鐘； 4、 水洗、吸干、鏡檢； 5、 細菌染成藍色，組織細胞胞漿紅色，細胞核藍色或紫色。
免疫組織化學染色法的臨床意義
此方式不只可以用來測知抗原的表現量也可觀察抗原所表現的位置。只要是能夠讓抗體結合的物質，也就是具有抗原性的物質包括蛋白質、核酸、多糖、病原體等都可偵測。
免疫組織化學染色法的檢查過程
用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法，稱熒光抗體法。用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法，稱熒光抗原法。免疫熒光組織化學分直接法、間接法和補體法。 一、直接法 (1) 檢查抗原方法 這是最簡便、快速的方法，用已知特異性抗體與熒光素結合，制成特異性熒光抗體，直接用于細胞或組織抗原的檢
免疫組織化學染色法的檢查過程
用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法，稱熒光抗體法。用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法，稱熒光抗原法。免疫熒光組織化學分直接法、間接法和補體法。 一、直接法 (1) 檢查抗原方法 這是最簡便、快速的方法，用已知特異性抗體與熒光素結合，制成特異性熒光抗體，直接用于細胞或組織抗原的檢查。
姬姆薩染色法的操作步驟
具體操作步驟： ①滴加姬姆薩染色液A液（0.5?0.8ml）于涂片上，并讓 染液覆蓋整個標本涂片染色1分鐘； ②將姬姆薩染色液B 液滴加于A液上面（滴加之量為A液的2 ~3倍）以洗耳球吹出 微風使液面產生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3?10分鐘； ③水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去
關于單染色法的操作步驟介紹
1、單染色法— 涂片取兩塊干凈的載玻片，各滴一小滴生理鹽水于載玻片中央，用無菌操作（圖Ⅳ-1，具體操作參照實驗一），分別挑取金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌于二載玻片的水滴中（每一種菌制一片），調勻并涂成薄膜。注意滴生理鹽水時不宜過多，涂片必須均勻。 2、單染色法—?干燥于室溫中自然干燥。 3、
免疫學實驗免疫組織化學染色法介紹
免疫組織化學染色法介紹： 免疫組織化學染色法是指在抗體上結合螢光或可呈色的化學物質，利用免疫學原理中抗原和抗體間專一性的結合反應，檢測細胞或組織中是否有目標抗原的存在，此方式不只可以用來測知抗原的表現量也可觀察抗原所表現的位置。只要是能夠讓抗體結合的物質，也就是具有抗原性的物質包括蛋白質、核酸、多
DNA熒光組織化學染色的方法
一步雙染色法先將兩種熒光標{己抗體按適當比例混合(A+B)，按直接法進行染色。二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色，再用FITC標記的B抗體染色，根據兩種抗體的動物種屬不同，可用直接法也可用間接法，結果A抗原呈現橘紅色熒光，而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中，常用的方法是免疫熒光組織
簡單染色法與革蘭氏染色法
（一）細菌的簡單染色法 1 目的 1.1 學習微生物 ?涂片、染色的基本技術。 1.2 掌握細菌的簡單染色法。 1.3 初步認識細菌的形態特征，鞏固學習油鏡的使用方法和無菌操作技術。 2 原理 細菌的涂片和染色是微生物學實驗中的一項基本技術。細菌的細胞小而透明，在普通的光學顯微鏡下不易識
臨床化學檢查方法介紹免疫組織化學染色法介紹
免疫組織化學染色法介紹： 免疫組織化學染色法是指在抗體上結合螢光或可呈色的化學物質，利用免疫學原理中抗原和抗體間專一性的結合反應，檢測細胞或組織中是否有目標抗原的存在，此方式不只可以用來測知抗原的表現量也可觀察抗原所表現的位置。只要是能夠讓抗體結合的物質，也就是具有抗原性的物質包括蛋白質、核酸、多
關于PI單染色法的實驗步驟介紹
1、PI單染色法— 收集細胞{數目約（1~ 5）×106個/mL}，500 ~ 1000 r/min離心5min，棄去培養液。 2、PI單染色法—?3ml PBS洗滌1次。 3、PI單染色法—?離心去PBS，加入冰預冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小時。 4、PI單染色法—?離心棄去固定
光鏡下雙/多重免疫標記實驗——雙重免疫熒光染色
實驗步驟1. 古茲菲德-雅各氏病（CJD）病人的尸解腦組織，4％ 中性甲醛固定，石蠟包埋，連續切片，厚 5 μm（貼片前的載玻片應預涂不含有熒光色素的黏合劑）。2. 常規脫蠟，水化。3. 抗原修復（檸槺酸鹽緩沖液 pH 6.0 中，高壓滅菌器加熱 100℃，20 min）及 96％ 甲酸孵育 2 m
原代細胞的脂類染色方法蘇丹紅Ⅲ染色法的染色步驟
1.用Hanks液漂洗蓋玻片3次；2.用甲醛鈣固定液固定20min；3.用蒸餾水漂洗蓋玻片3次；4.用70%乙醇將蓋玻片沖洗3次；5.用蘇丹紅Ⅲ染色液覆蓋蓋片樣品，染色10—30min；6.用70%乙醇漂洗蓋片3次；7.用甘油明膠封片后觀察；
革蘭氏染色液染色法
??1．葡萄球菌和大腸桿菌混合菌液。????2．結晶紫染色液。????3．革蘭氏碘液。????4．95％酒精。????5．番紅染液。????6．載玻片。方???法?????一、涂片標本的制備（見實驗一）????二、革蘭氏染色法?????1．初染：在上述已固定的涂片上，滴加結晶紫染液，染色1分鐘，水洗
革蘭氏染色法
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫師Gram創立。細菌先經堿性染料結晶染色，而經碘液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細菌此色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌（G+），后者為革蘭氏陰性菌（G—）。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料
各種組織特殊染色法—纖維素染色法
纖維素又稱纖維蛋白，在正常的情況下，它是血液內的纖維蛋白原分子聚合而形成的一種特殊蛋白質。正常的組織是見不到纖維素的。但是，當組織受損，血管內皮受到了較為嚴重的損害，血管通透性隨之升高，則可導致大量纖維蛋白的漏出。纖維素性炎癥就是以纖維素滲出為主[6]的一種抗損害的癥狀。在HE感染時于鏡下可見到大量
姐妹染色單體分化染色法
1. 實驗原理 姐妹染色單體分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)是20世紀70年代中期發展起來的染色體處理技術。1973年Latt在培養的細胞中加入5-溴脫氧尿嘧啶核苷（5-Bromode Oxyurdine，BrdU），用Hoechst 3
革蘭氏染色法的染色原理
革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G-）兩大類，是細菌學上最常用的鑒別染色法。該染色法之所以能將細菌分為G+菌和G-菌，是因為一般認為革蘭氏染色是基于細菌細胞壁特殊化學組分進行染色的。?通過初染和媒染后，細胞內形成了不溶于水的結晶紫一碘大分子復合物。革蘭氏陽性細菌由
瑞氏染色法染色原理
瑞氏染色法染色原理：? ? 為了觀察細胞內部結構，識別各種細胞及其異常變化，血涂片必須進行染色。瑞氏染色法是血細胞分析最經典和最常用的染色法。瑞氏染料：? ? 是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍組成的復合染料。染色原理： ? 是染料透入被染物并存留其內部的一種過程，此過程既有物理的吸附作用，又有化學的
瑞氏染色法：染色原理
既有物理的吸附作用，又有化學的親和作用。各種細胞成分化學性質不同，對各種染料的親和力也不一樣。如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質；細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞胞質為酸性，與堿性染料美藍或天青結合，染紫藍色或藍色，稱為嗜堿性物質；中性顆粒呈等電狀態
免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節
免疫熒光染色方法快捷,靈敏.標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.選用較佳的一抗的工作濃度.二抗需A液B液在室溫混合15分鐘后再用.標本需保存在-20度.
免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節
免疫熒光染色方法快捷,靈敏.標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.選用較佳的一抗的工作濃度.二抗需A液B液在室溫混合15分鐘后再用.標本需保存在-20度.
免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節
免疫熒光染色方法快捷,靈敏. 標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間. 選用較佳的一抗的工作濃度. 二抗需A液B液在室溫混合15分鐘后再用. 標本需保存在-20度.
免疫熒光組織化學直接法
1.檢查抗原法：這是最早的方法，用已知特異性抗體與熒光素結合，制成熒光特異性抗體，直接與細胞或組織中相應抗原結合，在熒光顯微鏡下即可見抗原存在部位呈現特異性熒光。此法很特異和簡便，但一種熒光抗體只能檢查一種抗原，敏感性較差。 2.檢查抗體法將抗原標記上熒光素，即為熒光抗原，用此熒光抗原與細胞或