怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正常現象，也可算作沒有擴增）。2、溶解曲線：（1）溶解曲線是判斷擴增產物是否單一的曲線，顧名思義，其跟模板（或其濃度）沒有關系，擴增什么基因就應該有其相對應的溶解曲線；（2）一般SYBR法的目的基因在80~90℃之間；（3）出現其他峰就該考慮是否為引物二聚體（一般為60~75℃之間）視引物長度而定，而基因組DNA污染的峰會在90℃以后。出現引物二聚體可能是引物設計、引物加量等原因所致；（4）基因組DNA那么考慮設計跨內含子引物或者實驗之前做gDNA的消除工作。而陰性對照有目的峰那可能就是模板污染，注意實驗操作等避免模板污染。3、溶解曲線......閱讀全文
擴增曲線異常問題
參比染料設定不正確：MasterMix 不加參比染料時，選 NONE。 模板的濃度太高或者降解。 熒光染料的降解。??
pcr原始曲線和擴增曲線區別
擴增曲線可以粗略地判斷擴增效率。SYBR Green的雙delta Ct法要求目的基因和內參的擴增效率基本一致。如果不一致，需要對公式進行修正，部分qPCR儀的配套軟件可以做到，直接輸入每對引物的擴增效率。但無論如何，保證高擴增效率是實驗成功的關鍵。如果擴增效率一致，不同Ct的曲線顯示出來就基本是平
什么是熒光擴增曲線
一般在熒光定量PCR中會用到擴增曲線。描述PCR動態進程的曲線即為擴增曲線，在進行PCR反應過程中，通過檢測系統對PCR管內的樣品進行實時檢測，最后將熒光信號值通過成像技術顯現在電腦上。正常的擴增曲線包括四個階段：基線期，指數增長期，線性增長期，平臺期。
qPCR擴增曲線的自述
擴增曲線，來自熒光定量PCR，是用于描述qPCR動態進程的曲線，我有兩種形態，一種是線性圖譜：橫坐標是循環數，縱坐標是熒光強度值；另一種是對數圖譜：橫坐標是循環數，縱坐標是熒光強度值的對數。大家根據我來確定Cq值，最終確定初始模板的含量。新冠疫情以來，我可是發揮了重要的作用，診斷技術的金標準，驕傲的
擴增曲線定義是什么？
擴增曲線（擴增曲線）：在實時熒光定量PCR反應中，引入了一種熒光化學物質，隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增大。
qPCR擴增曲線的自述
我是擴增曲線，來自熒光定量PCR，是用于描述qPCR動態進程的曲線，我有兩種形態，一種是線性圖譜：橫坐標是循環數，縱坐標是熒光強度值；另一種是對數圖譜：橫坐標是循環數，縱坐標是熒光強度值的對數。大家根據我來確定Cq值，最終確定初始模板的含量。新冠疫情以來，我可是發揮了重要的作用，診斷技術的金標準，驕
怎么看擴增曲線
擴增曲線可以粗略地判斷擴增效率。SYBR Green的雙delta Ct法要求目的基因和內參的擴增效率基本一致。如果不一致，需要對公式進行修正，部分qPCR儀的配套軟件可以做到，直接輸入每對引物的擴增效率。但無論如何，保證高擴增效率是實驗成功的關鍵。如果擴增效率一致，不同Ct的曲線顯示出來就基本是平
擴增曲線異常，請問原因
具體要看你做什么實驗，模板和擴增的基因實怎樣的。1、擴增曲線：一般來說如果你做雙ΔCT法那么你的擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。比如同一種CDN
“誰”動了我的擴增曲線？
各位老師在做熒光定量PCR實驗的時候，是否遇到過非標準“S”型曲線的問題呢？俗話說的好，完美的PCR擴增曲線“千篇一律”，而有問題的PCR擴增曲線則是“千姿百態”。今天給大家分享一個案例：客戶反映做絕對定量過程中，擴增曲線在線性增長期出現熒光信號突然下降的情況，在多組分圖（Multicomponen
新冠擴增曲線怎么分析
新冠擴增曲線用合理的方法搭配模型分析。
pcr擴增曲線呈波浪線
是real-time PCR嗎？在復制循環剛開始的時候，熒光還很低，有波浪線很正常。在擴增曲線呈指數上升的時候，一般曲線就會很平滑了。在取閾值的時候，將閾值線取在指數上升的時期，就好了。如果整條線都是波浪形的話，那就是PCR失敗了，原因需要你一一排查。
PCR擴增效率的評估擴增曲線的解讀
做過PCR的小伙伴都知道，PCR前期的驗證引物探針性能和確定最適反應條件是確保正式實驗順利進行的前提。PCR實驗中有個相當重要的工作——即是PCR擴增效率的評估。擴增效率是PCR檢測性能最重要的指標之一，也是定量分析計算結果時所需要的參數。接下來，讓小編給大家細細說來吧。?什么是擴增效率?PCR是一
實時定量pcr擴增曲線怎么分析
Green的雙deltaCt法要求目的基因和內參的擴增效率基本一致。如果不一致，需要對公式進行修正，部分qPCR儀的配套軟件可以做到，直接輸入每對引物的擴增效率。但無論如何，保證高擴增效率是實驗成功的關鍵。如果擴增效率一致，不同Ct的曲線顯示出來就基本是平行的位移，其傾斜程度基本一致。而如下圖一樣，
擴增曲線不正常的分類
不正常分類包括：1、PCR擴增抑制異常曲線。2、自動基線設置問題異常曲線。3、斜直線型擴增曲線。4、異常曲線。5、山域型曲線。擴增曲線良好的指標是曲線拐點清楚，擴增曲線整體平行性好，基線平而無上揚現象。
擴增曲線不正常的分類
不正常分類包括：1、PCR擴增抑制異常曲線。2、自動基線設置問題異常曲線。3、斜直線型擴增曲線。4、異常曲線。5、山域型曲線。擴增曲線良好的指標是曲線拐點清楚，擴增曲線整體平行性好，基線平而無上揚現象。
pcr外部質控有幾條擴增曲線
pcr擴增曲線四個階段。_cr擴增曲線四個階段為：基線期，指數增長期，線性增長期，平臺期。聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。
qpcr擴增曲線基線區不平滑
1、模板量過高導致，建議減小基線的終點值(一般建議設置為Ct值-4)。2、RNA純度低，建議梯度加大模板稀釋倍數看優化效果或重新制備高純度RNA重新實驗。
PCR異常擴增曲線分析攻略（一）
近幾年，從科學研究到臨床檢測，從“非洲豬瘟”檢測到“新冠病毒”檢測，熒光定量PCR儀器已成為分子生物學研究的常規設備。檢測方法的迅速發展，檢測任務的緊急也對檢測人員提出了更高的要求，需要他們具備熟練判斷數據結果的能力。對于熒光定量PCR的結果的判斷，最直觀的判斷就是看擴增曲線是否正常。很多老師在平時
PCR異常擴增曲線分析攻略（二）
2）未選擇跟儀器加熱模塊規格匹配的耗材目前Applied BiosystemsTM系列熒光定量PCR 儀加熱模塊分0.2ml跟0.1ml兩種，實驗前一定要確定自己的儀器是哪一種加熱模塊，再來選擇對應的耗材。如果0.1ml加熱模塊用成0.2ml耗材，則會造成耗材壓扁，甚至造成機器故障；如果0.
怎么通過看擴增曲線和溶解曲線看引物的好差
具體要看你做什么實驗,模板和擴增的基因實怎樣的.1、擴增曲線：一般來說如果你做雙ΔCT法那么你的擴增曲線必須是S型,有明顯的四個時期,且復孔的CT值盡量一致,相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；同一個基因在...
熒光定量PCR異常擴增曲線分析攻略
近幾年，從科學研究到臨床檢測，從“非洲豬瘟”檢測到“新冠病毒”檢測，熒光定量PCR儀器已成為分子生物學研究的常規設備。檢測方法的迅速發展，檢測任務的緊急也對檢測人員提出了更高的要求，需要他們具備熟練判斷數據結果的能力。對于熒光定量PCR的結果的判斷，最直觀的判斷就是看擴增曲線是否正常。很多老師在平時
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正
怎么通過QPCR的擴增曲線和溶解曲線來分析結果
1、擴增曲線（如果做雙ΔCT法）：（1）擴增曲線必須是S型，有明顯的四個時期，且復孔的CT值盡量一致，相差不要超過0.5個CT值（上限是1個CT值）；（2）同一個基因在不同濃度的相同模板下擴增，其相差的CT值為相差濃度倍數的2次開方。當然這是理論值；另外陰性對照不能有擴增（40個循環以后出CT值屬正