瓊脂擴散試驗(單向和雙向)
實驗概要可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。基本類型有單向擴散和雙向擴散兩種。本文介紹了單向和雙向兩種瓊脂擴散試驗的操作流程。單向瓊脂擴散試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量;雙向瓊脂擴散試驗可用來分析和鑒定標本中多種抗原或抗體成份,并用以測定抗原或抗體的效價。實驗原理1. 單向瓊脂擴散試驗是一種定量試驗,將抗體混合于瓊脂內,傾注于玻片或平皿上,凝固后在瓊脂上打孔,再將抗原標本加入孔內,經過一定的時間,在孔的周圍出現抗原抗體復合物形成的沉淀環,環的大小與抗原含量和擴散時間相關。用不同濃度的抗原制成標準曲線,則未知標本中的抗原含量即可從準標曲線中求出。2. 抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中,兩者各自向四周擴散,如兩者相對應,濃度比例合適,則經一定時間后,在抗原、抗體孔之間出現清晰致密的白色沉淀線。每一抗原與其相對應抗體只能形成一條沉淀線,若同時含有若干對抗原抗體......閱讀全文
瓊脂擴散試驗(單向和雙向)
實驗概要可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。基本類型有單向擴散和雙向擴散兩種。本文介紹了單向和雙向兩種瓊脂擴散試驗的操作流程。單向瓊脂擴散試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量;雙向瓊脂擴散試驗可用來分析和鑒定標本中多種抗原或抗體成份,并用以
瓊脂擴散試驗(單向和雙向)
實驗概要可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。基本類型有單向擴散和雙向擴散兩種。本文介紹了單向和雙向兩種瓊脂擴散試驗的操作流程。單向瓊脂擴散試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量;雙向瓊脂擴散試驗可用來分析和鑒定標本中多種抗原或抗體成份,并用以
單向、雙向免疫瓊脂擴散和免疫電泳2
二、實驗材料 1%瓊脂(生理鹽水配制)管,每管約4ml 載玻片 打孔器及打孔模板 微量加樣器及塑料吸頭 抗原:0.5μg/ml 牛血清白蛋白(BSA)、0.5μg/ml 人血清白蛋白(HSA) 抗體:兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋白 濕盒 三、實驗方法 1.將已
單向、雙向免疫瓊脂擴散和免疫電泳1
可溶性抗原與相應抗體以合適的比例發生特異反應時,在一定溫度和電解質存在的條件下,形成肉眼可見的沉淀物,稱為沉淀反應。沉淀反應的抗原可以是多糖、蛋白質、脂類等。 根據抗原與抗體的不同條件及其它因素,沉淀反應可以分為以下三種主要形式。即:環狀沉淀反應(ring precipitation
單向、雙向免疫瓊脂擴散和免疫電泳(圖)
可溶性抗原與相應抗體以合適的比例發生特異反應時,在一定溫度和電解質存在的條件下,經過一定的時間,形成肉眼可見的沉淀物,稱為沉淀反應。沉淀反應的抗原可以是多糖、蛋白質、脂類等。根據抗原與抗體的不同條件及其它因素,沉淀反應可以分為以下三種主要形式。即:環狀沉淀反應(ring precipitatio
單向、雙向免疫瓊脂擴散和免疫電泳1
可溶性抗原與相應抗體以合適的比例發生特異反應時,在一定溫度和電解質存在的條件下,形成肉眼可見的沉淀物,稱為沉淀反應。沉淀反應的抗原可以是多糖、蛋白質、脂類等。 根據抗原與抗體的不同條件及其它因素,沉淀反應可以分為以下三種主要形式。即:環狀沉淀反應(ring precipitation
單向、雙向免疫瓊脂擴散和免疫電泳(圖)(三)
三、實驗方法1.將已溶化的1%鹽水瓊脂管放58℃~60℃水浴箱中平衡溫度備用。2.將載玻片置于水平桌面上,傾注已溶化瓊脂3.5~4ml,使成厚度約1.5mm瓊脂板(注意:傾注速度不要過快,以免瓊脂溢出載玻片;傾注過程要連續以保證瓊脂板均勻、平滑)。3.瓊脂凝固后,將打孔模板置于瓊脂板下,然后用打孔器
單向、雙向免疫瓊脂擴散和免疫電泳(圖)(四)
(三) 免疫電泳(Immunoelectrophoresis)——示教一、基本原理免疫電泳法是將凝膠電泳與雙向免疫擴散兩種技術相結合的一種實驗方法。在電場作用下標本中各組分因電泳遷移率不同而分成區帶,然后沿電泳平行方向將凝膠挖一溝槽,將抗體加入溝槽內,使抗原與抗體相互擴散而形成沉淀線。根據沉淀線的數
單向、雙向免疫瓊脂擴散和免疫電泳(圖)(二)
(二)人血清中IgG正常值的測定: 1.將已制備好的抗體瓊脂板置打孔模板上,每一瓊脂板可打孔4個(孔徑3mm,孔距10mm)。 2.將單位正常人血清用PBS分別作1/50稀釋。 3.用微量加樣器分別取1/50稀釋的單人份血清標本10μl加入孔中,每份標本應各加兩孔。? 4.作好標記放濕
瓊脂擴散實驗——單向瓊脂擴散
實驗材料待檢血清試劑、試劑盒生理鹽水瓊脂粉儀器、耗材微量進樣器打孔器玻璃板濕盒實驗步驟1. ?將適當稀釋(事先滴定)的診斷血清與予溶化的2%瓊脂在60℃水浴預熱數分鐘后等量混合均勻制成免疫瓊脂板。2. ?在免疫瓊脂板上按一定距離(1.2~1.5厘米)打孔,見圖1。圖1 ?單向瓊脂擴散試驗抗原孔位置示
瓊脂擴散實驗——雙向瓊脂擴散
實驗材料待測血清試劑、試劑盒生理鹽水瓊脂粉儀器、耗材載玻片打孔器微量進樣器實驗步驟1. ?取一清潔載玻片,傾注3.5~4.0毫升加熱熔化的1%食鹽瓊脂制成瓊脂板。2. ?凝固后,用直徑3毫米打孔器,孔間距為5毫米。孔的排列方式如圖2所示。圖2 雙向瓊脂擴散原抗體孔位置示意圖3. ?用微量進樣器于中央
單向瓊脂擴散試驗(Single-immunodiffusion-test)
可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。單向瓊脂擴散試驗(Single immunodiffusion test)—人血清中IgG、IgA、IgM的測定。??? 單向瓊脂擴散試驗是一種定量試驗,將抗體混合于瓊脂內,傾注于玻片或平皿上,凝固后在瓊脂上打孔,再將抗
單向瓊脂擴散實驗
一、原理單向瓊脂擴散實驗又稱單向免疫擴散實驗。指可溶性抗原在相應抗體的瓊脂介質中的擴散,可定性、定量抗原。二、操作步驟?1.取一塊干凈的玻璃板,用少量75%乙醇沖洗,晾干后置于水平臺,將1%瓊脂糖融化,56℃水浴中保溫。2.取15ml瓊脂糖加到56℃預熱玻璃管中,加入約200微升抗血清,充分混勻后鋪
雙向瓊脂擴散試驗(Double-immunodiffusion-test)
可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。雙向瓊脂擴散試驗(Double?immunodiffusion?test)?抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中,兩者各自向四周擴散,如兩者相對應,濃度比例合適,則經一定時間后,在抗原、抗體孔之間出現清晰致密的白色沉淀線。
關于單向瓊脂擴散試驗的基本介紹
單向瓊脂擴散試驗是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量抗體與瓊脂混勻,澆注成板,凝固后,在板上打孔,孔中加入抗原,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。 將適量抗體與瓊脂混勻,澆注成板,凝固后,在板上打孔,孔中加入抗原,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。一定時間
雙向瓊脂擴散實驗
一、原理雙向瓊脂擴散實驗,是將抗原和相應抗體分別加入同一凝膠板內的相鄰小孔中。兩者相互擴散,當擴散到他們的濃度比例合適的部位相遇時,就會形成抗原抗體復合物的沉淀。二、操作步驟1.取一塊干凈的玻璃板,用少量75%乙醇沖洗,晾干后置于水平臺,將1%瓊脂糖融化,56℃水浴中保溫。2.將瓊脂糖鋪于玻璃板上,
雙向瓊脂擴散的概念
中文名稱雙向瓊脂擴散英文名稱double immunodiffusion定 義將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠的小孔中,兩者自由向四周擴散并相遇,在比例合適處形成沉淀線。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)
雙向瓊脂擴散的定義
中文名稱雙向瓊脂擴散英文名稱double immunodiffusion定 義將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠的小孔中,兩者自由向四周擴散并相遇,在比例合適處形成沉淀線。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)
單向擴散試驗
單向擴散試驗:瓊脂內混入抗體,待測抗原從局部向瓊脂內自由擴散,如抗原和相應抗體結合,則形成沉淀環。1、試管法:將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中,注入小試管內,上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散,在抗原抗體比例恰當位置形成沉淀環。2、平板法:是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內,未凝固前傾
關于雙向瓊脂擴散試驗的檢查情況介紹
一、雙向瓊脂擴散試驗的正常值: 沉淀線靠近抗原孔,則提示抗體含量大;靠近抗體孔,則提示抗原含量較多;不出現沉淀線則表明抗體或抗原的缺乏或抗原過剩;另外,如出現多條沉淀線,則說明抗原和抗體皆不是單一的成分。因此,可用于鑒定抗原或抗體的純度。 二、雙向瓊脂擴散試驗的注意事項: 不合宜人群:無特
簡述雙向瓊脂擴散試驗的臨床意義
雙向瓊脂擴散試驗的異常結果:這個實驗中的抗原抗體并沒有特別固定,雙向瓊脂擴散試驗常用于定性檢測,也可用于半定量檢測。可用已知的抗體鑒定未知的抗原,或用已知的抗原鑒定未知的抗體。濃度不同,形成不同的沉淀的線。臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作為原發性肝癌的早期輔助診斷。 雙向瓊
雙向瓊脂擴散結果分析
雙向瓊脂擴散試驗常用于定性檢測,也可用于半定量檢測。 將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉淀線。根據有否出現沉淀線,可用已知的抗體鑒定未知的抗原,或用已知的抗原鑒定未知的抗體。 臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血
雙向免疫擴散與單向免疫擴散的區別
雙向免疫擴散是指可溶性抗原與相應抗體在瓊脂介質中相互擴散,彼此相遇后形成一定類型的特異性沉淀線。沉淀線的特征與位置不僅取決于抗原抗體的特異性及相互間比例,而且與其分子大小及擴散速度相關。當抗原、抗體存在多個系統時,可呈現多條沉淀線乃至交叉反應。依據沉淀線的形態、條數、清晰度及位置可了解抗原或抗體的若
臨床化學檢查方法介紹雙向瓊脂擴散試驗介紹
雙向瓊脂擴散試驗介紹: 雙向瓊脂擴散試驗常用于定性檢測,也可用于半定量檢測。將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉淀線。根據有否出現沉淀線,可用已知的抗體鑒定未知的抗原,或用已知的抗原鑒定未知的抗體。臨床常用本方法檢查原
關于雙向瓊脂擴散試驗的基本信息介紹
雙向瓊脂擴散試驗常用于定性檢測,也可用于半定量檢測。將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉淀線。根據有否出現沉淀線,可用已知的抗體鑒定未知的抗原,或用已知的抗原鑒定未知的抗體。臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲
雙向瓊脂擴散技術的的技術特點和原理
中文名稱雙向瓊脂擴散英文名稱double immunodiffusion定 義將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠的小孔中,兩者自由向四周擴散并相遇,在比例合適處形成沉淀線。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)
肝功能化學檢測項目介紹雙向瓊脂擴散試驗
雙向瓊脂擴散試驗介紹: 雙向瓊脂擴散試驗常用于定性檢測,也可用于半定量檢測。將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉淀線。根據有否出現沉淀線,可用已知的抗體鑒定未知的抗原,或用已知的抗原鑒定未知的抗體。臨床常用本方法檢查原
免疫瓊脂雙向擴散實驗具體步驟
瓊脂擴散( agar diffusion )為可溶性抗原與抗體在瓊脂凝膠中所呈現的一種沉淀反應。當對應的抗原、抗體在半固體瓊脂終相遇,且二者比例適當時,便出現可見的白色沉淀線,這組沉淀線是一組抗原、抗體的特異性復合物。當瓊脂中有多組不同的抗原、抗體存在時,便各自依其擴散速度的差異,再適當的部位形成獨
凝膠內沉淀試驗:單向擴散試驗
單向擴散試驗:瓊脂內混入抗體,待測抗原從局部向瓊脂內自由擴散,如抗原和相應抗體結合,則形成沉淀環。1、試管法:將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中,注入小試管內,上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散,在抗原抗體比例恰當位置形成沉淀環。2、平板法:是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內,未凝固前傾
單向擴散試驗的影響因素
1.抗血清必須特異性強、效價高、親和力強,在良好條件下保存。2.每次測定都必須作標準曲線。3.每次測定時必須用質控血清作質控。4.注意雙環現象(出現了兩種抗原性相同成分)。