一、原理
單向瓊脂擴散實驗又稱單向免疫擴散實驗。指可溶性抗原在相應抗體的瓊脂介質中的擴散,可定性、定量抗原。
二、操作步驟
1.取一塊干凈的玻璃板,用少量75%乙醇沖洗,晾干后置于水平臺,將1%瓊脂糖融化,56℃水浴中保溫。
2.取15ml瓊脂糖加到56℃預熱玻璃管中,加入約200微升抗血清,充分混勻后鋪于玻璃板上,厚度約為1㎜。
3.待凝膠凝固后打孔,直徑為3㎜,將孔內瓊脂弄出。
4.將系列稀釋的標準抗原和待檢抗原分別加到凝膠孔內,每孔5微升。
將凝膠板置于濕盒內,室溫過夜,觀察結果。
三、實驗結果
發現沉淀環的大小與抗原的濃度成反比,基本成線性相關。其大小不僅與孔中抗原的濃度相關,而且和瓊脂中抗體的濃度有關。