靶細胞殺傷實驗總論2
2、流式細胞標記法 （1）PE-mAb/FITC-annexin V 熒光標記法 正常細胞的磷酯酰絲氨（phosphatidylserine，PS）位于細胞膜內表面，細胞凋亡時翻轉露于膜外側，可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的釋放。將效應細胞與靶細胞充分共育后，用PE結合的效應細胞特異性單克隆抗體（如CD8-PE）標記效應細胞（不能與PE-mABA結合的細胞即為靶細胞），再用FITC- annexin V標記凋亡靶細胞，用流式細胞儀區分并定量此三類不同的細胞群，即可計算出效應細胞殺傷靶細胞百分數。 本法的優點 ①簡單快捷，無需預標記，直接將上二試劑加入測定管即可； ②與51Cr法相關性好（r=0.989），在早期時段更為靈敏，還可在進行分析，尤其適用于動力學分析； ③可允許E與T長時間共育，......閱讀全文
靶細胞殺傷實驗總論－2
2、流式細胞標記法?（1）PE-mAb/FITC-annexin V 熒光標記法?正常細胞的磷酯酰絲氨（phosphatidylserine，PS）位于細胞膜內表面，細胞凋亡時翻轉露于膜外側，可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料
靶細胞殺傷實驗總論－1
細胞介導的免疫反應（cell mediated immune， CMI）在機體抗感染及抗腫瘤免疫、移植排斥反應和自身免疫病中發揮重要的作用。CMI的主要效應細胞之一為細胞毒T淋細胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）。目前在醫學基礎與臨床研究中重視CTL活性測定，將其作為
靶細胞殺傷實驗：LDH法
一、效應細胞的制備 激惹5天后，于無菌條件下取出受鼠引流的腹股溝淋巴結，100目鋼網研磨，調整細胞濃度為2×107.ml-1。臺盼藍色要求存活率>95%。 二、靶細胞的制備 P815細胞株系DBA/2小鼠的肥大細胞瘤細胞株。連續傳代培養，調整細胞濃度為2×105/ml或3.33×1
靶細胞殺傷實驗：AnnexiV標記法
正常細胞的磷酯酰絲氨（phosphatidylserine，PS）位于細胞膜內表面，細胞凋亡時翻轉露于膜外側，可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的釋放。將效應細胞與靶細胞充分共育后，用PE結合的效應細胞特異性單克隆抗體（如CD
靶細胞殺傷實驗：CFSE/PI法
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，老外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老了，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確。1、計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達到2uM，37度30分鐘
靶細胞殺傷實驗：CFSE/PI法
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，老外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老了，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確。 1、計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達到2u
靶細胞殺傷實驗：Cr51法
一、原理?用Na2 51 CrO 4 標記靶細胞，若待檢效應細胞能殺傷靶細胞，則51 Cr( 鉻) 從靶細胞內釋出。以γ計數儀測定釋出的51 Cr 放射活性，靶細胞溶解破壞越多，51 Cr 釋放就越多，上清液的放射活性也就越高，應用公式可計算出待檢效應細胞的殺傷活性。?二、步驟?（以CTL殺傷腫
殺傷靶細胞的過程
CTL殺傷靶細胞是一個連續過程，可分為三個階段，主要研究內容如下：1、效應靶細胞結合：CTL是通過其膜上的受體TCR，即Ti-CD3分子與靶細胞結合，此時膜上的淋巴細胞功能相關抗原Ⅰ與靶細胞膜上的配基Ⅰ，又稱細胞內粘附分子相互作用，即靶細胞與效應細胞初步接觸。此時親和力低，為非特異性的，但可促使TC
靶細胞殺傷實驗：MTT和CCK8比較
Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。?WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒
流式細胞術測效靶細胞殺傷實驗
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，老外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老了，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確，這也是偶參照老外的方法吧。1 計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度
CD8+T細胞殺傷靶細胞的過程
CTL殺傷靶細胞是一個連續過程，可分為三個階段，主要研究內容如下： 1、效應靶細胞結合：CTL是通過其膜上的受體TCR，即Ti-CD3分子與靶細胞結合，此時膜上的淋巴細胞功能相關抗原Ⅰ與靶細胞膜上的配基Ⅰ，又稱細胞內粘附分子相互作用，即靶細胞與效應細胞初步接觸。此時親和力低，為非特異性的，但可
細胞毒性T細胞殺傷靶細胞的過程
CTL殺傷靶細胞是一個連續過程，可分為三個階段，主要研究內容如下： 1、效應靶細胞結合：CTL是通過其膜上的受體TCR，即Ti-CD3分子與靶細胞結合，此時膜上的淋巴細胞功能相關抗原Ⅰ與靶細胞膜上的配基Ⅰ，又稱細胞內粘附分子相互作用，即靶細胞與效應細胞初步接觸。此時親和力低，為非特異性的，但可
法測效靶細胞殺傷——用流式細胞術
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，國外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確。 具體參照如下：1、計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達到2uM,
簡述細胞毒性T淋巴細胞殺傷靶細胞的過程
CTL殺傷靶細胞是一個連續過程，可分為三個階段，主要研究內容如下： 1、效應靶細胞結合：CTL是通過其膜上的受體TCR，即Ti-CD3分子與靶細胞結合，此時膜上的淋巴細胞功能相關抗原Ⅰ與靶細胞膜上的配基Ⅰ，又稱細胞內粘附分子相互作用，即靶細胞與效應細胞初步接觸。此時親和力低，為非特異性的，但可
自然殺傷細胞和淋巴因子激活殺傷細胞的殺傷功能實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中，能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞，無需抗原或有絲分裂原刺激，亦不依賴抗體或補體，在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。 LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL
自然殺傷細胞和淋巴因子激活殺傷細胞的殺傷功能實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中，能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞，無需抗原或有絲分裂原刺激，亦不依賴抗體或補體，在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。 LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL
自然殺傷細胞和淋巴因子激活殺傷細胞的殺傷功能實驗
實驗方法原理NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中，能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞，無需抗原或有絲分裂原刺激，亦不依賴抗體或補體，在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。 LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL-2誘導下，獲得能殺傷NK抵抗的腫瘤細胞的功能，在過繼免疫治療腫
色譜法總論
1.色譜分析法：色譜法是一種分離分析方法，它利用樣品中各組分與流動相和固定相的作用力不同(吸附、分配、交換等性能上的差異)，先將它們分離，后按一定順序檢測各組分及其含量的方法。2.色譜法的分離原理：當混合物隨流動相流經色譜柱時，就會與柱中固定相發生作用(溶解、吸附等)，由于混合物中各組分物理化學性質
殺傷細胞功能的檢測實驗
實驗方法原理NK細胞存在于人或動物外周血、脾臟、淋巴結和骨髓中，能殺傷某些腫瘤細胞、病毒感染靶細胞，無需抗原或有絲分裂原刺激，也不依賴抗體或補體，在機體殺傷腫瘤、防御感染及免疫調節中發揮重要作用。LAK是NK或T細胞在體外高劑量IL-2誘導下，獲得能殺傷NK抵抗的腫瘤細胞的功能，在過繼免疫治療腫瘤中
什么是靶細胞？
靶細胞是指能識別某種特定激素或神經遞質并與之特異性結合而產生某種生物效應的細胞。
國家藥典委發布《人用基因治療制品總論（公示稿）》
近日，國家藥典委員會發布了《人用基因治療制品總論（公示稿）》，基因治療制品通常由含有工程化基因構建體的載體或遞送系統組成，其活性成分可為DNA、RNA、基因改造的病毒、細菌或細胞，通過將外源基因導入靶細胞或組織，替代、補償、阻斷、修正特定基因，以達到治療疾病的目的。 全文如下： 關于人用基因治療制
免疫學實驗自然殺傷細胞活性介紹
自然殺傷細胞活性介紹： 自然殺傷細胞又稱NK細胞，其主要的功能特征是對腫瘤細胞及病毒感染細胞具有非特異性的殺傷力，這種殺傷效應不依賴抗體與補體，體外檢測NK細胞活性是診斷NK細胞功能及其與某些疾病關系的一個重要手段。 自然殺傷細胞活性正常值： 自然釋放率要求100∶1，自然殺傷率不呈對數增
人自然殺傷細胞的功能分析實驗
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ? ? ? ???1975年，Herberman 等首次報道自然殺傷（nature
自然殺傷細胞的自然殺傷活性簡介
由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制，不依賴抗體，因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富，含有較大的嗜天青顆粒，顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早，在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞（包括部分細胞系）、病毒感染細胞
簡述靶細胞的機理
美國西北大學的研究人員破解了一些病毒具有的一種叉狀蛋白的結構,這些病毒正是通過這種結構進入細胞,繼而誘發感染。這種蛋白被稱為融合蛋白,即F蛋白,首先發現于副流感病毒5的外表面,在感染細胞前通過F蛋白可以將病毒的衣殼與宿主細胞膜融合。隨后,病毒核心內的遺傳基因便可以進入宿主細胞,進行自身的復制增殖
靶細胞的生理作用
靶細胞中有一種特殊的糖蛋白分子，稱受體。每種激素或遞質與其特異、專一的受體結合．以極低的濃度發揮強大的調節作用。激素對作用的組織具有較高的組織特異性，僅能作用于特定的靶細胞。
靶細胞的作用原理
細胞除通過相鄰的連接物質外，更多的是通過分泌各種化學物質來調節其他細胞的代謝與功能。激素由特殊分化的內分泌細胞分泌，通過血液循環或組織液擴散，作用于特定的靶細胞，調節其代謝與功能。
靶細胞的釋義介紹
能夠接受內分泌細胞（或器官）分泌激素刺激的器官或細胞稱為靶器官（target organ）或靶細胞（target cell）。靶細胞具有與激素特異性結合的受體。含氮激素的受體位于靶細胞膜上,類固醇激素的受體位于靶細胞質內,它們通過靶細胞內不同的信號傳遞系統,作用于細胞核內相應的基因,從而調節控制
H33342釋放法檢測單核巨噬細胞的胞毒作用
實驗概要本實驗利用H33342釋放法檢測了單核-巨噬細胞的胞毒作用。H33342(Hoechst33342)為DNA的特異性熒光染料，可用其標記腫瘤細胞以檢測單核細胞對腫瘤細胞的殺傷效應。被損傷的靶細胞DNA斷裂后，H33342釋放到上清液中，采用微量熒光儀可定量測定上清液中的熒光強度。效應細胞的殺
MHC對免疫應答中免疫細胞相互作用的約束作用（一）
?? MHC另一個重要的生物學功能是約束免疫應答過程中各類免疫細胞的相互作用，又稱為MHC的約束性（MHc restriction)，包括免疫應答感應階段Mφ-Th之間，反應階段Th-B之間，以及效應階段Tc-靶細胞之間的相互作用。MHc I類和Ⅱ類抗原分別對不同細胞起約束作用。 （一)M