標記裂解培養細胞實驗
基本方案 溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞）基本方案 溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞）SDS煮沸法裂解細胞實驗方法原理實驗材料待標記的培養細胞 試劑、試劑盒37℃標記培養液 &n......閱讀全文
標記裂解培養細胞實驗
基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞）基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞）SDS煮沸法裂解細胞實驗方法原理實驗材料待標記的培養細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒37℃標記培養液 ? ? ?
32－P－標記裂解培養細胞實驗
基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞） 基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞） SDS煮沸法裂解細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
32－P－標記裂解培養細胞實驗
實驗方法原理 實驗材料 待標記的培養細胞試劑、試劑盒 37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS) ／磷酸鹽平衡鹽水(PBS)溫和裂解緩沖液／RIPA 裂解緩沖液儀器、耗材 樹脂玻璃擋板(1 in 厚)取液器吸頭樹脂玻璃盒37℃微量離心管一次性
32－P－標記裂解培養細胞實驗——SDS煮沸法裂解細胞
實驗材料待標記的培養細胞固相化金黃色葡萄球菌（可選）試劑、試劑盒37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS) ／磷酸鹽平衡鹽水(PBS)SDS裂解緩沖液RIPA 校正液免疫沉淀洗液儀器、耗材橡皮細胞刮子Sorvall 冷凍離心機(或其他)樹脂玻
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
溫和去污裂解法 SDS煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 培養細胞 試劑、試劑盒
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
實驗材料?培養細胞試劑、試劑盒?DMEMHClTBSTris儀器、耗材?微量離心管Plexiglas盒吸頭細胞刮子冷凍離心機實驗步驟 1.? 培養待標記的細胞至適當的生長期。?對于貼壁細胞：?2a.? 吸去培養液，用37℃的含血清不加標記物的標記培養液洗盡殘存的含磷酸鹽培養液，吸盡該培養液。?3a.
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
溫和去污裂解法 SDS煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 培養細胞 試劑、試劑盒
培養細胞標記和裂解物的制備實驗——溫和去污裂解法
實驗材料培養細胞試劑、試劑盒DMEMHClTBSTris儀器、耗材微量離心管Plexiglas盒吸頭細胞刮子冷凍離心機實驗步驟1. ?培養待標記的細胞至適當的生長期。?對于貼壁細胞：?2a. ?吸去培養液，用37℃的含血清不加標記物的標記培養液洗盡殘存的含磷酸鹽培養液，吸盡該培養液。?3a. ?加入
培養細胞標記和裂解物的制備實驗——SDS煮沸法
實驗材料培養細胞試劑、試劑盒SDS裂解液RIPA校正液免疫沉淀洗液儀器、耗材離心機培養箱玻璃培養管實驗步驟1. ?標記和洗滌細胞（溫和去污裂解法，步驟1~7）。?2a. ?對于貼壁細胞：加入適量SDS裂解液至培養皿中。（35 mm 培養皿加0.1 ml，50 mm 培養皿0.25 ml，100 ml
免疫沉淀的培養細胞的裂解實驗_單層培養的細胞的裂解
實驗方法原理培養的動物細胞一般使用溫和去垢劑來裂解。如果低濃度的去垢劑就能引起細胞的充分裂解（如1%NP-40或1%TritonX-100)，那么這對目標蛋白的影響可能比勻漿方法更溫和。去垢劑的選擇必須根據免疫沉淀所用的抗體的識別表位的性質來決定。實驗材料單層細胞或懸浮細胞試劑、試劑盒裂解緩沖液PB
32P標記裂解培養細胞—溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞）
本實驗介紹了用?32P 標記和裂解培養細胞，以用于蛋白質免疫沉淀分析。這種方法適用以?32P 標記任何細胞成分，可用于各種貼壁或不貼壁培養的昆蟲、鳥類和哺乳類細胞。實驗材料待標記的培養細胞試劑、試劑盒37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS)
32P標記裂解培養細胞—－溫和去垢劑裂解法（對非貼壁）
實驗材料待標記的培養細胞試劑、試劑盒37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS) ／磷酸鹽平衡鹽水(PBS)溫和裂解緩沖液／RIPA 裂解緩沖液儀器、耗材樹脂玻璃擋板(1 in 厚)取液器吸頭樹脂玻璃盒37℃微量離心管一次性吸管橡皮細胞刮子So
氮艙減壓法裂解培養細胞實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過來自增壓艙中的氮氣減壓膨脹來破碎細胞是一種快速、有效的細胞和組織的勻漿方法，能釋放完整的細胞器和制備細胞膜。該方法的原理很簡單：細
氮艙減壓法裂解培養細胞實驗
實驗方法原理通過來自增壓艙中的氮氣減壓膨脹來破碎細胞是一種快速、有效的細胞和組織的勻漿方法，能釋放完整的細胞器和制備細胞膜。該方法的原理很簡單：細胞放在一個壓力艙中，在高壓下（約5500kPa，相當于800psi)氮氣首先被溶解在細胞中，當壓力突然消失時，氮從溶液中迅速氣化，并引起細胞膜的拉伸和擴展
氮艙減壓法裂解培養細胞實驗
實驗方法原理 通過來自增壓艙中的氮氣減壓膨脹來破碎細胞是一種快速、有效的細胞和組織的勻漿方法，能釋放完整的細胞器和制備細胞膜。該方法的原理很簡單：細胞放在一個壓力艙中，在高壓下（約5500kPa，相當于800psi)氮氣首先被溶解在細胞中，當壓力突然消失時，氮從溶液中迅速氣化，并引起細胞膜的拉伸和擴
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記單層培養細胞
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒FCS磷酸鹽儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基，加入新鮮的無磷酸培養基，培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基，并加?32P 磷酸鹽至 2
免疫沉淀的培養細胞的裂解實驗_懸浮生長的細胞的裂解
實驗材料細胞實驗步驟①細胞在480g的離心力條件下離心10min，棄去上清。②用冷PBS洗細胞兩次，然后將洗過的細胞置于冰上。③重新懸浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷卻到4℃)中含大約1X107?5X107個細胞。④冰上孵育細胞15min，并不時地振動小管。⑤4℃條件下20000g離心裂解液10min
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記懸浮培養的HeLa細胞
實驗材料細胞試劑、試劑盒磷酸儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 培養細胞至對數期，600 g 離心 5 分鐘。2. 棄上清，用無磷酸培養基懸浮細胞。3. 培養細胞 3~4 小時以耗盡它們的磷酸儲備。4. 再次離心，棄上清，用無磷酸培養基懸浮，加?32P 磷酸鹽至 20 μCi/ml 培養液，培養 1
用于免疫沉淀的培養細胞的裂解實驗
實驗方法原理 培養的動物細胞一般使用溫和去垢劑來裂解。如果低濃度的去垢劑就能引起細胞的充分裂解（如1%NP-40或1%TritonX-100)，那么這對目標蛋白的影響可能比勻漿方法更溫和。去垢劑的選擇必須根據免疫沉淀所用的抗體的識別表位的性質來決定。實驗材料 單層細胞或懸浮細胞試劑、試劑盒 裂解緩沖
用于免疫沉淀的培養細胞的裂解實驗
方法A:單層培養的細胞的裂解 方法B:懸浮生長的細胞的裂解 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養的動物細胞一般使用溫和去垢劑來裂解。如果低濃度的去垢劑就能引起細胞的充
液體培養液中裂解感染實驗
實驗材料 λgtll 重組噬菌體大腸桿菌 Y1090 hsdR 菌株試劑、試劑盒 細胞裂解液IPTGMgS04?7 H20苯甲基磺酰氯SMLB 培養液儀器、耗材 SorvallSS-34 轉子或同等產品沸水水浴液氮實驗步驟 材料緩沖液劑及溶液貯存液，緩沖液及試劑的組分見附錄 1。將貯存液稀釋至合適濃
液體培養液中裂解感染實驗
本方法適用于對可免疫檢測的融合蛋白進行快速篩選λgtll 重組噬菌體。但在其他條件下（如：對感染率的優化，42°C λ噬菌體基因的失活及裂解前收集)，此方法亦可用于產生制備量的融合蛋白 (Runge1992)。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾
液體培養液中裂解感染實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 λgtll 重組噬菌體 大腸桿菌 Y1090 hsdR 菌株 試劑、試劑盒 細胞裂解液
細胞培養為什么要先裂解紅細胞
紅細胞裂解液一、基本介紹紅細胞裂解液是一種去除紅細胞最簡便易行的方法，即用裂解液裂解紅細胞，它 既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除 方法,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化，淋巴細胞的分離純化以及組織細 胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解
于免疫印跡的動物培養細胞、酵母和細菌的裂解實驗
實驗方法原理 去垢劑裂解細胞法通常用于培養的動物細胞。典型的離子型去垢劑SDS(如2%SDS)能充分地裂解細胞。培養的動物細胞和細菌，如可以使用這種方式裂解。假如實驗所用的抗體識別的抗原決定簇取決于自然空間構象，并對還原環境敏感，那么在裂解緩沖液中應除去二硫蘇糖醇，并建議使用非還原/無脲的凝膠實驗材
用于免疫印跡的動物培養細胞、酵母和細菌的裂解實驗
實驗方法原理去垢劑裂解細胞法通常用于培養的動物細胞。典型的離子型去垢劑SDS(如2%SDS)能充分地裂解細胞。培養的動物細胞和細菌，如可以使用這種方式裂解。假如實驗所用的抗體識別的抗原決定簇取決于自然空間構象，并對還原環境敏感，那么在裂解緩沖液中應除去二硫蘇糖醇，并建議使用非還原/無脲的凝膠實驗材料
用于激酶分析的細胞裂解實驗
實驗方法原理 實驗材料 培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 70% 生長成片／懸浮細胞濃度 為 10^6 細胞／ml）試劑、試劑盒 PBS裂解緩沖液蛋白酶抑制劑儲存液儀器、耗材 微量離心機實驗步驟 1. 用預冷的 PBS 洗細胞 2 次，將最后的洗液盡可能吸盡。2. 加入 0.
用于激酶分析的細胞裂解實驗
實驗材料培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 70% 生長成片／懸浮細胞濃度 為 10^6 細胞／ml）試劑、試劑盒PBS裂解緩沖液蛋白酶抑制劑儲存液儀器、耗材微量離心機實驗步驟1. 用預冷的 PBS 洗細胞 2 次，將最后的洗液盡可能吸盡。2. 加入 0.75 ml 裂解緩沖液重懸
用于激酶分析的細胞裂解實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 7
細胞裂解方法：化學裂解、酶裂解和機械裂解
裂解方法包括化學裂解、酶裂解和機械裂解。化學裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法，通常會很少使DNA 斷裂。這兩種方法（包括SDS 和溶菌酶處理等）提取純化DNA中常用的方法。機械裂解可以更均一的裂解細胞，同化學裂解相比，機械處理具有更高的裂解效率和更低的選擇性。機械處理可以更劇烈和全面的裂解細胞，