免疫組化SABC法操作流程
1、洗載玻片將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中，目的是為了是載玻片上的硅膠等除去，同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整，便于組織吸附，然后置于清水中清洗，除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4（大約沖一個小時左右），再將載玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 oC溫箱中，將多聚賴氨酸涂布于玻片的表面，由于Lys帶正電，而大多數的組織帶負電荷，從而產生吸附作用。2、包埋組織先在鐵模具中加入一些液態石蠟，先稍微冷卻，然后再將待包埋的組織置于石蠟之中，并排列整齊，再將塑料模具盒蓋上，最后加入少許液體石蠟，進行冷凍，使石蠟變成固態。3、切片將包埋好的組織從模具上取下來，并置于石蠟切片機上，切片機通過調節上下左右來來使組織和切割方向一致，然后調節切片的厚度，一般為5 um，如果比較難切，則可以適當調整厚度，用毛筆將切割的載玻片向外拉，并用小鑷子將包含有完整組織的載玻片置于40 oC溫水中。4、撈組織當組織......閱讀全文
免疫組化SABC法操作流程
?1、洗載玻片將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中，目的是為了是載玻片上的硅膠等除去，同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整，便于組織吸附，然后置于清水中清洗，除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4（大約沖一個小時左右），再將載玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 oC溫箱中，將多
免疫組化SABC法操作流程
1、洗載玻片將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中，目的是為了是載玻片上的硅膠等除去，同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整，便于組織吸附，然后置于清水中清洗，除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4（大約沖一個小時左右），再將載玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 ℃溫箱中，將多聚賴
免疫組化SABC法操作流程
1、洗載玻片將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中，目的是為了是載玻片上的硅膠等除去，同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整，便于組織吸附，然后置于清水中清洗，除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4（大約沖一個小時左右），再將載玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37?oC溫箱中，將多聚賴氨
免疫組化SABC法與SV法
實驗概要本文介紹了免疫組化SABC法與SV法。實驗原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一種顯示組織和細胞中抗原分布的簡便而敏感的免疫組化染色方法。親和素(Avidin)存在于雞蛋中，分子量67000。是一種堿性蛋白質，具有對生物素近乎于共價鍵的結合力。鏈霉親和
免疫組化SABC法與SV法
實驗概要本文介紹了免疫組化SABC法與SV法。實驗原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一種顯示組織和細胞中抗原分布的簡便而敏感的免疫組化染色方法。親和素(Avidin)存在于雞蛋中，分子量67000。是一種堿性蛋白質，具有對生物素近乎于共價鍵的結合力。鏈霉親和
免疫組化ABC法操作流程
1、4%多聚甲醛常規灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）過夜，蠟塊制作，切片，貼片。0.01M PBS清洗5min×3次；2、脫蠟、水化：用二甲苯兩次10min，用梯度乙醇由低濃度到高濃度進行水化；3、加入0.3%的過氧化氫甲醇溶液（甲醇80ml＋0.01M PBS 100ml＋30%過氧化氫）
免疫組化染色方法（SP法和SABC法）
SP法1）脫蠟、水化；2）PBS洗2～3次各5分鐘；3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室溫靜置10分鐘；4）PBS洗2～3次各5分鐘； 5）抗原修復；6）PBS洗2～3次各5分鐘；7）滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。8）滴加Ⅰ抗50μl，室溫靜置1小時或者4℃過夜或者
SABC法親和素與生物素系統的操作流程
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法，它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質，相對分子質量60000，不含
SABC法親和素與生物素系統的操作流程
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法，它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質，相對分子質量60000，不含
免疫組化的操作流程
實驗概要本文介紹了免疫組織化學實驗操作流程，主要有：脫蠟和水化，抗原修復及免疫組織化學染色等步驟。實驗原理免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位
免疫組化的操作流程
實驗概要本文介紹了免疫組織化學實驗操作流程，主要有：脫蠟和水化，抗原修復及免疫組織化學染色等步驟。實驗原理免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位
石蠟切片免疫組化染色實驗操作流程
1．石蠟切片脫蠟至水：（石蠟切片染色前應置 60℃ 1 小時） 。① 二甲苯 、II，各 10 分鐘。② 梯度酒精：100%，2 分鐘 95%，2 分鐘 80%，2 分鐘 70% 2 分鐘。③ 蒸餾水洗：5 分鐘，2 次（置于搖床）。2．過氧化氫封閉內源性過氧化物酶：3%H2 O2 ，室溫 10 分
免疫組化（LP法）操作步驟
1.切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行 2.緩沖液洗3min/2次。 3.為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在Hydrogen Peroxide Block中孵育10-15分鐘。 4.緩沖液洗5min/2次。 5.滴加UltraVBlock，在室溫下
免疫組化（SP法）操作步驟
免疫組化（SP法）操作步驟1． 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ul
免疫組化流程
實驗步驟?第一天：1、組織切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分別浸泡15min，脫蠟3、水化：100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注：以下步驟切勿讓組織處于干燥狀態！4、將切片置于修復盒，
免疫細胞化學SP法與SABC法的區別
免疫組織化學又稱免疫細胞化學，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。免疫組織化學的方法有多種，其實都大同小異，不同點只是在于顯色基團！SP法1）脫蠟、水化；2）PBS洗2～3次各5分鐘；3）3%H2O2（80%
關于免疫組化法的操作步驟介紹
1． 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行 2.緩沖液洗 3min/2 次。 3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。 4. 緩沖液洗 5min/2 次。 5. 滴加 Ultra
高效液相色譜法的操作流程
流程：如圖1所示，溶劑貯器⑴中的流動相被泵⑵吸入，經〔3〕梯度控制器按一定的梯度進行混合然后輸出，經⑷測其壓力和流量，導入(5進樣閥（器）經⑹保護柱、⑺分離柱后到⑻檢測器檢測，由⑽數據處理設備處理數據或⑾記錄儀記錄色譜圖，⑿餾分收集器收集餾分，⒀為廢液。
免疫組化雙染實驗流程
一、脫蠟和水化方法同SP法。二、第一抗體的染色1、將切片浸在3%H2O2甲醇溶液（新鮮配制）中10 min，PBS沖洗3 min×3次；2、加100 ul（2滴）血清封閉溶液（試劑1）到切片上，室溫孵育10 min，倒掉（不能沖洗）；3、加入一抗（按照說明書推薦濃度和孵育條件）；4、使用含有0.05
免疫組化操作
?（一）、儀器設備1. 18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或用微波爐.2. 水浴鍋（二）、試 劑1. PBS緩沖液（pH7.2―7.4）2．0.01mol/L檸檬酸鈉緩沖液（CB,pH6.0,1000ml）3. 3%甲醇―H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制4. 風裱劑：a. 甘油和0.5mm
免疫組化的二抗還有區別的么！要怎么選？
免疫組化大家基本上都做過，你知道有二抗，也應該知道免疫組化的原理就是一抗結合到目標蛋白，再有二抗來進行信號放大，大概是這樣： 但是你知道二抗的信號放大實際上有多種方法……這就需要你進行二抗標記方法的選擇，最簡單的二抗標記方法是直接法： 就是直接在二抗上標記酶，比如HRP，來進行顯色，這樣的二
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法免疫組化可應用于：（1）確定組織細胞內抗原 (多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究；（2）診斷異常細胞，指導治療。實驗方法原理根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后，加入
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法 鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法 卵白素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）法 鏈霉親和素—生物素—過氧化物酶復合物（SABC）法 ? ? ? ? ? ?
免疫組化方法的具體實驗流程步驟
實驗流程簡介一、SP三步法1）石蠟切片，常規脫蠟至水。2)0.3%或3%H2O2去離子水（無色液體）孵育10-30分鐘，以滅活內源性過氧化物酶活性。3）蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘4）候選步驟：采用抗原修復：微波（建議30分鐘內4次中火）、高壓、酶修復方法。自然冷卻，再用3分鐘×3次.5）血清封閉：
磁珠法RNA－pulldown－的經典操作流程
采用鏈霉親和素磁珠（PuriMag G-strep 貨號PMG015）進行RNA pull-down?RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads??1.?RNA pull-down 第一天——生物素探針標記RNA1）前期準備：取出Pie
免疫組化的操作步驟
1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ，
免疫組化操作規程
（一）、儀器設備???1）18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或醫用微波爐；??? 2）水浴鍋（二）、試劑?? ? 1）PBS緩沖液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。? ? 2）0.01mo
免疫組化的操作步驟
一 免疫組化（SP法）操作步驟1． 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫組化的操作步驟
1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ，
免疫組化的操作步驟
一 免疫組化（SP法）操作步驟 1． 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行 2.緩沖液洗 3min/2 次。 3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。 4. 緩沖液洗 5min/