DNA結合蛋白的凝膠阻滯分析實驗
實驗材料 作為對照的核提取物或蛋白組分 核提取物或蛋白組分 試劑、試劑盒 Ficoll 400 聚乙烯醇 蔗糖染色液 10X Tris-氨基乙酸或Tris-硼酸-EDTA(TBE)緩沖液 4%~7% 中性聚丙烯酰胺凝膠 poly(dI-dC) 32P標記的對照DNA 32P標記的靶DNA 儀器、耗材 雜交膜 實驗步驟 ......閱讀全文
DNA－結合蛋白的凝膠阻滯分析實驗
凝膠阻滯試驗分析 DNA 結合蛋白的方法是 Fried 和 Crothers(1981) 發明的，它是第一次為大腸桿菌乳糖阻抑物與其 DNA 結合位點的相互作用提供了動態的分析方法。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料作為對照的核提取物
DNA－結合蛋白的凝膠阻滯分析實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 作為對照的核提取物或蛋白組分 核提取物或蛋白組分 試劑、試劑盒 Ficoll 400 聚
DNA－結合蛋白的凝膠阻滯分析實驗
實驗材料 作為對照的核提取物或蛋白組分核提取物或蛋白組分試劑、試劑盒 Ficoll 400聚乙烯醇蔗糖染色液10X Tris-氨基乙酸或Tris-硼酸-EDTA(TBE)緩沖液4%~7% 中性聚丙烯酰胺凝膠poly(dI-dC)32P標記的對照DNA32P標記的靶DNA儀器、耗材 雜交膜實驗步驟 材
凝膠阻滯
一、原理 電泳遷移率分析，也可稱作遷移電泳，凝膠電泳分析，凝膠遷移率分析，條帶移動分析或者凝膠阻滯分析，這種方法常用來研究蛋白質-DNA，蛋白質-RNA的相互作用，對照泳道（不含蛋白質的DNA/RNA探針）將出現單一的條帶。如果蛋白質與片段結合，形成大的復合物，因此在凝膠上遷移的速度慢從來遷移率減
DNA結合蛋白測定實驗
本實驗主要用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白。實驗方法原理本分析方法是一種簡單、快速和極為靈敏的用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白的方法。在電泳時，與末端標記的DNA片段特異結合的蛋白質阻滯了片段的遷移，因而產生對應于蛋白-DNA復合物的清晰電泳條帶。實驗材料質粒DNA試劑、
DNA結合蛋白測定實驗
實驗材料 質粒DNA試劑、試劑盒 dNTPDNA聚合酶Klenow酶TETAE溴化乙錠TEMED過硫酸銨BSA儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?用一種或多種限制性內切酶在100 μl 體積中消化10 μg 質粒人，產生25~100 bp ?的含有結合位點的DNA片段，并至少有一端是5’突出的
DNA結合蛋白的形成
它是解鏈酶(unwinding enzyme)類中的一種類型，發現于原核生物的大腸桿菌細胞內，由相同亞基組成的四聚體，分子量8×104，與單鏈DNA親和力極大，與雙鏈DNA結合力較差。因此，當DNA發生暫時性熔化時，它與DNA單鏈區結合而促使反應偏向單鏈的形成，使DNA在大大低于Tm(解鏈溫度)的溫
DNA結合蛋白測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本分析方法是一種簡單、快速和極為靈敏的用于檢測粗制提取物中序列特異性的DNA結合蛋白的方法。在電泳時，與末端標記的DNA片段特異結合的蛋白質阻滯了片段的遷移，因而產生對應于蛋白-DNA復合物的清晰電泳條帶。
什么是DNA結合蛋白？
中文名DNA結合蛋白外文名DNA binding protein別????名螺旋失穩蛋白形????成解鏈酶類中的一種類型結合效應DBP與單鏈DNA的結合作????用該單鏈DNA結合和識別作用
結合DNA的蛋白質
結構蛋白可與DNA結合，是非專一性DNA-蛋白質交互作用的常見例子。染色體中的結構蛋白與DNA組合成復合物，使DNA組織成緊密結實的染色質構造。對真核生物來說，染色質是由脫DNA與一種稱為組織蛋白的小型堿性蛋白質所組合而成；而原核生物體內的此種結構，則摻雜了多種類型的蛋白質。DNA可在組織蛋白的表面
DNA結合蛋白的磷酸化研究
磷酸化化學計量的確定及磷蛋白形成動力學的測定l??????磷酸化作用化學計量的確定1．在冰上建立下列反應混合液：Tris-HCl（50mmol/L；pH8.0）/MgCl2（10mmol/L）????????250μlATP（10mmol/L）????????????????????????????
單鏈DNA結合蛋白的功能簡介
單鏈DNA結合蛋白（Single-stranded DNA-binding protein，縮寫SSB或SSBP）又稱單鏈結合蛋白，是專門負責與DNA單鏈區域結合的一種蛋白質，為DNA復制、重組和修復所必需的成分。 防止兩條互補單鏈再次結合為雙螺旋，維持單鏈狀態。防止單鏈區域形成鏈內二級結構。
凝膠阻滯實驗分析RNA蛋白質作用常數實驗
凝膠阻滯實驗（gel reiardadon assay，又稱為 mobthty shift assay）方法簡單、靈敏，可以定量的特性使它在研究轉錄和基因調控中廣泛的應用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 結合蛋白的純化，確定一種已知或可能的 RNA 結合蛋白所識別的序列，建立反應常數（如親
凝膠阻滯實驗分析RNA蛋白質作用常數實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 凝膠阻滯實驗（gel reiardadon assay，又稱為 mobthty shift assay）方法簡單、靈敏，可以定量的特性使它在研究轉錄和基因調控中廣泛的應用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 結合蛋
凝膠阻滯實驗分析RNA蛋白質作用常數實驗
實驗方法原理 凝膠阻滯實驗（gel reiardadon assay，又稱為 mobthty shift assay）方法簡單、靈敏，可以定量的特性使它在研究轉錄和基因調控中廣泛的應用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 結合蛋白的純化，確定一種已知或可能的 RNA 結合蛋白所識別
DNA的主要功能結合DNA的蛋白質
結構蛋白可與DNA結合，是非專一性DNA-蛋白質交互作用的常見例子。染色體中的結構蛋白與DNA組合成復合物，使DNA組織成緊密結實的染色質構造。對真核生物來說，染色質是由脫DNA與一種稱為組織蛋白的小型堿性蛋白質所組合而成；而原核生物體內的此種結構，則摻雜了多種類型的蛋白質。DNA可在組織蛋白的表面
利用λ噬菌體文庫篩選－DNA－結合蛋白實驗
可利用合成雙鏈寡核苷酸篩選構建于λ噬菌體的 cDNA 表達文庫，以鑒定與特異 DNA 結合蛋白質相對應的克隆（Singhetal.1988,Vinsonetal.1988)。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒ATP結合緩沖液變性溶
利用λ噬菌體文庫篩選－DNA－結合蛋白實驗
試劑、試劑盒 ATP結合緩沖液變性溶液二硫蘇糖醇EDTA乙醇激酶 連接酶緩沖液酚氯仿篩選緩沖液SDS醋酸鈉TET4 噬菌體 DNA 連接酶T4 噬菌體多核苷酸激酶合成的寡核苷酸[a-32P]ATP非變性聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材 烤盤結晶皿平頭鑷子裝有防水黑墨水注射器硝酸纖維素濾膜Sephadex G
利用λ噬菌體文庫篩選－DNA－結合蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 ATP 結合緩沖液 變性溶液 二硫蘇糖醇 EDTA 乙醇激酶 連接酶緩沖液 酚 氯
單鏈DNA結合蛋白的基本內容
單鏈結合蛋白（SSB，single strand DNA-binding protein）：結合于螺旋酶沿復制叉方向向前推進產生的單鏈區，防止新形成的單鏈DNA重新配對形成雙鏈DNA或被核酸酶降解的蛋白質。 螺旋酶沿復制叉方向向前推進產生了一段單鏈區，但是這種單鏈DNA不會長久存在，會很快重新
分子遺傳學詞匯單鏈DNA結合蛋白
中文名稱：單鏈DNA結合蛋白外文名稱：Single-stranded DNA-binding protein定義：單鏈DNA結合蛋白（Single-stranded DNA-binding protein，縮寫SSB或SSBP）又稱單鏈結合蛋白，是專門負責與DNA單鏈區域結合的一種蛋白質，為DNA復
結合DNA的酶
核酸酶和連接酶：核酸酶是能夠切割DNA鏈的酶，因為它們催化磷酸二酯鍵的水解。從位于DNA鏈末端的核苷酸開始水解DNA的核酸酶稱為核酸外切酶。另一方面，直接切入DNA鏈的那些是內切核酸酶。分子生物學中使用最廣泛的核酸酶，稱為限制性內切酶，以切割特定序列的DNA。在自然界中，這種酶通過在進入細菌細胞時消
什么是非特異性的DNA結合蛋白
為DNA蛋白質之一種，是與單鏈DNA有強的親和性，與DNA復制、遺傳的重組等DNA代謝有關的蛋白質。也稱螺旋不穩定蛋白質（helix destabili－zing protein），又稱解DNA旋卷蛋白質（DNAuntwisting protein）。此蛋白質與單鏈DNA協同（cooperative
脫氧核糖核酸DNA結合DNA的蛋白質的介紹
結構蛋白可與DNA結合，是非專一性DNA-蛋白質交互作用的常見例子。染色體中的結構蛋白與DNA組合成復合物，使DNA組織成緊密結實的染色質構造。對真核生物來說，染色質是由脫DNA與一種稱為組織蛋白的小型堿性蛋白質所組合而成；而原核生物體內的此種結構，則摻雜了多種類型的蛋白質。 DNA可在組織蛋
序列特異性DNA結合蛋白親和層析純化實驗DNA親和介質制備
實驗材料兩種帶有結合位點的合成寡核苷酸各440μg試劑、試劑盒TE緩沖液 pH 7.810×T4噬菌體多核苷酸激酶緩沖液20 mmol L ATP (鈉鹽） pH 7.0150 m Ci mL [γ-32P] ATP (6000 Ci mmol)10 U μL T4噬菌體多核苷酸激酶（New Eng
Azure－Biosystems－DNA和蛋白凝膠成像的應用研究
DNA和蛋白凝膠成像Azure Biosystems所有的成像系統均配備UV，Epi藍光和Epi白光光源用于DNA和蛋白凝膠成像。UV透射光用于DNA凝膠成像和條帶切取成像系統配備了雙紫外透射光，波長分別為302nm和365nm，快速捕獲EB染色的DNA凝膠圖像，同時配備了紫外光安全鎖裝置。條帶切取
Azure－Biosystems－DNA和蛋白凝膠成像的應用研究
DNA和蛋白凝膠成像 Azure Biosystems所有的成像系統均配備UV，Epi藍光和Epi白光光源用于DNA和蛋白凝膠成像。 UV透射光用于DNA凝膠成像和條帶切取 成像系統配備了雙紫外透射光，波長分別為302nm和365nm，快速捕獲EB染色的DNA凝膠圖像，同時配備
TATA結合蛋白
TBP用β-折疊結合到DNA雙螺旋的小溝上，能使TATAbox彎曲80°。主要結合在A、T堿基上，因為這樣有利于扭曲使小溝開放。
序列特異性DNA結合蛋白親和層析純化實驗_DNA親和層析法
實驗材料制備性的DNA親和層析樹脂試劑、試劑盒緩沖液Z或其他柱緩沖液（如緩沖液Ze或TM)配制時含不同的KCl濃度（從緩沖液 Z 0.1 mol L KCl 至緩沖液 Z 1 mol L KCl對緩沖液Z 0. 1 mol L KCl透析的部分純化的蛋白質組分非特異性的競爭DNA柱再生緩沖液柱儲存緩
DNA－酶－I－足跡法對－DNA－上的蛋白質結合位點作圖實驗
實驗材料 新鮮組織、培養的細胞、來自細胞或組織的蛋白成分試劑、試劑盒 細胞勻漿緩沖液細胞重懸緩沖液細胞淋洗緩沖液乙醇Ficoll 400甲酰胺染色液MgCl2 CaCl2 溶液NaClNonidetP-40酚：氯仿磷酸鹽緩沖液聚乙烯醇終止液組織勻漿液組織重懸緩沖液臺盼藍染料DNA 酶 I