細胞分離純化技術

細胞分離純化技術

實驗方法原理 常用來分離人外周血單個核細胞（PBMC）的分層液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖（Ficoll）-泛影葡胺（Urografin）（F/H）分層液。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，水性高，平均分子量為400000，當密度為1.2 g/ml仍未超出正常生理性

細胞分離純化技術

Ficoll密度梯度離心法分離外周血單個核細胞 Percoll不連續密度梯度沉淀法分離純化淋巴細胞和淋巴母細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 常用來分離人外周血單個

細胞分離純化技術

Percoll不連續密度梯度沉淀法分離純化淋巴細胞和淋巴母細胞實驗方法原理Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低（

細胞分離純化技術

Ficoll密度梯度離心法分離外周血單個核細胞 Percoll不連續密度梯度沉淀法分離純化淋巴細胞和淋巴母細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 常用來分離人外周血單個

什么叫分離純化技術

將混合物質通過各種分離方式進行提取。當然分離后的濃縮也是一個純化的步驟。純化方式有很多種，溶劑萃取，樹脂，膜分離等等。

巨噬細胞的分離和純化

巨噬細胞的分離1）從小鼠、豚鼠或家兔腹腔中分離巨噬細胞1．取6周左右的小鼠（或600克左右的豚鼠，或3公斤左右的家兔），剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml（豚鼠20ml，家兔200ml）無菌的液體石蠟或巰基乙酸肉湯或4％淀粉肉湯。3～4天以后收集腹腔細胞。2．如要收集腹腔靜置巨噬細胞，不注射刺激物，

T－細胞亞群的分離純化

?基 本 方 案 間 接 淘 洗 法 分 離 T 細胞亞群材 料親和純化的人免疫球蛋白吸附的羊抗鼠 Ig (Tago)0.05m ol/L Tris ?Cl，pH9. 5抗 CD 8 抗體或其他特異性小鼠抗體（多克隆或單克隆；如 Coulter 或 Becton Dickinson)PBS總 T 細

單個核細胞的分離純化

外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）主要指淋巴細胞和單核細胞，是免疫學實驗最常用的細胞，也是進行T細胞和B細胞分離純化的重要環節。1．原理PBMC的密度與血液中的其他成分不同。紅細胞和粒細胞的密度較大，為1.092左右；淋巴細胞和單核細胞的

T－細胞亞群的分離純化

分離出來的T 細胞用抗CD8 抗體可分為CD4 + 和 CD8+ T 細胞。由于兩種細胞都可回收，此法優于抗體和補體溶解法作者：J.E.科利根等,譯者：曹雪濤等，本實驗來自「精編免疫學實驗指南」實驗步驟基 本 方 案 間 接 淘 洗 法 分 離 T 細胞亞群材 料親和純化的人免疫球蛋白吸附的羊抗鼠

核酸分離純化實驗技術指南

?核酸分離純化實驗技術指南：? ? ? 總RNA提取常見問題分析? ? ? RNA降解? ? ? 1. 新鮮細胞：如果試劑沒有問題，且外源性污染也可以排除，那么降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如? 果將裂解液直接加入培養皿中裂解細胞，一定要使裂解液能覆蓋住細胞。?? ? ? 2. 新鮮組織：某些富含

接種、分離純化和培養技術

一、接種將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種.1、接種工具和方法在實驗室或工廠實踐中,用得最多的接種工具是接種環、接種針.由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分.有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種.在固體培養基表面要將菌液

接種、分離純化和培養技術

一、接種? ? 將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種.1、接種工具和方法? ? 在實驗室或工廠實踐中,用得最多的接種工具是接種環、接種針.由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分.有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種.在固體培

接種、分離純化和培養技術

一、接種　　將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。１、接種工具和方法　　在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面

小鼠精原細胞的分離和純化

【摘要】　目的　探討小鼠精原細胞的分離純化。　方法　用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。　結果　所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布

簡述巨噬細胞的分離和純化

　　1、取2～3公斤重的家兔，耳緣靜脈注射10ml空氣處死動物或注射2ml（含130mg）戊巴比妥麻醉動物。仰臥固定，消毒胸部，剪開胸壁。以下過程注意無菌操作。小心從環狀軟骨下方剪下氣管，分離心臟和血管，取出肺，剪去脂肪和結締組織。用無菌紗布小心擦凈肺表面，稱重。　　2、分離肺泡巨噬細胞：用夾子夾住

小鼠精原細胞的分離和純化

【摘要】　目的　探討小鼠精原細胞的分離純化。　方法　用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。　結果　所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布

小鼠精原細胞的分離和純化

【摘要】　目的　探討小鼠精原細胞的分離純化。　方法　用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。　結果　所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布

植物細胞葉綠體DNA的分離純化

實驗方法原理本實驗首先是制備植物新鮮組織勻漿、過濾,分離出完整的葉綠體,然后通過蔗糖密度梯度離心,把葉綠體與其他亞細胞結構分離開來。完整葉綠體經蛋白酶K酶解后,再通過酚-氯仿抽提獲得高純度的葉綠體DNA。實驗材料植物新鮮幼嫩葉片試劑、試劑盒緩沖液A(提取緩沖液)緩沖液B(裂解緩沖液)TE緩沖液蔗糖溶

植物細胞葉綠體DNA的分離純化

實驗方法原理 本實驗首先是制備植物新鮮組織勻漿、過濾,分離出完整的葉綠體,然后通過蔗糖密度梯度離心,把葉綠體與其他亞細胞結構分離開來。完整葉綠體經蛋白酶K酶解后,再通過酚-氯仿抽提獲得高純度的葉綠體DNA。實驗材料 植物新鮮幼嫩葉片試劑、試劑盒 緩沖液A(提取緩沖液)緩沖液B(裂解緩沖液)TE緩沖液

小鼠精原細胞的分離和純化

實驗概要精原細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、運動、衰老、死亡等項生命活動的調節機制的深入研究，精子發生機理的進一步闡明以及精原細胞異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞，用于體外培養。資料表明，從成年嚙齒類的睪丸分離粗線

蛋白質分離純化常用技術

1、沉淀，2、電泳：蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的，在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等。3、透析：利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。4、層析：利用蛋白質在固定相與流動相之間不同的分配比例，達到分離目的的技術。a.離子交換層析，利用蛋白

中國生物制藥分離純化技術

接種、分離純化和培養技術（二）

二、分離純化　　含有一種以上的微生物培養物稱為混和培養物（Mixed culture）。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞，那么這個菌落稱為純培養（Pure culture）。在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程稱為分離純化，方法有許多種。１、傾注平板法　

接種、分離純化和培養技術（一）

一、接種　　將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。１、接種工具和方法　　在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面

蛋白質分離純化技術詳解

沉淀法沉淀法也稱溶解度法。其純化生命大分子物質的基本原理是根據各種物質的結構差異性來改變溶液的某些性質，進而導致有效成分的溶解度發生變化。1、鹽析法鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數值時，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐

膜分離技術系統應用澄清純化技術

　　超/微濾膜系統　　澄清純化分離所采用的膜主要是超/微濾膜，由于其所能截留的物質直徑大小分布范圍廣，被廣泛應用于固液分離、大小分子物質的分離、脫除色素、產品提純、油水分離等工藝過程中。　　超/微濾膜分離可取代傳統工藝中的自然沉降、板框過濾、真空轉鼓、離心機分離、溶媒萃取、樹脂提純、活性炭脫色等工藝

細胞分離技術

1. ?從原代組織中分離細胞 將組織塊分離（散）成細胞懸液的方法有多種，zui常用的是機械解離細胞法、酶學解離細胞法以及螯合劑解離細胞法。?從原代組織中獲得單細胞懸液的一般方法是酶解聚。細胞暴露在酶中的時間要盡可能的短，以保持zui大的活性。下列步驟可以解聚整個組織，獲得較高產量的有活性細胞。?（1

長白豬精原細胞的分離和純化

實驗方法原理酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。實驗材料長白種系公豬試劑、試劑盒膠原酶胰蛋白酶脫氧核糖核酸酶牛血清白蛋白胎牛血清RPMI 1640培養基HE染液PBS儀

長白豬精原細胞的分離和純化

一、材料和方法1、實驗動物長白種系公豬，2月齡，由北京養豬中心葦溝現代化豬場提供。取活體睪丸，立即放入1640營養液中，待分離細胞。2、主要試劑及材料膠原酶（CLS，Sigma），胰蛋白酶（Sigma），脫氧核糖核酸酶（DNase,Promega），牛血清白蛋白（BSA，中國醫學科學院天津血液研究所

長白豬精原細胞的分離和純化

? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。 實驗