腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗可用于:(1)研究腫瘤的發生機理;(2)研究生物學行為;(3)研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰蛋白酶EDTA膠原酶儀器、耗材培養瓶培養皿吸管和膠帽眼科剪眼科鑷二氧化碳培養箱超凈工作臺實驗步驟一、取材人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區,取材時盡量避免用退變組織,要挑選活力較好的部位。癌性轉移淋巴結或胸腹水是好的培養材料。取材后宜盡快進行培養,如因故不能立即培養,可貯存于4 ℃中,但不宜超過24 小時。二、培養基腫瘤細胞對培養基的要求不如正常細胞嚴格,一般常用的RPMI 1640、DMEM、Mc-Coy5A等培養基等皆可用于腫瘤細胞培養。腫瘤細胞對血清的需求比正常細胞低,正常細......閱讀全文
腫瘤細胞培養實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 培養液Hanks胰蛋白酶EDTA膠原酶儀器、耗材 培養瓶離心管實驗步驟 一、成纖維細胞排除法1. ?機械刮除法?是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭(用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲),或裹少許脫脂棉制成,裝入試管中高壓滅菌后備用(也可用特制電熱燒灼器刮除)。刮除程序為(1)標記鏡下
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗 提高腫瘤細胞培養存活率和生長率的實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗可用于:(1)研究腫瘤的發生機理;(2)研究生物學行為;(3)研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰
腫瘤細胞培養
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置,首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正
腫瘤細胞培養
食管癌細胞株表達MMP-2:1.細胞種類:食管癌細胞株;2.培養的天數:2d;細胞倍增時間--24h左右;3.放大倍速:倒置熒光顯微鏡,100倍;4.培養基種類:1640+10%胎牛血清;5.細胞狀態與特征簡述:細胞貼壁生長;6.圖片目的:鑒定食管癌細胞表達MMP-2,胞漿中綠色熒光為MMP-2,細
腫瘤細胞誘導血管生成模型實驗——細胞培養技術
腫瘤細胞誘導血管生成實驗模型可以用于:(1)建立體外實驗模型,方便進一步研究;(2)觀察腫瘤的生長特點以及其特殊性。實驗方法原理無論原發性腫瘤還是繼發性腫瘤,一旦生長直徑超過1~2 mm,都會有血管生成。這是由于腫瘤細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。實驗材料腫瘤細胞試劑、試劑盒DEM藻酸鈉N
腫瘤細胞培養方法
腫瘤細胞培養成功關鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面,腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別,初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1、取材:人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區,取材時盡量避
腫瘤細胞培養技術要點
取材材料主要來源于外科手術或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位,瘤性轉移淋巴結或胸腹水是較好的培養材料。取材后盡快培養,因故不能立即培養者,可凍存。其培養方法及凍存方法同前述正常組織。成纖維細胞排除在腫瘤組織中常混雜有一些成纖維細胞,培養時能與瘤細胞同時生長,并常壓過
體外抗藥腫瘤細胞模型的建立實驗_細胞培養技術
實驗方法原理體外抗藥腫瘤細胞模型的建立實驗采取長時間藥物處理、誘導抗性,最終篩選出具有一定抗性的細胞克隆。實驗材料小鼠試劑、試劑盒小牛血清DMEMDOX儀器、耗材CO2培養箱無菌鋼圈實驗步驟一、培養條件用含10%小牛血清的DMEM培養液,5%CO2,37℃培養。二、實驗步驟1. ?將CHO細胞培養在
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質,如細胞長成片之后,讓細胞片與底物脫離,更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時,則細胞片能卷聚成球體形,成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶,每
提高腫瘤細胞培養存活率和生長率的實驗
實驗方法原理根據人們的經驗,腫瘤細胞在體外不易培養,建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養后,常出現以下幾種情況:1. ?完全無細胞游出或移動;2. ?有細胞移動和游出,但無細胞增殖,細胞長時間處于停滯狀態以致難以傳代;3. ?有細胞增殖,傳若干代后停止生長或衰退死亡;4. ?
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
細胞培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞試劑、試劑盒 70% 乙醇PBS胰酶/EDTA儀器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒,打開安瓿,用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起
細胞生物基本方法:腫瘤細胞培養
腫瘤細胞培養特殊之處在于成纖維細胞的排除(成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長,致難以純化腫瘤組織)。有以下一些方法:1.機械刮除法2.反復帖壁法3.消化排除法4.膠原酶消化法?1)??機械刮除法1.標記:鏡下觀察,用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位。2.刮除:棄掉培養液,把無菌膠刮伸入
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒,打開安瓿,用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
結締組織類細胞培養實驗——巨噬細胞培養實驗
實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得,便于培養,并可進行純化。但屬不繁殖型細胞群,難以長期生存,好的條件下僅能生活2~3 周,因之多用作初代培養。巨噬細胞也能建成無限細胞系;大多來自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW
特殊細胞培養實驗
實驗方法原理 二倍體細胞來源體內二倍體細胞,也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀,便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養,但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀,亦非易事。為此必須采取一些有效的措施,一是低溫凍存,二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理 當初代培養成功,細胞生長增殖形成單層細胞后,進而擴展匯合,占滿一切空間,此時需要進行分離培養。這一操作稱傳代或再培養。如拖延傳代,細胞會因增殖過度,培養基營養枯竭和代謝產物積累而發生中毒。80%匯合或剛匯合細胞是理想傳代階段。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培養液
羊水細胞培養實驗
實驗方法原理羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞,可在體外培養用以檢驗胎兒核型。試劑、試劑盒碘酒酒精營養液血清秋水仙素醋酸甲醇儀器、耗材棉簽棉球鑷子穿針培養瓶實驗步驟1. ?抽取羊水無菌抽取羊水10~20 ml,立即注入無菌離心管中;2. ?離心分離1000 轉/分,離心10 分鐘,去上清,留0.5 ml;
傳代細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒,如果不及時的減少細胞密度,細胞將逐漸衰老死亡
羊水細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞,可在體外培養用以檢驗胎兒核型。 試劑、試劑盒 碘酒 酒精 營養液
特殊細胞培養實驗
一、二倍體細胞培養法 加支持物培養法 單細胞分離培養法 多孔塑料培養板單細胞克隆法 球體細胞培養實驗 微載體細胞培養法 懸浮培養法 ? ? ? ? ? ?
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒,如果不及時的減少細胞密度,細胞將逐漸衰老死亡。因此需要將培養物按照比例重新接種到新的培養器皿(瓶)內進行
羊水細胞培養實驗
實驗方法原理 羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞,可在體外培養用以檢驗胎兒核型。試劑、試劑盒 碘酒酒精營養液血清秋水仙素醋酸甲醇儀器、耗材 棉簽棉球鑷子穿針培養瓶實驗步驟 1. ?抽取羊水無菌抽取羊水10~20 ml,立即注入無菌離心管中;2. ?離心分離1000 轉/分,離心10 分鐘,去上清,留0.5
羊水細胞培養實驗
羊水細胞培養實驗實驗方法原理羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞,可在體外培養用以檢驗胎兒核型。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒碘酒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?酒精 ? ?
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
肌組織細胞培養實驗——心肌細胞培養實驗
實驗方法原理心肌組織是最早利用的培養材料,Carrel曾長期培養過雞胚心肌組織,至今心肌仍不失為好的培養物。最常用的是雞胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎兒心肌等都可應用。心肌是比較容易培養和生長的組織,可應用多種方法進行培養,如懸滴培養、組織塊培養和消化培養法等,主要取心室肌培養,均能獲得良好的生長效果。
肌組織細胞培養實驗——神經組織細胞培養實驗
實驗方法原理神經組織主要由兩種神經細胞(神經元)和神經膠質細胞組成。神經元為高度分化的細胞,在組織發生晚期已失掉增殖能力,對生存條件要求高,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或在加入神經生長因子(NGF)和膠質細胞因子時,才能生存,并可能出現一定程度的分化現象,如長出突起等,但卻難使之增殖;即使