凝膠純化實驗
試劑、試劑盒蒸餾水乙醇甲酰胺膠的緩沖液亞甲基藍十二烷基硫酸鈉儲存液TAE 緩沖液Tris 乙酸鹽乙酸納EDTA藍色葡聚糖TEN 緩沖液40mer聚丙烯酰胺膠儀器、耗材解剖刀UV 燈過濾 UV 的安全破璃實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑蒸餾水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀萊特單床離子交換樹脂 MB-1 除去離子，并儲存在暗中）膠的緩沖液是標準的 TBE+6mol/L 尿素亞甲基藍，100X，0.05%十二烷基硫酸鈉儲存液，10%TAE 緩沖液40 mmol/LTris 乙酸鹽20 mmol/L 乙酸納0.2 mmol/LEDTA,pH8.3藍色葡聚糖，1mg/mlTEN 緩沖液10 mmol/LTris-HCl,pH7.910mmol/LNaCl0.1 mmol/LEDTA2. 核酸和寡核苷酸40mer(40bp 寡核苷酸）3. 凝膠聚丙烯酰胺膠，其中丙烯酰胺：雙丙烯酰胺的比值為 100:1(總共 12% 丙烯酰胺），膠的......閱讀全文
凝膠純化實驗
試劑、試劑盒蒸餾水乙醇甲酰胺膠的緩沖液亞甲基藍十二烷基硫酸鈉儲存液TAE 緩沖液Tris 乙酸鹽乙酸納EDTA藍色葡聚糖TEN 緩沖液40mer聚丙烯酰胺膠儀器、耗材解剖刀UV 燈過濾 UV 的安全破璃實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑蒸餾水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀萊特單床離子交換樹脂
凝膠純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 蒸餾水 乙醇 甲酰胺 膠的緩沖液 亞甲基藍 十二烷基硫酸鈉儲存液 TAE 緩沖液 Tris
凝膠純化實驗
試劑、試劑盒 蒸餾水乙醇甲酰胺膠的緩沖液亞甲基藍十二烷基硫酸鈉儲存液TAE 緩沖液Tris 乙酸鹽乙酸納EDTA藍色葡聚糖TEN 緩沖液40mer聚丙烯酰胺膠儀器、耗材 解剖刀UV 燈過濾 UV 的安全破璃實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑蒸餾水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀萊特單床離子交換
DNA純化實驗——DNA凝膠回收試劑盒純化法
DNA純化可用于：（1）獲得高純度的DNA；（2）濃縮DNA；（3）測序、遺傳信息分析等分子生物學應用。實驗方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率為 60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保護劑能防止線狀 D
吸附法純化病毒實驗_?凝膠吸附法
實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒凝膠材料儀器、耗材燒杯實驗步驟磷酸鈣凝膠：這是病毒凝膠吸附法中較為常用的凝膠，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4?溶液混合制備凝膠狀沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸鹽緩沖液懸浮，置千 4℃ 4~5小時使之充分沉淀后應用
從瓊脂糖凝膠中純化－PCR－片段實驗
試劑、試劑盒 乙醇溴化乙錠電泳緩沖液PCR 片段瓊脂糖凝膠細胞和組織儀器、耗材 微量離心管解剖刀紫外燈真空裝置實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑（1）乙酵（95%)（2）嵌入染料，如溴化乙錠（3）TAE 電泳緩沖液? ? ? ? ?40 mmol/L 三羥甲基氨基甲烷-醋酸鹽,pH8.2?
從瓊脂糖凝膠中純化－PCR－片段實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 溴化乙錠 電泳緩沖液 PCR 片段 瓊脂糖凝膠 細胞和組織
從瓊脂糖凝膠中純化－PCR－片段實驗
Wizard SV 膠和 PCR 純化系統是利用硅基法從瓊脂糖凝膠中或從 PCR 擴增反應混合物中直接純化 PCR 片段的方法。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇溴化乙錠電泳緩沖液PCR 片段瓊脂糖凝膠細胞和組織儀器、耗材微量離心管解剖刀紫外燈真空裝置實驗
用制備凝膠電泳純化寡核苷酸實驗
試劑、試劑盒 丙烯酰胺雙丙烯酰胺尿素過硫酸銨 NNN'N'-四甲基乙二胺合成的互補寡核苷酸仲丁醇（2-丁醇)二乙醚 NaOAcMgCl2 乙醇TBE 甲酰胺加樣緩沖液 TE儀器、耗材 SpeedVac 旋轉濃縮儀實驗步驟 材料與設備丙烯酰胺雙丙烯酰胺尿素過硫酸銨（10%;w/v)N,
用制備凝膠電泳純化寡核苷酸實驗
試劑、試劑盒丙烯酰胺雙丙烯酰胺尿素過硫酸銨NNN'N'-四甲基乙二胺合成的互補寡核苷酸仲丁醇（2-丁醇)二乙醚NaOAcMgCl2乙醇TBE甲酰胺加樣緩沖液TE儀器、耗材SpeedVac 旋轉濃縮儀實驗步驟材料與設備丙烯酰胺雙丙烯酰胺尿素過硫酸銨（10%;w/v)N,N,N'
用制備凝膠電泳純化寡核苷酸實驗
用制備凝膠電泳純化寡核苷酸實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 丙烯酰胺 雙丙烯酰胺 尿素
RNA分離與分析實驗_用丙烯酰胺尿素凝膠純化RNA
實驗材料RNA試劑、試劑盒TBE 緩沖液丙烯酰銨溶液過硫酸銨水溶液RNA 染色液儀器、耗材玻璃板實驗步驟1. 準備下列溶液：TBE 緩沖液：Tris 堿 54 g，硼酸 27.5 g，0.5 mol/L EDTA ( pH 8.0)? 20 ml，溶解并加水至 1000 ml。當發現貯存液有白色沉淀
免疫純化實驗
實驗方法原理 制備免疫親和柱要求抗體首先共價結合到介質上。另一方法是將抗體結合到蛋白 A 或 G 小珠上，再用交聯劑固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 結合在杭體的 Fe 區， 所以結合抗原的部位獲得充分暴露，從易于接近。免疫親和柱制備完成后，抗原溶液即可以上樣，接著洗去污染物，然后洗脫抗
純化DNA實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 TBS抽提緩沖液儀器、耗材 離心管實驗步驟 1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌 2 次，用刮棒把細胞刮入約 0.5 ml 的 TBS 中，將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中，
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
純化RNA實驗
從培養的細胞中純化總RNA 從組織中純化總RNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
免疫純化實驗
在蛋白質純化方法中抗體親和純化是非常有效的方法之一。僅此一步常可獲得 1000～10 000 倍的純化。如果抗體與目的蛋白的結合的特異性得到證明，并且洗脫的目的蛋白沒有受到不可逆的損傷，那么可以認為免疫純化是極好的蛋白質純化方法，特別是用在純化過程的最后步驟。實驗方法原理制備免疫親和柱要求抗體首先共
免疫純化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 制備免疫親和柱要求抗體首先共價結合到介質上。另一方法是將抗體結合到蛋白 A 或 G 小珠上，再用交聯劑固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 結合在杭體的 Fe 區， 所以結合抗原的部位獲得充分暴露，從易于接近。免疫親和柱
DNA純化實驗
實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性，所以被分離開來。實驗材料?PCR產物試劑、試劑盒?PCR清潔試劑盒儀器、耗材?96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗
DNA純化實驗
PCR清潔試劑盒純化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
純化凝膠選擇的具體方法(2)
9.純化——包涵體蛋白包涵體蛋白往往需溶于6M鹽酸胍或8M尿素中。高化學穩定性的Superose 12及Sepharose 6FF凝膠過濾介質很適合在變性條件下做純化。變性純化后的蛋白需要復性至蛋白的天然構象。Superdex 75、Q Sepharose FF和Phenyl Sepharo
純化凝膠選擇的具體方法(1)
生物分子下游純化的對象一般包括蛋白、酶、重組蛋白、單抗、抗體及抗原、肽類、病毒、核酸等。純化前首先需要測定生物分子的各物理和化學特性，然后通過實驗選擇出最有效的純化流程。1.測定——分子量、PI當目標蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚時，可用PAGE電泳方法或層析方法加以測定。分離范圍廣闊的Su
PCR產物是否需要用凝膠純化？
如凝膠分析擴增產物只有一條帶,不需要用凝膠純化。如可見其他雜帶,可能是積累了大量引物的二聚體。少量的引物二聚體的摩爾數也很高,這會產生高比例的帶有引物二聚體的克隆,而非目的插入片段。為此需在克隆前做凝膠純化。
純化凝膠選擇的具體方法(3)
15.脫鹽、小分子去除使用凝膠過濾介質Sephadex G10，G15，G25，G50等去除小分子，效率高，處理量可達床體積30%。只需在進樣后收集首1/3-1/2柱體積的洗脫液，就可以去除該填料分離范圍上限以下的小分子，簡單直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整個過程一般可于數分鐘
濾膠過濾層析法蛋白質的純化實驗_凝膠過濾層析法
凝膠過濾層析是一項重要的蛋白質純化技術，又稱為大小排阻、凝膠排阻、分子篩或凝膠過濾層析這種方法利用分級分離，而不需要蛋白質的化學結合，這就明顯降低了因不可逆結合所致的蛋白質損失和失活。另外，可利用此法更換蛋白質的緩沖液或降低緩沖液的離子強度。在蛋白質純化操作中何時使用凝膠過濾，還不能一概而論，有時純
純化DNA實驗_純化質粒（堿裂解法）
實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒LB葡萄糖緩沖液乙酸鉀儀器、耗材離心管實驗步驟1. 單個大腸桿菌克隆接種到 2 ml 含適當抗生素的 LB 中。37℃ 劇烈振蕩孵育 5~8 小時。或者可以培養過夜使飽和。2. 倒 1.5 ml 培養液到已作標記的微量離心管中。把剩下的培養液存放在 4℃。3. 在微量離心
凝膠遷移實驗（EMSA）——凝膠遷移
凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA）可以：（1）研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用；（2）可用于DNA定性和定量分析；（3）用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。實驗方法原理一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。這一技術最初
抗體的純化實驗
實驗方法原理利用細菌胞壁蛋白的特性可以提供了一個快速、簡捷、特異、高效的抗體純化方法。這里細菌胞壁蛋白主要指蛋白 A 和蛋白 G，它們分別從金黃色化膿性葡萄球菌和 G 組鏈球菌分離純化。它們能特異結合到免疫球蛋白的 Fe 部分。由于它們對不同的免疫球蛋白有不同的親和力，所以應根據免疫球蛋白的種類和類
PCR－產物純化實驗
試劑、試劑盒 TE 或去離子水PCR 產物儀器、耗材 離心機和轉子PCR 濾 件微量離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液TE(lOmmol/L Tris-HCl，lmmol/L EDTA，pH7.5) 或去離子水2. 核酸和寡核苷酸待測序的 PCR 產物3. 離心機和轉子帶有固定傾角轉子的小型