一、材料
1. 移液管圓筒(用于收集用過的移液管)
2. 消毒劑:次氯酸鹽,用清潔劑稀釋,**少應含有 300 μg/g 的氯(如常規用的次氯酸鈉)
3. 清潔劑(如 7 X 或 Decon)
4. 不銹鋼籃子(收集清洗過的移液管然后晾干)
5. 無菌指示器
6. 移液管罐(在兩端分別有硅樹脂墊的正方形的鋁或不銹鋼的容器;正方形的罐子不會滾動)
7. 無菌指示膠帶或塞(Bennett)
8. 滅菌烤箱:在有風扇的情況下溫度可以達到 160°C,更適宜使用可記錄溫度計和易彎曲的探針。
二、操作步驟
收集和清洗
1. 將含有消毒劑的清潔劑倒入裝移液管的圓筒中。
2. 用后取掉吸頭,立即將移液管棄于圓筒中。
(a) 不要將移液管放在層流罩內,也不能讓它變干。
(b) 不要將用于吸瓊脂或硅樹脂(防水劑或防沫劑等)的移液管與普通移液管放在同一個圓筒中。可用一次性的移液管吸硅樹脂,吸完瓊脂的移液管應用加熱的自來水清洗,或者也可用一次性的移液管。
3. 移液管需浸泡過夜或**少 2 h。如果移液管的用量很多,應不時將裝滿的圓筒取回,加清洗液前先浸泡 2 h。
4. 浸泡后通過壓縮空氣取出棉花塞。
5. 將移液管放入移液管清洗器中,**朝上。
6. 用自來水通過清洗器的虹吸作用清洗移液管,**少 4 h,也可用帶有移液接頭的自動清洗機來清洗,但不要加清潔劑。
7. 將閥門轉到去離子水(DW)或反向滲透水(ROW)處,或者等自來水沖洗完畢后,再用 DW 或 ROW 灌滿、倒空,重復沖洗 3 次(在玻璃器皿清洗機中用自動去離子水漂洗循環)。
8. 將移液管放入移液管干燥機或烤箱中,**朝上。
9. 用棉花塞住管口。
10. 將移液管按大小分類并儲存在無塵環境中。
滅菌
1. 將移液管放入裝移液管的罐中(兩端貼上標有移液管大小的標簽是非常重要的)。
2. 每個罐子裝同一大小的移液管。
3. 少數幾個罐子裝 1 ml、2 ml、10 ml、25 ml 的移液管(例如,每個型號裝 4 個)。
4. 在蓋子和罐子之間貼上無菌指示膠帶,并在膠帶上寫上日期。
5. 干熱滅菌,160°C 1 h。要盡可能少用膠帶,或換用溫度指示標簽(Alpha Medical;Bennnet),此標簽很小并不含爆炸性物質。要在烤箱的中心檢測溫度,以保證這個**難到達的部位也能滿足**低的滅菌條件。要保證烤箱 中的罐子之間有一定的空隙,這樣可以使熱空氣流通。
6. 從烤箱中取出移液管,冷卻后將罐子拿到組織培養實驗室。移液管可放置 48 h 以上,但要沿著罐子蓋周圍貼上膠帶。
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