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    關于反轉錄病毒載體的應用介紹

    反轉錄病毒載體是常用的病毒載體之一。反轉錄病毒的DNA基因組的兩端各有一個長末端重復序列(5'—LTR和3'—LTR),有一個包裝病毒顆粒時必需的非編碼序列ψ+,同時有三個編碼蛋白質的基因gag、pol和env。 反轉錄病毒載體可以容納外源DNA的長度在10 kb左右,以很高的轉染率感染宿主細胞,特別是分裂中的細胞。轉入宿主的細胞后,反轉錄病毒載體隨即整合到宿主細胞基因組內,這種整合的位點是隨機的。反轉錄病毒載體在構建時,刪去了poi、env基因和gag基因的3’端,但保留了病毒顆粒所需的ψ+序列。其目的是在于提高載體的安全性,防止反轉錄病毒進入宿主細胞后進行增殖并包裝成病毒顆粒對宿主細胞造成可能的傷害。這樣,在制備反轉錄病毒載體時,就必須有一個輔助細胞系,這種細胞內有缺陷型病毒可以提供包裝用的外殼蛋白,但自身沒有包裝信號。這樣,反轉錄病毒載體就可利用這些外殼蛋白包裝成病毒顆粒在輔助細胞系內大量擴增。反轉錄......閱讀全文

    轉錄圖譜的轉錄圖譜的意義

    在于它能有效地反應在正常或受控條件中表達的全基因的時空圖。通過這張圖可以了解某一基因在不同時間不同組織、不同水平的表達;也可以了解一種組織中不同時間、不同基因中不同水平的表達,還可以了解某一特定時間、不同組織中的不同基因不同水平的表達。人類基因組是一個國際合作項目:表征人類基因組,選擇的模式生物的D

    RNA復制、轉錄與逆轉錄

    轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

    RNA的轉錄和逆轉錄

    轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

    胃食道反流的抗反流手術治療

      抗反流手術是不同術式的胃底折疊術,目的是阻止胃內容物反流入食管。抗反流術指征為:  ①嚴格內科治療無效;  ②雖經內科治療有效但患者不能忍受沉淀服藥;  ③經擴張治療后仍反復發作的食管狹窄,特別是年輕人;  ④確證由反流引起的嚴重呼吸道疾病。除第4項為絕對指征外,近年由于PII的使用,其余均已成

    慢性反流性腎病反流的診斷方法

      到目前為止排尿性膀胱尿路造影(MCU)仍為VUR檢測及分級的金標準即通過導尿管注入76%泛影葡胺100ml加生理鹽水500ml,在X線透視監測下,令病人排尿,觀察膀胱尿液有否向上反流。反流分為5級。1級:尿液反流只達到輸尿管下1/3段;2級:尿液反流達到輸尿管、腎盂及腎盞但無擴張,腎盂穹窿正常;

    轉錄因子的轉錄調控區的介紹

      同一家族的轉錄因子之間的區別主要在轉錄調控區。  轉錄調控區包括轉錄激活區(transcription activation domain)和轉錄抑制區(transcription repression domain)二種。近年來,轉錄的激活區被深入研究。它們一般包含DNA結合區之外的30-10

    關于體外轉錄的轉錄條件介紹

      轉錄模板必須滿足:  1. 在基因組全長克隆過程中,在正向引物5‘末端添加T7啟動子序列;  2. 以T7啟動子作為體外轉錄啟動子,在啟動子后面靶位序列連續帶有3個G,轉錄效率最 高;  3. 在正向引物5/端添加一個帽子G,有利于提高體外轉錄RNA分子的侵染活性。

    超高純度反玉米素與反玉米素核苷

    在植物組織培養科研與產業應用中,有一類細胞分裂素非常重要!今天的主角是反玉米素(反式玉米素,trans-Zeatin)和其衍生物-反玉米素核苷(反式玉米素核苷,trans-Zeatin Riboside),但故事得從玉米素講起:??※ 玉米素(Zeatin,ZT):?是一種天然植物細胞分裂素(cyt

    反受體的定義

    中文名稱反受體英文名稱counter receptor定  義細胞表面的受體介導細胞之間的相互作用,一個細胞表面的受體可能是另一個細胞表面受體的配體,這時前者被稱為后者的反受體。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),信號轉導(二級學科)

    反密碼子

    反密碼子(anticodon):RNA鏈經過折疊,看上去像三葉草的葉形,其一端是攜帶氨基酸的部位,另一端有3個堿基。每個tRNA(transfer RNA)的這3個堿基可以與mRNA上的密碼子互補配對,因而叫反密碼子。 tRNA分子二級結構的反密碼環中部的三個相鄰核苷酸組成反密碼子。它們與結合在核糖

    反膠團萃取

    反膠團萃取(reversed micellar extraction)的研究始于20世紀70年代,是一種發展中的生物分離技術。反膠團萃取的本質仍是液-液有機溶劑萃取,但與一般有機溶劑萃取所不同的是,反膠團萃取利用表面活性劑在有機相中形成的反膠團(reversed micelles),從而在有機相內形

    絮凝與反絮凝

    微粒表面帶有同種電荷,在一定條件下相互排斥而穩定。雙電層的厚度越大,則相互排斥的作用力就越大,微粒就越穩定,在體系中加入一定量的某種電解質,可能和微粒表面的電荷,降低表面帶電量、降低雙電層的厚度,使微粒間的斥力下降,出現絮狀聚集,但振搖后可重新分散均勻。這種現象叫作絮凝(flocculation),

    關于轉錄因子的轉錄抑制區的介紹

      也是轉錄因子調控表達的重要位點,但是對其作用機理研究尚不深入。可能的作用方式有三種:1)與啟動子的調控位點結合,阻止其它轉錄因子的結合;2)作用于其它轉錄因子,抑制其它因子的作用;3)通過改變DNA的高級結構阻止轉錄的發生。  轉錄因子必須在核內作用,才能起到調控表達的目的。因此,轉錄因子上的核

    部分食品品牌“降反”-防“反”要看配料表

      專家提醒  防“反”要看配料表  警惕起酥油、人造奶油  在此次調查采訪中,也有部分企業未回應產品是否含反式脂肪酸,而是告訴記者,氫化油并非一定含有反式脂肪酸。對此,中山大學營養學教授蔣卓勤回應,氫化油若完全氫化的確不會留有反式脂肪酸,但完全氫化的結果是產生飽和脂肪酸,這一物質同

    核轉錄分析

    實驗材料 cDNA0.45um 硝酸纖維素 尼龍膜 酵母 tRNA試劑、試劑盒 PBS NP-40 裂解緩: 20XSSC LNaOH 甘油儲存緩沖液 10X 轉錄緩沖液 核苷酸:ATPGTPCTP 200uCi「α32P]-UTP 10XSET 蛋占酶 K 無 RNase 的 DNase

    核轉錄分析

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 cDNA 0.45um 硝酸纖維素 尼龍膜 酵母 tRNA 試劑、試劑盒 PBS

    RNA-反轉錄

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 poly(A)+RNA 反轉錄酶 鼠源反轉酶 ?或禽源反轉錄酶 試劑、試劑盒 oligo

    體外轉錄

    ·?????????In Vitro RNA Transcription?(Promega)For?in vitro?preparation single-stranded RNA probes or microgram quantities of defined RNA transcripts f

    轉錄因子組成

    真核生物在轉錄時往往需要多種蛋白質因子的協助。一種蛋白質是不是轉錄結構的一部分往往是通過體外系統看它是否是轉錄起始所需要的。一般這些促成轉錄起始所需的轉錄結構包括三個重要的組成部分:亞基RNA聚合酶的亞基,它們是轉錄必須的,但并不對某一啟動子有特異性。復合物某些轉錄因子能與RNA聚合酶結合形成起始復

    輔助轉錄因子

    中文名稱輔助轉錄因子英文名稱ancillary transcription factor定  義協助RNA聚合酶同啟動子結合,并促進已結合的RNA聚合酶啟動轉錄速率的轉錄因子。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞遺傳(二級學科)

    CCAAT轉錄因子

    中文名稱CCAAT轉錄因子英文名稱CCAAT transcription factor定  義可與啟動子中的CCAAT元件發生特異性相互作用的轉錄因子。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞遺傳(二級學科)

    轉錄的特點

    轉錄時,細胞通過堿基互補的原則來生成一條帶有互補堿基的mRNA,通過它攜帶密碼子到核糖體中可以實現蛋白質的合成。與DNA的復制相比,轉錄有很多相同或相似之處,亦有其自己的特點。轉錄中,一個基因會被讀取并復制為mRNA。就是說,以特定的DNA片段作為模板,以DNA依賴的RNA聚合酶作為催化劑,合成前體

    RNA-反轉錄

    ?實驗材料 poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin實驗步驟 一材料與設備1)p

    RNA的轉錄與逆轉錄相關介紹

    轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

    轉錄組測序與轉錄表達譜測序的異同

    轉錄組測序可以得到特定條件下所有mRNA轉錄本的豐度信息,從而發現新的轉錄本和可變剪接體基因表達譜(gene expression profile):指通過構建處于某一特定狀態下的細胞或組織的非偏性cDNA文庫,大規模cDNA測序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群體組成,從而描繪該特

    轉錄組測序和全轉錄組測序的區別

    全轉錄組廣義上是指細胞在特定狀態下所能轉錄出來的?所有RNA的總和,包括mRNA和非編碼RNA?。借助高通量測序技術,可以全面獲取樣本中轉錄產物信息,結合競爭性內源RNA ( ceRNA)機制, 進行聯合分析,深入挖掘轉錄水平調控網絡。轉錄組測序的研究對象為特定細胞在某一功能狀態下所能轉錄出來的所有

    反流攻擊因子增強引起的胃食管反流癥狀介紹

      防御功能下降出現胃食管反流,反流物造成食管效膜損傷。受損的程度與反流物的質和量有關,也和與部膜接觸的時間有關。其中損害食管部膜最強的是胃酸。ph3時薄膜上皮蛋白變性,同時胃蛋白酶活性增強消化上皮蛋白。研究表明,胃食管反流性疾病者并無胃酸分泌增多,是因頻繁反流造成食管薄膜酸化,H+穿過食管上皮前的

    咽喉反流的治療

    喉咽反流(LPR)是胃內容物(酸和胃蛋白酶如胃蛋白酶)逆行進入喉咽部,導致喉部/下咽部的癥狀。典型的LPR癥狀包括發音困難/聲音嘶啞,咽部咽部,輕度吞咽困難,慢性咳嗽和非生產性咽喉清除。大多數患者相對不了解LPR,只有35%報告胃灼熱。沒有明確的標準能夠可靠地證明酸反流和喉部癥狀之間存在因果關系;食

    反油酸的存儲方式

    儲存于陰涼、通風的庫房。遠離火種、熱源。防止陽光直射。保持容器密封。應與氧化劑分開存放,切忌混儲。配備相應品種和數量的消防器材。儲區應備有泄漏應急處理設備和合適的收容材料。

    反-應-釜-的應用

      反應釜是廣泛應用于石油、化工、橡膠、農藥、染料、醫藥、食品,用來完成硫化、硝化、氫化、烴化、聚合、縮合等工藝過程的壓力容器。

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